為研究遲緩愛(ài)德華菌外膜蛋白PagC的免疫原性,用PCR方法擴(kuò)增遲緩愛(ài)德華菌pagC基因,構(gòu)建重組載體pET-32a-pagC,將其轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21后進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)SDS-PAGE和Western blot分析顯示,重組蛋白大小約40 ku;將純化的重組蛋白免疫小鼠后,以遲緩愛(ài)德華菌強(qiáng)毒株ET-13攻毒,結(jié)果該重組蛋白對(duì)免疫組小鼠具有95%的保護(hù)率。研究結(jié)果為重組PagC蛋白亞單位疫苗的研制奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,41(09)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【部分圖文】：

重組蛋白對(duì)小鼠免疫保護(hù)力

免疫小鼠血清的抗體水平變化

利用PCR方法擴(kuò)增出完整的pagC基因,經(jīng)測(cè)序后與參考序列比對(duì)分析顯示(圖1),愛(ài)德華菌屬成員間pagC基因高度保守,但與其他細(xì)菌缺少序列同源性。以pMD18-T-pagC為模板PCR擴(kuò)增用于表達(dá)的pagC片段(圖2),大小為558 bp,構(gòu)建重組載體pET-32a-pagC經(jīng)EcoRⅠ/SalⅠ雙酶切鑒定,出現(xiàn)大小與PCR結(jié)果一致的條帶�；驕y(cè)序結(jié)果顯示無(wú)突變移碼。2.2 重組蛋白的表達(dá)分析

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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