H9N2亞型禽流感病毒呈世界性分布，并可以傳播到人類和低等哺乳類動物。我國于1994年首次從雞體內(nèi)分離出H9N2亞型禽流感病毒，近些年我國每年均可分離到大量的H9亞型禽流感病毒，臨床上感染雞常可見蛋雞產(chǎn)蛋下降、肉雞生長發(fā)育遲緩甚至死亡的現(xiàn)象，給養(yǎng)禽業(yè)造成較大的經(jīng)濟損失。1998年在廣東省的韶關(guān)和汕頭分別發(fā)現(xiàn)4例和5例H9N2禽流感病毒感染的病例，為全球首次發(fā)現(xiàn)人H9N2流感病毒感染病例，表明H9N2亞型流感還具有重要公共衛(wèi)生意義。為了解我國近年來H9N2亞型禽流感病毒的遺傳變異情況，本試驗對2009²011年分離的30株H9N2亞型禽流感病毒的全基因組進行序列測定，并分析其遺傳演化關(guān)系，且結(jié)合抗原性的分析，以揭示我國H9N2亞型禽流感病毒的流行規(guī)律。研究結(jié)果表明，2009²011年，中國大陸12個省份分離的30個H9N2亞型禽流感病毒分離株表面基因均具有流感病毒低致病性毒株的分子特性，且抗原性發(fā)生一些變化。外部基因HA和NA均未發(fā)生太大的變化。HA基因仍屬于BJ/1/94亞群，且沒有毒株呈現(xiàn)出典型的人流感受體結(jié)合特性。21株毒株的NA基因仍屬... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：187 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 禽流感概述
        1.1.1 病原學(xué)
        1.1.2 流感病毒致病性的微觀基礎(chǔ)
        1.1.3 流行病學(xué)
    1.2 H9N2 亞型禽流感
        1.2.1 簡介
        1.2.2 致病性
        1.2.3 檢測和防治
    1.3 禽流感疫苗
        1.3.1 全病毒滅活苗
        1.3.2 亞單位疫苗
        1.3.3 重組活載體疫苗
        1.3.4 DNA 疫苗
        1.3.5 表位疫苗
        1.3.6 冷適應(yīng)流感弱毒疫苗
    1.4 本研究的目的和意義
第二章 H9N2 亞型禽流感病毒遺傳演化分析
    2.1 試驗材料
        2.1.1 病毒
        2.1.2 SPF 雞胚
        2.1.3 擴增測序引物
        2.1.4 主要試劑和儀器
    2.2 試驗方法
        2.2.1 病毒克隆純化
        2.2.2 病毒基因組 RNA 提取與反轉(zhuǎn)錄
        2.2.3 PCR 與目的片段的回收
        2.2.4 序列測定
        2.2.5 序列拼接
    2.3 試驗結(jié)果
        2.3.1 HA 基因遺傳分析
        2.3.2 NA 基因遺傳分析
        2.3.3 PA、PB1 和 PB2 基因遺傳分析
        2.3.4 NP 基因遺傳分析
        2.3.5 NS 基因遺傳分析
        2.3.6 M 基因遺傳分析
    2.4 討論
第三章 H9N2 亞型禽流感病毒抗原性分析
    3.1 試驗材料
        3.1.1 病毒及標(biāo)準(zhǔn)血清
        3.1.2 SPF 雞胚及 SPF 雞
        3.1.3 主要試劑和儀器
    3.2 試驗方法
        3.2.1 代表株滅活疫苗的制備
        3.2.2 代表株抗體血清的制備
        3.2.3 抗原性分析
    3.3 試驗結(jié)果
    3.4 討論
第四章 H9N2 亞型禽流感病毒與細菌單獨或混合感染 SPF 雞的研究
    4.1 試驗材料
        4.1.1 病毒及菌株
        4.1.2 SPF 雞胚及 SPF 雞
        4.1.3 主要試劑和儀器
    4.2 試驗方法
        4.2.1 試驗動物分組和感染
        4.2.2 臨床觀察
        4.2.3 病毒和細菌分離
        4.2.4 感染雞 HI 抗體檢測
        4.2.5 淋巴細胞增殖刺激指數(shù)測定
        4.2.6 病毒序列鑒定
    4.3 試驗結(jié)果
        4.3.1 臨床觀察結(jié)果
        4.3.2 感染雞病毒及細菌的分離情況
        4.3.3 感染雞血清抗體水平
        4.3.4 淋巴細胞增殖刺激指數(shù)
        4.3.5 病毒測序鑒定結(jié)果
    4.4 討論
第五章 H9N2 亞型禽流感病毒與細菌單獨或混合感染肉雞的研究
    5.1 試驗材料
        5.1.1 病毒及菌株
        5.1.2 SPF 雞胚及非免疫肉雞
        5.1.3 主要試劑和儀器
    5.2 試驗方法
        5.2.1 試驗動物分組
        5.2.2 臨床觀察
        5.2.3 病毒分離
        5.2.4 抗體檢測
        5.2.5 感染對肉雞重量的影響
        5.2.6 病理組織學(xué)觀察
    5.3 試驗結(jié)果
        5.3.1 臨床觀察結(jié)果
        5.3.2 病毒的分離情況
        5.3.3 血清抗體水平
        5.3.4 體重
        5.3.5 病理組織學(xué)觀察
    5.4 討論
第六章 H9N2 亞型禽流感滅活疫苗免疫效果研究
    6.1 試驗材料
        6.1.1 病毒
        6.1.2 SPF 雞胚及 SPF 雞
        6.1.3 主要試劑和儀器
    6.2 試驗方法
        6.2.1 HuN33/PR8 株禽流感滅活疫苗的制備
        6.2.2 HA 基因和 NA 基因同源性的分析
        6.2.3 測定攻毒株病毒的 EID50
        6.2.4 病毒株的抗原性分析
        6.2.5 滅活疫苗免疫效力試驗
    6.3 試驗結(jié)果
        6.3.1 HA 和 NA 基因的同源率比較
        6.3.2 病毒株 EID50測定
        6.3.3 病毒株抗原性分析
        6.3.4 滅活疫苗免疫效力試驗
    6.4 討論
第七章 結(jié)論
參考文獻
附錄
    附錄1 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 HA 基因組序列
    附錄2 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 NA 基因組序列
    附錄3 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 PA 基因組序列
    附錄4 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 PB1 基因組序列
    附錄5 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 PB2 基因組序列
    附錄6 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 NP 基因組序列
    附錄7 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 NS 基因組序列
    附錄8 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 M 基因組序列
    附錄9 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 HA 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄10 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 NA 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄11 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 PA 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄12 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 PB1 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄13 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 PB2 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄14 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 NP 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄15 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 NS 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
    附錄16 30 株 H9N2 亞型禽流感病毒 M 基因的核苷酸和氨基酸的同源性（右上為核苷酸，左下為氨基酸）
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3108154