多重TaqMan熒光定量PCR檢測仔豬先天性震顫相關病毒方法的建立與應用
發(fā)布時間:2021-02-12 07:47
旨在研究能夠快速、準確、靈敏地鑒別、診斷引起仔豬先天性震顫的豬非典型瘟病毒(Atypical porcine pestivirus, APPV)、豬瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、豬圓環(huán)病毒3型(Porcine circoviruses type 3, PCV-3)及豬捷申病毒1型(Porcine teschovirus 1,PTV-1)的方法。通過對GenBank中登錄的APPV的NS3基因序列、CSFV的E2基因序列、PCV-3的ORF2基因序列和PTV-1的VP1基因序列進行分析,設計針對4種病毒的特異性引物和TaqMan水解探針。通過對反應條件和反應程序進行優(yōu)化,擬建立針對仔豬先天性震顫相關病毒的多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法。結果顯示,研究得到的多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法能夠特異性檢測APPV、CSFV、PCV-3和PTV-1,而與其他病原無交叉反應;該研究方法對APPV、CSFV、PCV-3和PTV-1的最低檢測量分別為1μl 9.2×102拷貝、48拷貝、56拷貝和17拷貝。重復性試驗結...
【文章來源】:江蘇農業(yè)學報. 2020,36(04)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 病毒與病料
1.2 主要試劑
1.3 引物的設計及合成
1.4 重組質粒標準品的制備
1.5 多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立
1.5.1 反應條件的優(yōu)化
1.5.2 標準曲線的制作
1.5.3 特異性試驗
1.5.4 靈敏性試驗
1.5.5 重復性試驗
1.6 臨床樣品檢測
2 結果與分析
2.1 多重TaqMan熒光定量PCR方法的建立
2.2 標準曲線的繪制
2.3 特異性
2.4 靈敏性
2.5 重復性
2.6 臨床樣品檢測
3 討 論
4 結 論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬瘟引起仔豬先天性震顫的診斷與防制[J]. 羅建,楊小燕,李曉華,戴愛玲. 福建畜牧獸醫(yī). 2005(05)
[2]豬瘟造成的仔豬先天性震顫[J]. 陸文俊,王世昌. 養(yǎng)豬. 1998(01)
[3]仔豬先天性肌陣攣病[J]. 趙文遠,徐福南,羅清生. 中國畜牧獸醫(yī). 1962(08)
本文編號:3030507
【文章來源】:江蘇農業(yè)學報. 2020,36(04)北大核心
【文章頁數(shù)】:7 頁
【文章目錄】:
1 材料與方法
1.1 病毒與病料
1.2 主要試劑
1.3 引物的設計及合成
1.4 重組質粒標準品的制備
1.5 多重TaqMan熒光定量PCR檢測方法的建立
1.5.1 反應條件的優(yōu)化
1.5.2 標準曲線的制作
1.5.3 特異性試驗
1.5.4 靈敏性試驗
1.5.5 重復性試驗
1.6 臨床樣品檢測
2 結果與分析
2.1 多重TaqMan熒光定量PCR方法的建立
2.2 標準曲線的繪制
2.3 特異性
2.4 靈敏性
2.5 重復性
2.6 臨床樣品檢測
3 討 論
4 結 論
【參考文獻】:
期刊論文
[1]豬瘟引起仔豬先天性震顫的診斷與防制[J]. 羅建,楊小燕,李曉華,戴愛玲. 福建畜牧獸醫(yī). 2005(05)
[2]豬瘟造成的仔豬先天性震顫[J]. 陸文俊,王世昌. 養(yǎng)豬. 1998(01)
[3]仔豬先天性肌陣攣病[J]. 趙文遠,徐福南,羅清生. 中國畜牧獸醫(yī). 1962(08)
本文編號:3030507
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