胎衣不下（Retained fetal membranes,RFM）是奶牛圍產(chǎn)期常見(jiàn)的繁殖障礙性疾病,其致病因素復(fù)雜多變,研究證實(shí)奶牛的營(yíng)養(yǎng)代謝情況直接影響胎衣外排,對(duì)RFM奶牛整體代謝狀況與RFM發(fā)生關(guān)系的研究有助于揭示RFM的發(fā)生機(jī)理從而制定及時(shí)有效的防控措施。因此本研究通過(guò)液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（Liquid Chromatograph-Mass Spectrometry,LC-MS）技術(shù)鑒定RFM血清差異代謝物并分析其參與的代謝途徑,以差異代謝物谷氨酰胺（Glutamine,Gln）為研究對(duì)象,探究Gln補(bǔ)充對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞免受氧化損傷的保護(hù)作用,初步Gln在RFM疾病發(fā)生中的作用及機(jī)制。本試驗(yàn)選擇年齡、體況、胎次相近的無(wú)其他疾病的RFM奶牛和產(chǎn)后胎衣正常排出奶牛各8頭,分別采集其血清和母體胎盤(pán)組織樣本,通過(guò)LC-MS技術(shù)結(jié)合多元統(tǒng)計(jì)分析篩選RFM奶牛體內(nèi)的差異代謝物,并對(duì)這些差異代謝物進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析和生物信息學(xué)分析;通過(guò)qRT-PCR、ELISA等方法檢測(cè)氧化/抗氧化分子指標(biāo)以及Gln含量。體外實(shí)驗(yàn)觀察不同濃度（0、0.25、0.5、2、4、8 mM）Gln補(bǔ)充對(duì)H

【文章來(lái)源】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)黑龍江省

【文章頁(yè)數(shù)】：87 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

QC樣本BPC圖

RFM奶牛血清代謝組學(xué)分析及Gln對(duì)奶牛RFM發(fā)生調(diào)控機(jī)制的研究18圖2.2多元統(tǒng)計(jì)分析的結(jié)果。A.ESI（+）模式下RFM組對(duì)N組的PCA模型得分散點(diǎn)圖；B.ESI（-）模式下RFM組對(duì)N組的PCA模型得分散點(diǎn)圖；C.ESI（+）模式下RFM組對(duì)N組的OPLS-DA模型得分散點(diǎn)圖；D.ESI（-）模式下RFM組對(duì)N組的OPLS-DA模型得分散點(diǎn)圖；E.ESI（+）模式下RFM組對(duì)N組OPLS-DA模型的置換檢驗(yàn)結(jié)果；F.ESI（-）模式下RFM組對(duì)N組OPLS-DA模型的置換檢驗(yàn)結(jié)果。Fig2.2Resultsofmultivariatestatisticalanalysis.A.ScorescatterplotofPCAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;B.ScorescatterplotofPCAmodelforgroupRFMvsNinESI(-)mode;C.ScorescatterplotofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;D.ThescatteredpointchartoftheOPM-DAmodeloftheRFMgrouptotheNgroupinESI(-)mode;E.PermutationtestofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(+)mode;F.PermutationtestofOPLS-DAmodelforgroupRFMvsNinESI(-)mode.

RFM奶牛血清代謝組學(xué)分析及Gln對(duì)奶牛RFM發(fā)生調(diào)控機(jī)制的研究22圖2.3RFM組對(duì)N組的層次聚類(lèi)分析熱力圖。A.ESI（+）模式下；B.ESI（-）模式下Fig2.3HeatmapofhierarchicalclusteringanalysisforRFMgrouptoNgroup.A.A.ESI(+)model;B.ESI(-)model2.3.4差異代謝物通路分析差異代謝產(chǎn)物的通路分析結(jié)果如表2.6所示，在通路數(shù)據(jù)庫(kù)中總計(jì)有19種差異代謝物具有映射通路。應(yīng)用MetPA數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)R組與N組奶牛血清ESI（+）/ESI（-）兩種模式下篩選出的差異代謝物映射的通路進(jìn)行濃縮和拓?fù)浞治�，以篩選出與代謝物相關(guān)性最高的關(guān)鍵通路，結(jié)果以氣泡圖形式表示（圖2.4）。氣泡圖中各個(gè)氣泡分別不同的某一代謝通路，氣泡的大小及其對(duì)應(yīng)的橫坐標(biāo)表示該通路在拓?fù)浞治鲋械挠绊懸蜃哟笮�，氣泡越大或橫坐標(biāo)越靠右表示影響因子越大；氣泡顏色的深淺及其對(duì)應(yīng)的縱坐標(biāo)表示該通路在富集分析中的P值的負(fù)自然對(duì)數(shù)即-lnP-value，氣泡顏色越深或縱坐標(biāo)越靠上表示P值越小，富集程度越顯著。兩組奶牛血清中篩選出的差異代謝物主要參與甘油磷脂代謝；D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代謝；谷胱甘肽代謝；醚脂質(zhì)代謝；鞘脂代謝；丙氨酸，天冬氨酸和谷氨酸代謝；初級(jí)膽汁酸的生物合成；苯丙氨酸，酪氨酸和色氨酸的生物合成；苯丙氨酸的代謝；乙醛

【參考文獻(xiàn)】：
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碩士論文
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