禽流感（AI）是由禽流感病毒（AIV）引起的多種禽類（野禽和家禽）及鳥類呈現(xiàn)出輕度的呼吸道癥狀或者急性敗血癥特征的疾病。在禽流感的眾多亞型中,世界上主要以H9N2亞型流感為主。該病毒的宿主范圍較廣,主要感染家禽、野禽、人等,其中野禽被作為H9N2AIV的天然儲存庫。由于H9N2亞型流感病毒屬于低致病性禽流感,野禽感染該病毒后,往往表現(xiàn)出無癥狀或僅表現(xiàn)出輕微癥狀,但肉眼觀察不到。隨著野鳥的遷徙,把病毒傳遞到不同地區(qū)和不同的動物體內(nèi),導致該亞型流感病毒的暴發(fā)。因此對野禽尤其是野鳥的H9N2亞型流感病毒的監(jiān)控和防治就顯得尤為重要。本研究在2016-2017年間的野禽流感病毒進行分子流行病學調(diào)查,不僅對分離鑒定的22株H9N2亞型流感病毒進行全基因組擴增和序列測定,同時對測序結(jié)果進行系統(tǒng)進化分析,了解了H9N2亞型流感病毒在野禽體內(nèi)的遺傳變異規(guī)律;對其中分離的8株H9N2亞型野禽流感病毒的HA基因進行受體親和特性鑒定,分析其受體的結(jié)合特性;同時,選擇現(xiàn)行的兩種商品化H9N2亞型流感滅活疫苗進行免疫及攻毒試驗,了解現(xiàn)行疫苗對流行毒株的免疫保護能力,為H9N2亞型流感病毒的防控提供參考依據(jù)。1、在... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學吉林省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1分離株8基因擴增結(jié)果

圖1.3 HA氨基酸序列比對注：藍色表示潛在糖基化位點；綠色表示裂解位點；紫色表示抗原性位點；紅色下劃線表示主要的受體結(jié)合位點Figure 1.3 Comparison of HA amino acid sequencesNote: Blue indicates potential glycosylation sites; green indicates cleavage sites; purple denotes antigenic sites; Redunderline denotes main receptor binding sites1.4 討論H9N2 亞型流感病毒自發(fā)生以來就已經(jīng)在世界范圍內(nèi)廣泛流行，不僅給養(yǎng)禽業(yè)帶來巨大損失，且給人類的健康也帶來潛在的威脅。我國獨特的位置和地理環(huán)境及大量的養(yǎng)殖業(yè)是 H9N2 亞型流感病毒發(fā)生和傳播的首選，而野禽作為 H9N2 亞型流感毒株的天然宿主，對野禽流感病毒流行病學調(diào)查及基因分析進行研究，為預防流感的發(fā)生和傳播提供便利條件。近年來，鞠勇、王海明等人均在各地區(qū)對野禽的 H9N2 亞型流感病毒進行調(diào)查和監(jiān)測[6,22]。本研究對 2016-2017 年間采集到的野禽糞便及棉拭子進行了流感病毒的分離鑒定，結(jié)果表明，從樣品中分離的禽流感病毒主要是以 H9N2 亞型為主，分離率為 2.18 %，與蔣文明等[7]在 2015-2016 年鄱陽湖和青海湖分離的陽性率相比較高，這可能由于調(diào)查的時間、地區(qū)、環(huán)境等的不同導致的。從分離信息中，可以看出野鴨中得到的 H9N2 亞型流感病毒

受體結(jié)合位點分析的受體結(jié)合特性與其受體結(jié)合位點（RBS）密切相關(guān)。0-loop 和 190-helix 3 個結(jié)構(gòu)域組成，這 3 個結(jié)構(gòu)域的氨通過 H9N2 亞型流感病毒的 HA 氨基酸序列比對結(jié)果表明其他位點相對比較保守。本實驗測定的 H9N2 亞型流感病有 98、134、136、153、183、190、194、195、226 和 酸依次為 G、V、Y、W、N、V、L、Y 和 G，且有 3 株 5 株病毒 HA 基因的 226 位為 Q，具體情況見表 2-2。圖2.1 HA基因擴增結(jié)果Fig. 2.1 PCR results of HA genesM：DL2000Marker；1：W94；2：M10-5；3：G10；4：M10-4；5：J146：M10-1；7：M171；8：G6；9：陰性對照M1：DL2000Marker；1：W94；2：M10-5；3：G10；4：M10-4；5：J16：M10-1；7：M171；8：G6；9：Negative control


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