作為一種抗菌促生長劑,喹賽多有很大的潛力被添加到飼料中用于促進畜禽類動物的生長,但要成為飼料添加劑必須通過全面嚴格的食品安全評估。迄今為止,關于喹賽多毒作用性質(zhì)的傳統(tǒng)毒理學研究相對較多,但是喹賽多對機體內(nèi)源性代謝的影響還沒有相關的報道。因此,本論文用基于核磁共振波譜的代謝組學方法研究了喹賽多對Kunming小鼠內(nèi)源性代謝產(chǎn)物的影響；為了進一步研究喹賽多對機體內(nèi)源性代謝物影響的種屬差異,我們又設計了喹賽多對Wistar大鼠的急性毒理實驗；在這兩個實驗的基礎上,為了再進一步探討長期喹賽多暴露對機體內(nèi)源性代謝的影響,我們還設計了喹賽多對Wistar大鼠的亞慢性毒理實驗。在亞慢性毒理實驗中,除了傳統(tǒng)的代謝組學方法,我們還采用了大鼠肝臟表達譜全基因組測序以及熒光定量PCR檢測的方法,研究了長期的喹賽多暴露對大鼠肝臟的轉(zhuǎn)錄組的影響。喹賽多對Kunming小鼠的急性毒理實驗一共設計了三個劑量組（100,650,4000mg/kg body weight）和一個對照組。實驗采取的是一次性灌胃給藥的方式,研究了給藥后小鼠尿樣、血樣、肝臟以及腎臟中代謝物水平的變化。在整個實驗期間,代謝物的變化具有劑量依賴... 

【文章來源】：中國科學院大學(中國科學院武漢物理與數(shù)學研究所)湖北省

【文章頁數(shù)】：170 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
目錄
1 引言
    1.1 研究背景與目的
    1.2 代謝組學簡介
        1.2.1 代謝組學的定義
        1.2.2 代謝組學研究方法與特點
        1.2.3 基于NMR的代謝組學研究流程
    1.3 核磁共振（NMR）簡介
        1.3.1 核磁共振（NMR）的基本原理
        1.3.2 化學位移
1和T₂">        1.3.3 弛豫時間T₁和T2

        1.3.4 耦合常數(shù)
        1.3.5 代謝組學中常用的一維核磁譜和二維核磁譜
            1.3.5.1 一維Noesyprld譜或Noesygpprld譜
            1.3.5.2 一維CPMG譜
            1.3.5.3 一維擴散加權(quán)Led譜
1H-¹H JRES">            1.3.5.4 二維J分解譜¹H-¹H JRES
1H-¹H COSY">            1.3.5.5 二維同核化學位移相關譜¹H-¹H COSY
1H-¹H TOCSY">            1.3.5.6 二維¹H-¹H TOCSY
1H-¹³C HSQC譜">            1.3.5.7 二維¹H-¹³C HSQC譜
1H-¹³C HMBC">            1.3.5.8 二維異核多鍵相關譜¹H-¹³C HMBC
        1.3.6 核磁譜中代謝物的歸屬
    1.4 代謝組學的數(shù)據(jù)分析方法
        1.4.1 數(shù)據(jù)預處理
        1.4.2 多元統(tǒng)計數(shù)據(jù)分析
        1.4.3 1D-STOCSY和2D-STOCSY
    1.5 代謝組學的應用
        1.5.1 代謝組學在藥物毒理研究領域的應用
        1.5.2 代謝組學在疾病診斷領域的應用
        1.5.3 代謝組學在植物藥以及中醫(yī)領域的應用
        1.5.4 代謝組學在基因功能研究領域的應用
    1.6 轉(zhuǎn)錄組學簡述
2 喹賽多在Kunming小鼠體內(nèi)急性毒理的代謝組學研究
    2.1 材料與方法
        2.1.1 試劑
        2.1.2 動物試驗
        2.1.3 臨床血生化檢測
        2.1.4 組織病理切片
        2.1.5 肝臟與腎臟組織的提取
        2.1.6 NMR樣品的制備與數(shù)據(jù)采集
            2.1.6.1 NMR樣品的制備
            2.1.6.2 樣品的數(shù)據(jù)采集
        2.1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 血生化檢測結(jié)果
        2.2.2 組織病理檢測結(jié)果
        2.2.3 尿樣、肝臟以及腎臟代謝物的歸屬
        2.2.4 多元統(tǒng)計數(shù)據(jù)模型驗證
        2.2.5 尿樣中代謝物質(zhì)的變化
        2.2.6 肝臟和腎臟中代謝物質(zhì)的變化
    2.3 討論
    2.4 結(jié)論
3 喹賽多在Wistar大鼠體內(nèi)的急性毒理的代謝組學研究
    3.1 實驗材料與方法
        3.1.1 試劑
        3.1.2 動物實驗
        3.1.3 臨床血生化檢測
        3.1.4 組織病理切片
        3.1.5 肝臟與腎臟的組織提取
        3.1.6 樣品的預處理與NMR檢測
            3.1.6.1 NMR樣品的制備
            3.1.6.2 樣品的數(shù)據(jù)采集
        3.1.7 數(shù)據(jù)處理與分析
    3.2 結(jié)果
        3.2.1 血生化檢測結(jié)果
        3.2.2 組織病理學檢測結(jié)果
        3.2.3 大鼠尿樣、血樣和肝臟代謝物的歸屬
        3.2.4 多元統(tǒng)計數(shù)據(jù)模型驗證
        3.2.5 尿樣中代謝物質(zhì)的變化
        3.2.6 肝臟和血漿中代謝物質(zhì)的變化
    3.3 討論
        3.3.1 由藥物代謝所引發(fā)的Wistar大鼠內(nèi)源性代謝組的紊亂
        3.3.2 能量代謝的紊亂
        3.3.3 腸道菌群生命活動所受到的抑制
    3.4 結(jié)論
4 喹賽多在Wistar大鼠體內(nèi)亞慢性毒理的代謝組學和轉(zhuǎn)錄組學研究
    4.1 實驗材料與方法
        4.1.1 試劑
        4.1.2 動物實驗
        4.1.3 臨床血生化檢測
        4.1.4 組織病理切片
        4.1.5 肝臟與腎臟的組織提取
        4.1.6 樣品的預處理與NMR檢測
            4.1.6.1 NMR樣品的制備
            4.1.6.2 樣品的數(shù)據(jù)采集
        4.1.7 數(shù)據(jù)分析
        4.1.8 表達譜全基因組測序
            4.1.8.1 樣本
            4.1.8.2 RNA提取與微陣列檢測
            4.1.8.3 數(shù)據(jù)分析
        4.1.9 qRT-PCR檢測
    4.2 結(jié)果
        4.2.1 實驗期間動物體重以及進食量的變化
        4.2.2 血生化檢測結(jié)果
        4.2.3 組織病理學檢測結(jié)果
        4.2.4 大鼠尿樣、血樣、肝臟以及腎臟代謝物的歸屬
        4.2.5 多元統(tǒng)計數(shù)據(jù)模型驗證
        4.2.6 尿樣中代謝物的變化
        4.2.7 肝臟代謝物的變化
        4.2.8 血樣代謝物的變化
        4.2.9 腎臟代謝物的變化
        4.2.10 表達譜全基因組測序與qRT-PCR結(jié)果
            4.2.10.1 表達譜全基因組測序聚類分析
            4.2.10.2 表達譜基因變化
            4.2.10.3 qRT-PCR檢測結(jié)果
            4.2.10.4 與發(fā)生顯著變化基因有關的通路與網(wǎng)絡
    4.3 討論
        4.3.1 長期的喹賽多暴露所導致的機體脂類代謝的紊亂
        4.3.2 長期的喹賽多暴露所導致機體的糖酵解和三羧酸循環(huán)的紊亂
        4.3.3 長期的喹賽多暴露所導致機體的氨基酸代謝的紊亂
        4.3.4 長期的喹賽多暴露所導致機體的核苷酸代謝的紊亂
        4.3.5 長期的喹賽多暴露所導致機體肝臟的炎性反應
        4.3.6 長期的喹賽多暴露所導致機體神經(jīng)系統(tǒng)的病變
        4.3.7 長期的喹賽多暴露所導致機體腸道菌群的變化
    4.4 結(jié)論
5 總結(jié)與展望
    5.1 Kunming小鼠和Wistar大鼠對喹賽多急性暴露反應的異同
    5.2 Wistar大鼠對喹賽多亞慢性暴露的反應以及其分子生物學機制
    5.3 展望
參考文獻
附錄
作者簡介及在學期間發(fā)表的學術(shù)論文與研究成果
附件


【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
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碩士論文
[1]喹賽多的皮膚光敏毒性和長期毒性研究[D]. 何慶華.華中農(nóng)業(yè)大學 2005



本文編號：2995777

boshi