肌衛(wèi)星細胞是一種干細胞，存在于膜鞘與肌肉纖維間的靜止細胞，能與肌肉纖維融合成為先驅(qū)細胞應(yīng)對損傷反應(yīng)。肌衛(wèi)星細胞免疫因子的變化直接與旋毛蟲治療自主免疫病、旋毛蟲抗病毒免疫有關(guān)。目前國內(nèi)關(guān)于旋毛蟲感染對衛(wèi)星細胞免疫微環(huán)境調(diào)控的系統(tǒng)研究未見報道。本研究擬通過分離原代衛(wèi)星細胞，利用流式細胞儀和相對熒光定量PCR技術(shù)，探究感染旋毛蟲后，衛(wèi)星細胞免疫因子的一系列變化。本研究采用灌胃感染BALB/c小鼠，從感染組和對照組小鼠的后肢骨骼肌中，利用Percoll連續(xù)離心和差速貼壁法的結(jié)合運用分離出純度較高的肌衛(wèi)星細胞，采用Desmin免疫細胞化學(xué)染色對其進行鑒定，并對分離所得肌衛(wèi)星細胞進行體外培養(yǎng)。采用相對熒光定量PCR和流式細胞術(shù)，對小鼠感染4d、21d、35d后所分離的衛(wèi)星細胞進行檢測。流式細胞術(shù)分析旋毛蟲感染的肌衛(wèi)星細胞，結(jié)果表明，當感染旋毛蟲后，肌衛(wèi)星細胞B7-H1表達量增加，而且在35d形成包囊并且炎癥反應(yīng)減弱后，其表達量也未明顯減少。而ICOSL的表達量卻顯著下調(diào)。熒光定量PCR分析表明，旋毛蟲感染后，肌衛(wèi)星細胞TLR3表達量增加，尤其是在21d最為明顯。PPARs的三個亞型：PPARα、P... 

【文章來源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

肌衛(wèi)星細胞的自我更新模式

果的后肢肌肉經(jīng)過 Percoll 分離，試管為粉紅色的液體，是生長培養(yǎng)基ercoll 之間，是死細胞和細胞碎片于 20％Percoll 和 60％ Percoll 之星細胞；第五層是 60％ Percoll 工圖 1.1 所示。

圖 1.2 肌衛(wèi)星細胞的鑒定結(jié)果Figure 1.2 Identification results of Muscle satellite cellsA: Muscle satellite cells of anti- α-actin antibodyB: Muscle satellite cells of anti- desmin antibody3 討論3.1 實驗動物及取材選取的實驗動物小鼠為 12 g 左右的，因為所提取的衛(wèi)星細胞屬于干細胞，小鼠年齡越大，則肌肉組織中衛(wèi)星細胞的含量則會越少，因此分離肌衛(wèi)星細胞應(yīng)該是選擇越小的鼠越好；可是因為小鼠需要灌胃感染旋毛蟲，太小的小鼠會因為口服感染旋毛蟲肌幼蟲后，不能耐受而死亡。因此，綜合兩方面考慮，則選取了12 g 左右的小鼠，大概是出生后 4 周齡左右的小鼠。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3007469