為了直觀、原位且特異性的檢測豬薩佩羅病毒（porcine sapelovirus,PSV）在感染仔豬后器官和組織中病毒核酸的分布,本研究根據(jù)GenBank中PSV的5′端非編碼區(qū)基因的保守序列設(shè)計并合成1對引物,利用PCR地高辛探針合成的方法制備成原位雜交檢測探針,建立了PSV原位雜交組織切片檢測的方法。應(yīng)用該方法檢測PSV感染仔豬小腸組織,結(jié)果表明陽性信號主要存在與在于腸絨毛上皮細胞和固有層淋巴細胞中,陰性對照無顯色。該方法可以用于組織切片中的PSV核酸的定位,為豬薩佩羅病毒在感染仔豬后器官和組織中病毒核酸分布及致病機理研究奠定基礎(chǔ)。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學報. 2020,40(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：4 頁

【部分圖文】：

PSV組織免疫組化結(jié)果

PCR擴增目的條帶結(jié)果

對ISH檢測陽性的連續(xù)切片進行免疫組化染色。結(jié)果顯示,陽性信號呈棕黃色,位于小腸絨毛上皮細胞的胞質(zhì)中。觀察染色結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)這2種方法對PSV定位具有相同的結(jié)果(圖3)。圖3 PSV組織免疫組化結(jié)果

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]偽狂犬病毒變異株與經(jīng)典株滴鼻感染小鼠后時空分布規(guī)律的研究[D]. 付祖權(quán).華中農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]豬腹瀉病原多重PCR檢測方法的建立及主要病毒進化分析[D]. 孟麗.上海海洋大學 2017



本文編號：3071362