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糞類圓線蟲感染沙鼠模型的建立及CRISPR/Cas9基因敲除方法的初步嘗試

發(fā)布時間:2021-01-19 12:43
  糞類圓線蟲(Strongyloides stercoralis)是一種常見且分布廣泛,危害嚴重的腸道寄生線蟲,主要感染犬、人和其它靈長類動物。由于糞類圓線蟲獨特的生活史,它可以在宿主體內(nèi)和體外進行交替繁殖。同時糞類圓線蟲自由生活雌蟲具有性腺合胞體結(jié)構(gòu),與雌雄同體的秀麗隱桿線蟲(Caenorhabditis elegans)結(jié)構(gòu)非常相似,因此可以將轉(zhuǎn)基因質(zhì)粒顯微注射至其性腺,達到研究其基因的目的。針對寄生線蟲,目前沒有有效的疫苗,只能依靠化學(xué)藥物進行殺滅和控制。但是由于幾十年來重復(fù)使用幾種常用殺蟲藥物,使得蟲體對其產(chǎn)生了耐藥性,因此開發(fā)抗寄生線蟲疫苗和尋找新的潛在的藥物作用靶點迫在眉睫,而轉(zhuǎn)基因技術(shù)則是應(yīng)用于研究寄生線蟲基因功能所必須的一種重要工具。起源于細菌和古細菌經(jīng)過長期適應(yīng)性免疫逐步形成的Ⅱ型成簇的有規(guī)律間隔短回文重復(fù)系統(tǒng)[Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)/CRISPR-associated nuclease 9(Cas9),CRISPR/Cas9],配合向?qū)NA(g RNA)成為C... 

【文章來源】:華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:98 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

糞類圓線蟲感染沙鼠模型的建立及CRISPR/Cas9基因敲除方法的初步嘗試


糞類圓線蟲的生活史示意圖

示意圖,糞類圓線蟲,蟲卵,形態(tài)


圖 1-2:糞類圓線蟲及其蟲卵的形態(tài)示意圖(周藝燕等 2012)Fig.1-2: The morphology of Strongyloides stercoralis and egg3 糞類圓線蟲病的癥狀及其流行病學(xué)慢性感染:當一次接觸少量糞類圓線感染性三期幼蟲(iL3)蟲時,會形成慢性,這種情況比較多見;颊咄ǔ2槐憩F(xiàn)出明顯不適癥狀,但有時也表現(xiàn)出輕微痛、腹瀉、厭食、消化不良、惡心嘔吐和消瘦等不良癥狀。急性感染:當一次性接觸大量感染性三期幼蟲(iL3)時,只需數(shù)分鐘即可從皮入體內(nèi),并引起輕微的瘙癢、紅腫。約 1 周后,幼蟲移行到肺部和支氣管時,通常表現(xiàn)為哮喘、肺炎或支氣管炎。約 2-3 周過后,進入小腸的寄生雌蟲(PF產(chǎn)卵,形成慢性疾病,不會出現(xiàn)明顯不適癥狀。情況嚴重的患者出現(xiàn)臨床癥狀為便秘、痙攣、間歇性腹瀉、腹痛(林金祥等 2000, 高世華等 2005)。重度感染:感染糞類圓線蟲的多數(shù)患者在感染早期呈現(xiàn)無癥狀或輕微癥狀,因病與機體免疫功能的狀態(tài)緊密相關(guān)。當機體因后天性免疫缺陷,長期大劑量使素和免疫抑制劑或其它疾病導(dǎo)致免疫力和抵抗力大幅下降時,會引起糞類圓線

示意圖,感染率,全球,難民


(4.0%)的糞類圓線蟲(Nicolas et al 2006)。然而在危地馬拉 14914 名孕婦進行檢測,并應(yīng)用低敏感性診斷方法,報告的流lar et al 1989)。這是比較使用不同診斷方法的進行調(diào)查的一個難民和移民進行的研究,其中大部分發(fā)現(xiàn)在移民和難民中感染75%,感染率在很大程度上取決于難民的原籍。在 1990 年的加診斷工具,發(fā)現(xiàn)越南難民的患病率為 11.8%,而柬埔寨難民的orkos et al 1990)。在許多國家,如果移民在醫(yī)院就診,就會經(jīng)沙特阿拉伯進行的一項研究分析了來自不同亞洲國家的 5518 0.6%。其中菲律賓為 0.4%,印度尼西亞為 0.5%,斯里蘭卡為,泰國為 3.4%(Madani et al 1995)。1996 年的調(diào)查結(jié)果顯示,22%,主要流行在我國東南部及南部地區(qū),感染率最高的是海南 1997)。1999 年有報道山東省博興縣居民該蟲感染率為 1.29性別差異(郭建東等 2005)。2007 年有報道云南省勐?h居%(33/283)(姜進勇等 2008)。最新 2017 年報道廣西凌云縣居(8/130)(羅秀秀 2017)。

【參考文獻】:
期刊論文
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[5]長爪沙鼠的行為和生理生態(tài)學(xué)研究進展[J]. 張學(xué)英,遲慶生,劉偉,王德華.  中國科學(xué):生命科學(xué). 2016(01)
[6]sgRNAcas9軟件圖形用戶界面開發(fā)及應(yīng)用[J]. 趙長志,張懿,李廣磊,陳濟良,李京津,任瑞敏,倪攀,趙書紅,謝勝松.  遺傳. 2015(10)
[7]我國土源性線蟲病監(jiān)測現(xiàn)狀及今后監(jiān)測工作重點[J]. 陳穎丹,臧煒.  中國血吸蟲病防治雜志. 2015(02)
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[9]廣州管圓線蟲在長爪沙鼠體內(nèi)的發(fā)育及其引起的病理損害[J]. 韋永芳,陳代雄,梁成結(jié),羅曉東,朱郇憫.  中國人獸共患病學(xué)報. 2014(01)
[10]干燥綜合征感染糞類圓線蟲病1例報告并文獻分析[J]. 陳月馨,謝瑾灼,沈浩賢,周承惇.  熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2011(10)

碩士論文
[1]我國沙鼠屬和短耳沙鼠屬的系統(tǒng)進化分析[D]. 羅光杰.蘭州大學(xué) 2016
[2]子午沙鼠和長爪沙鼠的分子系統(tǒng)地理學(xué)研究[D]. 梁君.安徽大學(xué) 2007



本文編號:2987008

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