馬立克氏病病毒（Marek’s disease virus,MDV）糖蛋白C（glycoprotein C,gC）是參與MDV水平傳播的重要毒力因子,但其具體作用機(jī)制尚未明確。研究gC蛋白所需的抗體在國(guó)內(nèi)未見(jiàn)報(bào)道,為簡(jiǎn)化抗體制備程序,本研究采用合成抗原肽免疫的策略,通過(guò)生物信息學(xué)軟件分析發(fā)現(xiàn)gC蛋白的優(yōu)勢(shì)抗原表位主要集中在其69～85氨基酸區(qū)段,據(jù)此合成肽段N-NSESTNEHTITETTGKN-C作為抗原免疫日本大耳白兔。在有弗氏佐劑條件下,5次免疫后采集抗血清,斑點(diǎn)印跡試驗(yàn)顯示制備的抗gC多克隆抗體與合成肽的反應(yīng)效價(jià)為1∶10 000;經(jīng)親和層析柱純化后的gC抗體具有良好的反應(yīng)特異性,對(duì)轉(zhuǎn)染或MDV感染的細(xì)胞中運(yùn)用免疫熒光試驗(yàn)和免疫印跡技術(shù)均能檢測(cè)到特異的陽(yáng)性信號(hào)。與疫苗毒相比,廣西野毒分離株gC蛋白的免疫熒光信號(hào)更強(qiáng)。本研究獲得的MDV的gC多克隆抗體可用于后續(xù)對(duì)gC蛋白功能的研究。 

【文章來(lái)源】：廣西畜牧獸醫(yī). 2020,36(06)

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

間接免疫熒光鑒定MDV gC多抗血清的反應(yīng)特異性

經(jīng)分析,MDV的gC基因相對(duì)保守,不同毒株間差異小,其氨基酸序列較為特異,含有3個(gè)跨膜區(qū)域,其二級(jí)結(jié)構(gòu)多為無(wú)規(guī)則卷曲與β折疊,根據(jù)蛋白抗原性分析結(jié)果,選擇69～85氨基酸的區(qū)段為免疫用抗原多肽(圖1)。2.2 gC兔多抗血清效價(jià)測(cè)定

Dot blot測(cè)定抗血清與合成肽的反應(yīng)效價(jià)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]兔抗人CXCR3-B分子N端多肽多克隆抗體的制備與初步應(yīng)用[J]. 高媛,楊金菊,柳曉蘭,劉莉,劉超燕,Gian P.Visentin,高建恩,孫啟鴻.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2006(02)

碩士論文
[1]ALV引起的免疫抑制對(duì)馬立克氏病疫苗免疫保護(hù)效果的影響[D]. 林璐璐.廣西大學(xué) 2018



本文編號(hào)：2999214