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雞Prox1蛋白核定位信號的預測與鑒定

發(fā)布時間:2021-03-16 02:37
  Prox1 (prospero-related homeobox protein 1)作為轉(zhuǎn)錄因子,在胚胎發(fā)育與癌癥發(fā)生中具有重要作用。為預測和鑒定雞(Gallus gallus) Prox1蛋白核定位信號(nuclear localization signal, NLS),首先對雞Prox1蛋白進行截短表達,通過熒光觀察和亞細胞定位分析確定其NLS所在區(qū)域。運用在線軟件預測雞Prox1蛋白截短體中假定的NLS (putative NLS, pNLS),構(gòu)建雞Prox1蛋白pNLS缺失體重組真核表達載體并轉(zhuǎn)染細胞,通過觀察缺失體重組蛋白的亞細胞定位確定NLS;進一步將鑒定的雞Prox1蛋白NLS進行保守性分析,并檢測其對外源蛋白的核輸入能力;另外,利用NLS點突變鑒定雞Prox1蛋白NLS中的關(guān)鍵堿性氨基酸位點。結(jié)果表明,雞Prox1蛋白N端(1~220 aa)具有細胞核定位特征,NLS預測結(jié)果顯示其N端存在2個pNLS,分別為pNLS1 (15KRRR18)和pNLS2 (163RAKRAR168... 

【文章來源】:農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學報. 2020,28(11)北大核心

【文章頁數(shù)】:12 頁

【部分圖文】:

雞Prox1蛋白核定位信號的預測與鑒定


雞Prox1蛋白截短體片段擴增(A)及重組真核表達載體的酶切鑒定(B)

雞Prox1蛋白核定位信號的預測與鑒定


雞Prox1截短體重組蛋白的亞細胞定位

雞Prox1蛋白核定位信號的預測與鑒定


雞Prox1蛋白p NLS缺失體的overlap PCR擴增(A)及重組真核表達載體的酶切鑒定(B)


本文編號:3085256

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