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血清4型Ⅰ亞群禽腺病毒的分離鑒定及其卵黃抗體的研制與應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2021-02-03 10:58
  禽類(lèi)心包積水綜合征(Hydropericardium syndrome,HPS)又稱(chēng)安卡拉。ˋngara disease,AD),是由血清4型Ⅰ亞群禽腺病毒(Fowl Adenovirus serotype 4,FadV-4)引起禽類(lèi)以心包積液為主要特征的一種高度接觸性、致病性傳染病。2014年以來(lái),該病從我國(guó)山東、江蘇、廣東等沿海地區(qū)逐步向河北、河南、山西、安徽、湖北等內(nèi)陸省份陸續(xù)擴(kuò)散,給我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。本研究對(duì)山東某雞場(chǎng)臨床診斷為疑似FadV-4感染的病死雞進(jìn)行了病毒分離與鑒定試驗(yàn),獲得了FadV-4分離毒株,并利用該分離毒株制備了油乳劑滅活疫苗及高免卵黃抗體,并進(jìn)行臨床實(shí)驗(yàn)效果評(píng)估。獲得了以下結(jié)果:(1)針對(duì)送檢臨床疑似病料,采用FadV-Ⅰ特異性引物進(jìn)行PCR檢測(cè),結(jié)果為陽(yáng)性,確診為安卡拉病病毒。(2)將臨床病料接種SPF雞胚進(jìn)行動(dòng)物回歸試驗(yàn),可引起雞胚規(guī)律性死亡以及心包積液等典型病變,ELD50為10-6.78/0.1 mL。取上清,經(jīng)血凝性檢測(cè)分離株病毒對(duì)雞紅細(xì)胞無(wú)凝集性。采用Hexon基因的特異性引物進(jìn)行分離株... 

【文章來(lái)源】:西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:63 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

血清4型Ⅰ亞群禽腺病毒的分離鑒定及其卵黃抗體的研制與應(yīng)用


PCR擴(kuò)增結(jié)果

雞胚,稀釋度,病毒,血凝性


圖 2-2 雞胚病變觀察結(jié)果Fig.2-2 Results of observation of the disease of chicken embryo2.3.3 分離毒株血凝性的測(cè)定結(jié)果凝集性試驗(yàn)結(jié)果顯示 SD 株對(duì) 1 %雞紅細(xì)胞無(wú)凝集性。2.3.4 分離毒株病毒含量的測(cè)定結(jié)果各稀釋度的病變情況如表2-1所示,按Reed-Muench法計(jì)算SD株病毒對(duì)SPF雞胚的ELD50為10-6.78/0.1 mL,即10-7.78/mL,SD株病毒具有較高的病毒含量。表2-1 病毒含量的測(cè)定結(jié)果Table 2-1 Results of the determination of virus content稀釋度Dilutiondegree接種雞胚數(shù)(枚)Inoculation of the number ofchicken embryos (pieces)死亡雞胚數(shù)(枚)Number of dead chickenembryos (pieces)未死亡雞胚數(shù)(枚)Number of immaturechicken embryos (pieces10-15 5 0

基因,PCR擴(kuò)增,毒株,血清型


果毒株經(jīng)FadV-Ⅰ Hexon基因特,與預(yù)期大小相符。將其回收錄的34株FadV-Ⅰ的Hexon基因的系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)(圖2-4)及SD株分離毒株的Hexon基因與中,其與23株FadV-4血清型毒株處于不同分支中,其與11株F,進(jìn)而從分子水平證實(shí)SD株M 1 2

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[10]禽腺病毒4型抗體間接ELISA檢測(cè)方法的建立[J]. 劉延珂,萬(wàn)文妍,王貝貝,吳艷陽(yáng),楊東東,高冬生,李永濤,王新衛(wèi),常洪濤,陳陸,王川慶,趙軍.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2017(11)

碩士論文
[1]禽腺病毒血清4型的分離鑒定及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)診斷方法的建立[D]. 白元斌.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2017
[2]血清4型禽腺病毒的分離、致病性及其抗體間接免疫熒光方法的初步建立[D]. 梁廣成.揚(yáng)州大學(xué) 2017



本文編號(hào):3016387

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