IBRV對牛單核巨噬細胞生物學特性及主要細胞表面分子表達的影響
發(fā)布時間:2021-03-08 20:09
牛傳染性鼻氣管炎病毒(Infectious Bovine Rhinotracheitis Virus,IBRV)能引起以牛呼吸道為主的多種組織感染,近年來該病流行嚴重,給養(yǎng)牛業(yè)帶來極大的經(jīng)濟損失。本研究通過在體外分離培養(yǎng)牛單核巨噬細胞,檢測感染IBRV后第6、12、24及48h牛單核巨噬細胞的吞噬功能、NO分泌量、凋亡及主要細胞表面分子表達動態(tài)變化,從細胞、分子水平分析了IBRV感染牛單核巨噬細胞細后其對免疫學功能的影響。吞噬雞紅細胞試驗結(jié)果顯示,感染IBRV后單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞能力顯著降低(P<0.05);瓊脂糖凝膠電泳和TUENL法檢測未發(fā)現(xiàn)IBRV感染后單核巨噬細胞出現(xiàn)凋亡;應(yīng)用Griess法檢測IBRV對牛單核巨噬細胞分泌NO的影響,結(jié)果顯示,單核巨噬細胞感染IBRV后產(chǎn)生NO的量均高于對照組(P<0.05),攻毒24h時巨噬細胞產(chǎn)生NO量達到最高水平:應(yīng)用流式細胞術(shù)檢測單核巨噬細胞表面分子MHCI、 MHCII、CD14、CDlla的表達動態(tài)變化,結(jié)果顯示IBRV感染會正調(diào)控與抗感染免疫相關(guān)的CD14和CD11a的表達,而負調(diào)控與抗原遞呈相關(guān)的MHCI和MH...
【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
插圖和附表清單
縮略語表
1 引言
1.1 牛傳染性鼻氣管炎
1.1.1 牛傳染性鼻氣管炎病原學
1.1.2 IBR流行病學
1.1.3 IBR的預(yù)防和控制
1.1.4 IBR檢測方法
1.2 單核巨噬細胞生物學特性
1.2.1 單核巨噬細胞與效應(yīng)分子NO
1.2.2 巨噬細胞吞噬功能
1.2.3 巨噬細胞凋亡
1.3 巨噬細胞表面分子
1.3.1 CD11分子功能
1.3.2 CD14分子的功能
1.3.3 MHCI和MHCII分子功能
1.4 研究目的與意義
2 IBRV感染對單核巨噬細胞生物學特性的影響
2.1 材料
2.1.1 病毒與細胞
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要溶液
2.1.4 主要儀器
2.2 方法
2.2.1 MDBK細胞及病毒培養(yǎng)
50測定"> 2.2.2 TCID50測定
2.2.3 牛單核巨噬細胞的分離與培養(yǎng)
2.2.4 單核巨噬細胞分泌NO的檢測
2.2.5 單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞的測定
2.2.6 細胞凋亡的檢測
2.3 結(jié)果
50測定結(jié)果"> 2.3.1 病毒培養(yǎng)及TCID50測定結(jié)果
2.3.2 單核巨噬細胞培養(yǎng)結(jié)果
2.3.3 單核巨噬細胞分泌NO的量
2.3.4 單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞特性的測定
2.3.5 單核巨噬細胞的凋亡
2.4 討論
2.4.1 單核巨噬細胞的NO分泌量
2.4.2 單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞
2.4.3 巨噬細胞的凋亡
2.5 小結(jié)
3 IBRV感染對單核巨噬細胞表達細胞表面分子的影響
3.1 材料
3.1.1 主要試劑
3.1.2 主要儀器
3.1.3 主要溶液
3.2 方法
3.2.1 單核巨噬細胞的分離與培養(yǎng)
3.2.2 細胞表面標記分子CD11a和CD14的檢測
3.2.3 細胞表面標記分子MHCI類和MHCII類分子的檢測
3.3 結(jié)果
3.3.1 表面分子CD14的表達
3.3.2 表面分子CD11a的表達
3.3.3 表面分子MHCI類和MHCII類分子的表達
3.4 討論
3.4.1 巨噬細胞細胞表面分子CD11a及CD14
3.4.2 巨噬細胞表面分子MHCI和MHCII
3.5 小結(jié)
4 結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]淺談牛傳染性鼻氣管炎診斷與防控[J]. 文亮平. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(04)
[2]一氧化氮的功能及其作用機制(Ⅰ)——性質(zhì)與功能[J]. 黃波,陳暢. 生物物理學報. 2012(03)
[3]流式細胞儀的原理、應(yīng)用及最新進展[J]. 趙書濤,武曉東,王策,陳永勤,唐玉國. 現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2011(22)
[4]牛傳染性鼻氣管炎診斷與防治研究進展[J]. 吳建勇,王治才. 獸醫(yī)導刊. 2011(01)
[5]豬圓環(huán)病毒2型與豬細小病毒共感染對豬肺泡巨噬細胞吞噬功能及其干擾素表達水平的影響[J]. 劉祥義,陳立功,宋勤葉,楊芳,李艷琴,左玉柱,焦健達,王秀平. 微生物學報. 2011(01)
[6]牛傳染性鼻氣管炎研究進展[J]. 冷雪,武華. 安徽農(nóng)業(yè)科學. 2011(01)
[7]牛傳染性鼻氣管炎的流行與防控[J]. 王永艷,王仲兵,鄭明學,古少鵬. 動物醫(yī)學進展. 2010(01)
[8]一氧化氮在免疫效應(yīng)機制中的作用及其細胞因子的調(diào)控[J]. 盧秀紅,鄧祝新,黃維義,張為宇. 河南畜牧獸醫(yī)(綜合版). 2009(12)
[9]NO在炎癥及免疫應(yīng)答中的調(diào)節(jié)作用[J]. 范精華,劉康,劉保林. 中外醫(yī)療. 2009(25)
[10]恥垢分枝桿菌疫苗對小鼠巨噬細胞產(chǎn)生一氧化氮的影響[J]. 徐苗,陳保文,沈小兵,蘇城,王國治. 中國醫(yī)學科學院學報. 2009(04)
博士論文
[1]牛傳染性鼻氣管炎病毒和牛病毒性腹瀉病毒分子生物學檢測技術(shù)研究[D]. 季新成.西北農(nóng)林科技大學 2010
[2]表達O型口蹄疫病毒VP1基因的重組牛皰疹病毒1型的構(gòu)建及其在兔體內(nèi)的免疫原性研究[D]. 任憲剛.中國農(nóng)業(yè)科學院 2009
[3]外周血單個核細胞MHC基因表達與早期急性移植排斥的研究[D]. 李向東.山東大學 2007
[4]豬圓環(huán)病毒2型感染對豬肺泡巨噬細胞功能的影響[D]. 周雙海.中國農(nóng)業(yè)大學 2004
碩士論文
[1]牛傳染性鼻氣管炎病毒PCR檢測方法的建立及在進境牛檢疫中的應(yīng)用[D]. 周斌華.揚州大學 2006
[2]牛皰疹病毒Ⅰ型重組抗原的制備及間接ELISA方法的建立[D]. 吳春濤.山東農(nóng)業(yè)大學 2006
[3]牛傳染性鼻氣管炎PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用[D]. 柏亞鐸.吉林農(nóng)業(yè)大學 2002
本文編號:3071601
【文章來源】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)
【文章頁數(shù)】:45 頁
【學位級別】:碩士
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摘要
Abstract
目錄
插圖和附表清單
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1 引言
1.1 牛傳染性鼻氣管炎
1.1.1 牛傳染性鼻氣管炎病原學
1.1.2 IBR流行病學
1.1.3 IBR的預(yù)防和控制
1.1.4 IBR檢測方法
1.2 單核巨噬細胞生物學特性
1.2.1 單核巨噬細胞與效應(yīng)分子NO
1.2.2 巨噬細胞吞噬功能
1.2.3 巨噬細胞凋亡
1.3 巨噬細胞表面分子
1.3.1 CD11分子功能
1.3.2 CD14分子的功能
1.3.3 MHCI和MHCII分子功能
1.4 研究目的與意義
2 IBRV感染對單核巨噬細胞生物學特性的影響
2.1 材料
2.1.1 病毒與細胞
2.1.2 主要試劑
2.1.3 主要溶液
2.1.4 主要儀器
2.2 方法
2.2.1 MDBK細胞及病毒培養(yǎng)
50測定"> 2.2.2 TCID50測定
2.2.3 牛單核巨噬細胞的分離與培養(yǎng)
2.2.4 單核巨噬細胞分泌NO的檢測
2.2.5 單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞的測定
2.2.6 細胞凋亡的檢測
2.3 結(jié)果
50測定結(jié)果"> 2.3.1 病毒培養(yǎng)及TCID50測定結(jié)果
2.3.2 單核巨噬細胞培養(yǎng)結(jié)果
2.3.3 單核巨噬細胞分泌NO的量
2.3.4 單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞特性的測定
2.3.5 單核巨噬細胞的凋亡
2.4 討論
2.4.1 單核巨噬細胞的NO分泌量
2.4.2 單核巨噬細胞吞噬雞紅細胞
2.4.3 巨噬細胞的凋亡
2.5 小結(jié)
3 IBRV感染對單核巨噬細胞表達細胞表面分子的影響
3.1 材料
3.1.1 主要試劑
3.1.2 主要儀器
3.1.3 主要溶液
3.2 方法
3.2.1 單核巨噬細胞的分離與培養(yǎng)
3.2.2 細胞表面標記分子CD11a和CD14的檢測
3.2.3 細胞表面標記分子MHCI類和MHCII類分子的檢測
3.3 結(jié)果
3.3.1 表面分子CD14的表達
3.3.2 表面分子CD11a的表達
3.3.3 表面分子MHCI類和MHCII類分子的表達
3.4 討論
3.4.1 巨噬細胞細胞表面分子CD11a及CD14
3.4.2 巨噬細胞表面分子MHCI和MHCII
3.5 小結(jié)
4 結(jié)論
致謝
參考文獻
作者簡介
【參考文獻】:
期刊論文
[1]淺談牛傳染性鼻氣管炎診斷與防控[J]. 文亮平. 中國畜牧獸醫(yī)文摘. 2012(04)
[2]一氧化氮的功能及其作用機制(Ⅰ)——性質(zhì)與功能[J]. 黃波,陳暢. 生物物理學報. 2012(03)
[3]流式細胞儀的原理、應(yīng)用及最新進展[J]. 趙書濤,武曉東,王策,陳永勤,唐玉國. 現(xiàn)代生物醫(yī)學進展. 2011(22)
[4]牛傳染性鼻氣管炎診斷與防治研究進展[J]. 吳建勇,王治才. 獸醫(yī)導刊. 2011(01)
[5]豬圓環(huán)病毒2型與豬細小病毒共感染對豬肺泡巨噬細胞吞噬功能及其干擾素表達水平的影響[J]. 劉祥義,陳立功,宋勤葉,楊芳,李艷琴,左玉柱,焦健達,王秀平. 微生物學報. 2011(01)
[6]牛傳染性鼻氣管炎研究進展[J]. 冷雪,武華. 安徽農(nóng)業(yè)科學. 2011(01)
[7]牛傳染性鼻氣管炎的流行與防控[J]. 王永艷,王仲兵,鄭明學,古少鵬. 動物醫(yī)學進展. 2010(01)
[8]一氧化氮在免疫效應(yīng)機制中的作用及其細胞因子的調(diào)控[J]. 盧秀紅,鄧祝新,黃維義,張為宇. 河南畜牧獸醫(yī)(綜合版). 2009(12)
[9]NO在炎癥及免疫應(yīng)答中的調(diào)節(jié)作用[J]. 范精華,劉康,劉保林. 中外醫(yī)療. 2009(25)
[10]恥垢分枝桿菌疫苗對小鼠巨噬細胞產(chǎn)生一氧化氮的影響[J]. 徐苗,陳保文,沈小兵,蘇城,王國治. 中國醫(yī)學科學院學報. 2009(04)
博士論文
[1]牛傳染性鼻氣管炎病毒和牛病毒性腹瀉病毒分子生物學檢測技術(shù)研究[D]. 季新成.西北農(nóng)林科技大學 2010
[2]表達O型口蹄疫病毒VP1基因的重組牛皰疹病毒1型的構(gòu)建及其在兔體內(nèi)的免疫原性研究[D]. 任憲剛.中國農(nóng)業(yè)科學院 2009
[3]外周血單個核細胞MHC基因表達與早期急性移植排斥的研究[D]. 李向東.山東大學 2007
[4]豬圓環(huán)病毒2型感染對豬肺泡巨噬細胞功能的影響[D]. 周雙海.中國農(nóng)業(yè)大學 2004
碩士論文
[1]牛傳染性鼻氣管炎病毒PCR檢測方法的建立及在進境牛檢疫中的應(yīng)用[D]. 周斌華.揚州大學 2006
[2]牛皰疹病毒Ⅰ型重組抗原的制備及間接ELISA方法的建立[D]. 吳春濤.山東農(nóng)業(yè)大學 2006
[3]牛傳染性鼻氣管炎PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用[D]. 柏亞鐸.吉林農(nóng)業(yè)大學 2002
本文編號:3071601
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