提高乳脂含量、提升奶質(zhì)已成為當(dāng)前奶牛業(yè)研究的重點(diǎn)方向之一。前期經(jīng)GWAS方法研究發(fā)現(xiàn),EEF1D基因5′非翻譯區(qū)（5′-UTR）的G/A突變與乳脂率極顯著相關(guān),為了進(jìn)一步對候選基因EEF1D的突變位點(diǎn)進(jìn)行功能分析,首先通過人工合成獲得了EEF1D基因突變型與野生型片段,并在細(xì)胞水平上對其開展了功能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。研究發(fā)現(xiàn),EEF1D基因5′-UTR的G/A突變引起Sp3轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)后移33 bp,并且突變型的活性大約是野生型的3倍。研究結(jié)果表明,該突變可改變轉(zhuǎn)錄因子的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),從而使EEF1D的表達(dá)上調(diào)。 

【文章來源】：浙江農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào). 2020,32(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

酶切電泳結(jié)果

雙熒光素酶活性檢測實(shí)驗(yàn)結(jié)果見圖3,根據(jù)結(jié)果顯示,pGL3-EEF1Dwt、pGL3-EEF1Dmut的雙熒光素酶活性相對于basic顯著升高(P<0.01),EEF1Dmut的活性大約是EEF1Dwt的3倍(P<0.01),說明突變位點(diǎn)促進(jìn)目的基因的表達(dá)。結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)的預(yù)測結(jié)果,可以推測c.-488A>G突變位點(diǎn)是影響EEF1D基因表達(dá)的關(guān)鍵突變位點(diǎn)。圖3 野生型與突變型重組載體的啟動(dòng)子活性分析

野生型與突變型重組載體的啟動(dòng)子活性分析

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]基于目標(biāo)區(qū)域捕獲測序策略進(jìn)行奶牛產(chǎn)奶性狀功能基因挖掘[D]. 劉軒.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2014
[2]奶牛產(chǎn)奶性狀候選基因EEF1D和PDE9A功能驗(yàn)證[D]. 謝巖.中國農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013

碩士論文
[1]牛AGPAT6基因遺傳多態(tài)性研究及與脂代謝相關(guān)功能的驗(yàn)證[D]. 龍小娟.吉林大學(xué) 2016



本文編號：3122620