為了建立特異性好和敏感性高的綿羊肺支原體抗體ELISA檢測(cè)方法,以綿羊肺炎支原體Y98標(biāo)準(zhǔn)菌株的全菌蛋白作為抗原,進(jìn)行了反應(yīng)體系和反應(yīng)條件的優(yōu)化篩選。結(jié)果顯示:最佳蛋白抗原包被濃度為1.52μg/mL,最適封閉液及其稀釋濃度為1%BSA,血清樣品的稀釋度為1/50,兔抗山羊IgG的最適稀釋濃度為1/4 000,一抗和二抗的最佳作用時(shí)間為37℃60 min,底物顯色的最佳時(shí)間為10 min;通過(guò)與綿羊肺炎支原體抗體間接血凝試驗(yàn)（IHA）檢測(cè)結(jié)果相比,60份羊血清樣品中Y98 ELISA檢出陽(yáng)性為33份,陰性為20份,二者的檢測(cè)符合率可達(dá)到88.33%,相對(duì)特異性達(dá)90.90%。提示:建立的綿羊肺炎支原體血清抗體檢測(cè)方法具有較高的檢測(cè)敏感性和特異性,為綿羊肺炎支原體的抗體檢測(cè)及其感染的流行病學(xué)調(diào)查提供了一種快速簡(jiǎn)便的檢測(cè)工具。 

【文章來(lái)源】：畜牧與獸醫(yī). 2020,52(06)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

血清最佳反應(yīng)時(shí)間的優(yōu)化

二抗最佳稀釋濃度(a)和最佳作用時(shí)間(b)的優(yōu)化

封閉液的篩選優(yōu)化

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：2996475