氟喹諾酮類藥物多殘留免疫學(xué)檢測技術(shù)研究
發(fā)布時間:2021-01-15 10:19
氟喹諾酮(fluoroquinolones, FQs)是第三代喹諾酮類藥物,也是近20年來發(fā)展最快、研究最多的一類化學(xué)合成的抗生素,因其具有抗菌譜廣、低毒、高效等特點,而廣泛應(yīng)用于人類臨床與畜牧漁養(yǎng)殖業(yè)中。FQs類抗菌藥為人獸共用藥,動物體內(nèi)藥物殘留通過食物鏈進入人體,對人類健康直接產(chǎn)生危害,可以導(dǎo)致細(xì)菌耐藥性產(chǎn)生,并誘導(dǎo)癌變。因此,世界各國對FQs類抗菌藥在動物源性食品中的殘留制定了最高殘留限量標(biāo)準(zhǔn)(10-1900μg/Kg)。由于FQs藥物種類繁多,建立該類藥物多殘留檢測方法有利于高效、快速的控制動物性產(chǎn)品質(zhì)量安全,因此FQs藥物多殘留檢測方法是目前的研究熱點和趨勢。基于此,本研究經(jīng)過大量的試驗,研制成功了FQs多殘留檢測試劑盒和膠體金免疫試紙。在分析FQs類藥物分子結(jié)構(gòu)和免疫原性基礎(chǔ)上,采用二環(huán)己碳二亞胺(DCC)法將Nor(因Nor的結(jié)構(gòu)是多種FQs類藥物的母核結(jié)構(gòu))分別與牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)進行連接制備免疫抗原(Nor-BSA)和包被抗原(Nor-OVA)。并利用紫外掃描、SDS-PAGE電泳及動物免疫等方法進行鑒定。結(jié)果表明,動物免疫產(chǎn)生的多抗血清能...
【文章來源】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:104 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
氟喹諾酮藥物的結(jié)構(gòu)分類萘啶酸類吡啶酸類喹啉酸類氟嗪酸類
圖 1-2. Nor、BSA、Nor-BSA 紫外掃描圖譜 1-2 UV scanning spectrum of Nor, BSA, Nor-描曲線變化可以看出,BSA 在 250‐300nm 之0‐360nm 之間有兩個吸收峰。偶聯(lián)使紫外吸聯(lián)后產(chǎn)物最大吸收峰稍微左移,說明經(jīng)過偶 果凝膠電泳結(jié)果如圖 1‐3。左邊的 Marker 標(biāo)準(zhǔn) 97.4KD,66.4KD,43.0KD,31.0K,20.0 K,水平線上,比 66.4KD 標(biāo)準(zhǔn)蛋白條帶稍微滯蛋白條帶平齊,處于同一水平線上。由圖中比 BSA 的大,可以說明偶聯(lián)成功。 測定結(jié)果馬斯亮藍法測定的結(jié)果見表 1‐1。從表 1‐1
1:Nor-BSA,2:Nor-BSA,3:BSA圖 1-3 Nor-BSA 凝膠電泳圖Fig. 1-3 SDS-PAGE electrophoresis of Nor-BSA可以看出,被兩個不同的 Nor‐BSA 劑量免疫的 6 只上,其中 10μg 劑量組的第一號小鼠的多抗血清效價劑量對抗體產(chǎn)生的免疫效果無必然的聯(lián)系。 表 1-2 多抗血清效價Tab.1-2 The titer of polyclonal antiserum1 2 3 4 2.683 2.451 2.262 2.474 2.42 2.2 2.028 2.356 2.205 1.753 1.667 1.477 1.963 1.417 1.371 1.202 1.549 0.797 0.811 0.903 1.004 0.46 0.431 0.492
【參考文獻】:
期刊論文
[1]氟喹諾酮類藥物殘留多元快速檢測試紙條的研制[J]. 魏東,劉英. 核農(nóng)學(xué)報. 2012(09)
[2]新霉素阻斷ELISA試劑盒的研制與應(yīng)用[J]. 王愛萍,李發(fā)弟,胡驍飛,曾巧英,李金錄,郭艷麗,趙啟法,陳玉梅,范璐. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2011(06)
[3]新霉素免疫膜層析檢測方法研究[J]. 王愛萍,李發(fā)弟,胡驍飛,史兆國,周景明,杜曉明,王林林,禹樂樂,劉明陽. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(11)
[4]赭曲霉毒素A人工抗原的合成與鑒定[J]. 孫亞寧,胡驍飛,鄧瑞廣,職愛民,劉慶堂,柴書軍,王磊,宋幸輝,侯玉澤,張改平. 食品工業(yè)科技. 2011(05)
[5]喹諾酮類藥的藥理作用及其臨床上的合理應(yīng)用[J]. 田仲新. 中國當(dāng)代醫(yī)藥. 2011(06)
[6]二氟沙星殘留檢測直接競爭ELISA方法的建立[J]. 李彬彬,鄧瑞廣,侯玉澤,張改平,趙東,劉慶堂,柴書軍,王自良. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2009(03)
[7]離子對HPLC同時測定5種氟喹諾酮類藥物[J]. 史志華,趙永新,歐陽素英. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2009(02)
[8]HPLC法對魚肉中3種四環(huán)素類和5種氟喹諾酮類獸藥殘留的同時測定[J]. 陳輝華,戴軍,王洪新,陳尚衛(wèi),朱松,鈕偉民. 分析測試學(xué)報. 2008(09)
[9]氟喹諾酮類藥物中樞神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)及其防治[J]. 高偉波,朱繼紅. 疑難病雜志. 2008(08)
[10]高效毛細(xì)管電泳同時測定4種氟喹諾酮類抗菌藥[J]. 王艷紅,檀華蓉,祁克宗,司雄元. 中國獸藥雜志. 2007(11)
博士論文
[1]恩諾沙星殘留免疫學(xué)快速檢測技術(shù)研究[D]. 趙銀麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
[2]鏈霉素殘留免疫學(xué)快速檢測技術(shù)研究[D]. 范國英.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007
[3]氟喹諾酮類抗菌藥物不良反應(yīng)的流行病學(xué)及中樞神經(jīng)毒性研究[D]. 張莉蓉.復(fù)旦大學(xué) 2003
碩士論文
[1]環(huán)丙沙星單克隆抗體的制備及其ELISA檢測方法的建立[D]. 黃斌.浙江大學(xué) 2008
[2]動物源性食品中磺胺和氟喹諾酮類獸藥殘留分析方法研究[D]. 姜寧.河北大學(xué) 2007
[3]氧氟沙星與二氟沙星的抗體制備及ELISA方法建立[D]. 潘孝成.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]分泌抗鏈霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的建立及其初步應(yīng)用[D]. 楊智洪.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
本文編號:2978723
【文章來源】:河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省
【文章頁數(shù)】:104 頁
【學(xué)位級別】:博士
【部分圖文】:
氟喹諾酮藥物的結(jié)構(gòu)分類萘啶酸類吡啶酸類喹啉酸類氟嗪酸類
圖 1-2. Nor、BSA、Nor-BSA 紫外掃描圖譜 1-2 UV scanning spectrum of Nor, BSA, Nor-描曲線變化可以看出,BSA 在 250‐300nm 之0‐360nm 之間有兩個吸收峰。偶聯(lián)使紫外吸聯(lián)后產(chǎn)物最大吸收峰稍微左移,說明經(jīng)過偶 果凝膠電泳結(jié)果如圖 1‐3。左邊的 Marker 標(biāo)準(zhǔn) 97.4KD,66.4KD,43.0KD,31.0K,20.0 K,水平線上,比 66.4KD 標(biāo)準(zhǔn)蛋白條帶稍微滯蛋白條帶平齊,處于同一水平線上。由圖中比 BSA 的大,可以說明偶聯(lián)成功。 測定結(jié)果馬斯亮藍法測定的結(jié)果見表 1‐1。從表 1‐1
1:Nor-BSA,2:Nor-BSA,3:BSA圖 1-3 Nor-BSA 凝膠電泳圖Fig. 1-3 SDS-PAGE electrophoresis of Nor-BSA可以看出,被兩個不同的 Nor‐BSA 劑量免疫的 6 只上,其中 10μg 劑量組的第一號小鼠的多抗血清效價劑量對抗體產(chǎn)生的免疫效果無必然的聯(lián)系。 表 1-2 多抗血清效價Tab.1-2 The titer of polyclonal antiserum1 2 3 4 2.683 2.451 2.262 2.474 2.42 2.2 2.028 2.356 2.205 1.753 1.667 1.477 1.963 1.417 1.371 1.202 1.549 0.797 0.811 0.903 1.004 0.46 0.431 0.492
【參考文獻】:
期刊論文
[1]氟喹諾酮類藥物殘留多元快速檢測試紙條的研制[J]. 魏東,劉英. 核農(nóng)學(xué)報. 2012(09)
[2]新霉素阻斷ELISA試劑盒的研制與應(yīng)用[J]. 王愛萍,李發(fā)弟,胡驍飛,曾巧英,李金錄,郭艷麗,趙啟法,陳玉梅,范璐. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報. 2011(06)
[3]新霉素免疫膜層析檢測方法研究[J]. 王愛萍,李發(fā)弟,胡驍飛,史兆國,周景明,杜曉明,王林林,禹樂樂,劉明陽. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué). 2011(11)
[4]赭曲霉毒素A人工抗原的合成與鑒定[J]. 孫亞寧,胡驍飛,鄧瑞廣,職愛民,劉慶堂,柴書軍,王磊,宋幸輝,侯玉澤,張改平. 食品工業(yè)科技. 2011(05)
[5]喹諾酮類藥的藥理作用及其臨床上的合理應(yīng)用[J]. 田仲新. 中國當(dāng)代醫(yī)藥. 2011(06)
[6]二氟沙星殘留檢測直接競爭ELISA方法的建立[J]. 李彬彬,鄧瑞廣,侯玉澤,張改平,趙東,劉慶堂,柴書軍,王自良. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2009(03)
[7]離子對HPLC同時測定5種氟喹諾酮類藥物[J]. 史志華,趙永新,歐陽素英. 中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué). 2009(02)
[8]HPLC法對魚肉中3種四環(huán)素類和5種氟喹諾酮類獸藥殘留的同時測定[J]. 陳輝華,戴軍,王洪新,陳尚衛(wèi),朱松,鈕偉民. 分析測試學(xué)報. 2008(09)
[9]氟喹諾酮類藥物中樞神經(jīng)系統(tǒng)不良反應(yīng)及其防治[J]. 高偉波,朱繼紅. 疑難病雜志. 2008(08)
[10]高效毛細(xì)管電泳同時測定4種氟喹諾酮類抗菌藥[J]. 王艷紅,檀華蓉,祁克宗,司雄元. 中國獸藥雜志. 2007(11)
博士論文
[1]恩諾沙星殘留免疫學(xué)快速檢測技術(shù)研究[D]. 趙銀麗.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2009
[2]鏈霉素殘留免疫學(xué)快速檢測技術(shù)研究[D]. 范國英.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2007
[3]氟喹諾酮類抗菌藥物不良反應(yīng)的流行病學(xué)及中樞神經(jīng)毒性研究[D]. 張莉蓉.復(fù)旦大學(xué) 2003
碩士論文
[1]環(huán)丙沙星單克隆抗體的制備及其ELISA檢測方法的建立[D]. 黃斌.浙江大學(xué) 2008
[2]動物源性食品中磺胺和氟喹諾酮類獸藥殘留分析方法研究[D]. 姜寧.河北大學(xué) 2007
[3]氧氟沙星與二氟沙星的抗體制備及ELISA方法建立[D]. 潘孝成.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[4]分泌抗鏈霉素單克隆抗體雜交瘤細(xì)胞株的建立及其初步應(yīng)用[D]. 楊智洪.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2005
本文編號:2978723
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