小鵝瘟是導致雛鵝死亡的常見疾病之一,可造成巨大經(jīng)濟損失,嚴重危害養(yǎng)鵝業(yè)的發(fā)展�，F(xiàn)有弱毒活疫苗和小鵝瘟抗體的廣泛應用,在我國小鵝瘟疫病防控過程中發(fā)揮了巨大的作用。但活毒疫苗存在毒力返強的潛在危害,從而限制了其生產應用,因此研究小鵝瘟滅活疫苗顯得尤為重要。本研究對小鵝瘟分離毒株的生物學特性進行了系統(tǒng)研究,篩選出免疫原性好、繁殖滴度高的小鵝瘟野毒株作為滅活疫苗候選株,并開展了生產工藝、乳化工藝和免疫效力研究工作,以期制備出安全、高效的小鵝瘟滅活疫苗,為我國小鵝瘟疫病的防控和凈化提供有力工具。1、小鵝瘟病毒疫苗候選株的篩選為了研制與當前小鵝瘟流行株匹配的疫苗,本研究對從2009～2011年江蘇省養(yǎng)鵝地區(qū)疑似小鵝瘟的臨床樣品中共分離了 5株鵝細小病毒（GPV）,同時對分離株進行VP3基因測序并繪制遺傳進化樹,序列分析結果表明GPV分離株與國內大部分分離株屬于同一分支,明顯不同于國內疫苗株SY61和臺灣主要分支。對獲得的毒株經(jīng)有限稀釋法純化,并對純化后的病毒進行繁殖性能、毒力、特異性及免疫原性等進行了測定,5株病毒均屬于強毒株,其中 Gosling plague virus/taizhou/10（... 

【文章來源】：揚州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：100 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖２－１胚體病變照??Ｆｉｇｕｒｅ?２－１?Ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ?ｃｈａｎ?ｇｅｎｓ?ｏｆ?ｅｇｇ?ｂｏｄｙ??

２．?２．?４．１?ＶＰ３基因擴增及鑒定??ＧＰＶ各分離株ＶＰ３基因擴增產物經(jīng)１％瓊脂糖凝膠電泳分析，均可見約５３９ｂｐ的目的??條帶，ＤＮＡ大小與預期的結果相符，電泳圖片見圖２－３。?????－？??■■■■??圖２－３分離株ＶＰ３基因ＰＣＲ鑒定結果??Ｆｉｇｕｒｅ?２－３?Ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｈｅ?ＶＰ３?ｇｅｎｅｂｙ?ＰＣＲ??Ｍ：?ＤＮＡ?ｍａｒｋｅｒ?ＮＪ０９?株?２：?ＴＪ１０?株?３：?ＮＴ０９?株??４：?ＹＺｌｌ株５：?ＹＺ１０株＋：陽性對照陰性對照??２．?２．４．２?ＶＰ３基因序列分析??將擴增的目的片段送南京金斯瑞生物科技有限公司測序后，對測定的基因進行序列分??析，ＢＬＡＳＴ結果顯示，５株分離株的基因序列均與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中的ＧＰＶ最為相近（見??圖２－４）。其中，ＮＪ０９株和ＹＺ１１株基因與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫中收錄的Ｇｏｏｓｅ?ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ?ｓｔｒａｉｎ??ＬＨ?（ＧｅｎＢａｎｋ登錄號：ＫＭ２７２５６０）具有最高的相似性；ＴＺ１０株基因與ＧｅｎＢａｎｋ數(shù)據(jù)庫??中收錄的?Ｇｏｏｓｅ?ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ?ｓｔｒａｉｎ?ＹＺ９９－６?（ＧｅｎＢａ

Ｅ（Ｇｅｎｂａｎｋ登錄號：ＫＣ１８４１３３）遺傳關系最近，該毒株基因組全長為５１２５ｂｐ。ＴＺＩ０株全??基因組與疫苗株ＳＹＧ６１ｖ株（Ｇｅｎｂａｎｋ登錄號：ＫＣ９９６７２９）相比在４６３６ｂｐ－４６８５ｂｐ處有多??處序列插入，見

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]小鵝瘟病毒保護性抗原的原核表達及免疫原性研究[D]. 李書光.中國農業(yè)大學 2016

碩士論文
[1]吉林省養(yǎng)鵝業(yè)現(xiàn)狀及產業(yè)化分析[D]. 劉洪亮.吉林農業(yè)大學 2015
[2]鵝細小病毒的分離鑒定及其全基因測序及結構蛋白的表達[D]. 徐浩.吉林農業(yè)大學 2014
[3]鵝細小病毒病油乳劑滅活疫苗的研制[D]. 李琳.吉林大學 2008
[4]檢測GPV抗體的間接ELISA方法的建立及初步應用[D]. 李永軒.吉林農業(yè)大學 2007



本文編號：3075611