為了解致西藏日喀則市某村死亡綿羊感染的主要病原,試驗對采集的綿羊肝臟、肺臟、脾臟等病料組織進行病原菌的分離培養(yǎng),對分離純化后的細(xì)菌進行革蘭氏染色;根據(jù)染色結(jié)果選擇細(xì)菌鑒定卡和藥敏鑒定卡進行鑒定,并對分離菌進行致病性分析;通過16S rRNA引物對分離菌進行PCR鑒定和遺傳進化分析。結(jié)果表明:分離菌為革蘭氏陰性;對分離的1株優(yōu)勢菌進行全自動微生物鑒定系統(tǒng)VITEK2 Compact System的GN卡鑒定,結(jié)果為鮑曼不動桿菌復(fù)合物;分離菌對氨芐西林/舒巴坦、亞胺培南、慶大霉素、復(fù)方新諾明等8種藥物敏感,對氨芐西林、頭孢呋辛酯、安曲南、呋喃妥因等7種藥物不敏感,對頭孢曲松中度敏感;動物致病性試驗結(jié)果表明,本菌具有一定的毒力;PCR產(chǎn)物測序比對后鑒定該菌為醋酸鈣不動桿菌;遺傳進化分析結(jié)果顯示,該菌與序列號為MG011594.1的醋酸鈣不動桿菌相似性達100%,確定為醋酸鈣不動桿菌。說明西藏日喀則市某村死亡綿羊感染了醋酸鈣不動桿菌,應(yīng)加強防控。 

【文章來源】：黑龍江畜牧獸醫(yī). 2020,(18)北大核心

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圖2 分離菌16S rRNA基因PCR擴增產(chǎn)物鑒定結(jié)果

從GenBank中選取不同種不動桿菌參考株5株(見表1),用軟件MEGA7.0將其16S rRNA 基因序列進行多序列匹配排列,以Neighbor-Joining方法進行同源性比較,并繪制遺傳進化樹,結(jié)果見圖3。結(jié)果表明,Tibet2017與登錄號為MG011594.1的醋酸鈣不動桿菌相似性達 100%,可以確定為醋酸鈣不動桿菌(見圖3)。4 討論

革蘭氏染色結(jié)果(10×40)

【參考文獻】：
期刊論文
[1]黑山羊醋酸鈣不動桿菌的分離鑒定及生物學(xué)特性研究[J]. 饒桂波,曹穎穎,王力波,白安斌,吳健敏.  中國獸醫(yī)雜志. 2015(05)
[2]異育銀鯽（Carassius auratus gibelio）源醋酸鈣不動桿菌表型及分子鑒定[J]. 夏飛,梁利國,顧偉,謝駿.  海洋與湖沼. 2013(03)



本文編號：3024558