發(fā)布時間：2021-01-10 12:09

　　哺乳動物的卵泡發(fā)育是一個復(fù)雜的動態(tài)變化的過程,在一個發(fā)情周期中,卵泡發(fā)育成熟排卵,之后形成黃體的過程是在多種激素、生長因子和細(xì)胞因子作用下完成的,卵泡發(fā)育過程中,多數(shù)卵泡會由于優(yōu)勢選擇而閉鎖,只有少量的卵泡發(fā)育成熟直到排卵,而卵泡的閉鎖過程實際上就是卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞的凋亡過程。研究表明,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激（ER stress）相關(guān)分子伴侶參與調(diào)節(jié)卵泡的發(fā)育過程并起到重要的作用,然而其具體的作用機(jī)制仍不明確。CREBZF/Zhangfei（SMILE-L/SMILE-S）是在研究宿主細(xì)胞因子HCF-1時發(fā)現(xiàn)的一種堿性亮氨酸拉鏈（basic region leucine zipper,bZIP）轉(zhuǎn)錄因子,早先的研究發(fā)現(xiàn)CREBZF在哺乳動物體多數(shù)組織中均有表達(dá),并參與調(diào)節(jié)生理、病理過程。研究表明CREBZF/Zhangfei能夠與多種內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白相互作用,對調(diào)控內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激起到重要作用。本研究利用免疫組化、干擾慢病毒技術(shù)、RT-PCR、Western Blot、流式細(xì)胞術(shù)等方法對CREBZF/Zhangfei在不同發(fā)育時期的小鼠卵巢中的表達(dá)定位和表達(dá)規(guī)律進(jìn)行檢測,并深入研究了CREBZF/Zha... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一部分 文獻(xiàn)綜述
    第一章 卵泡發(fā)育及閉鎖和顆粒細(xì)胞
        1.1 卵泡發(fā)育及閉鎖
        1.2 顆粒細(xì)胞
            1.2.1 顆粒細(xì)胞在卵泡發(fā)育中的作用
            1.2.2 顆粒細(xì)胞的凋亡引起卵泡閉鎖
    第二章 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡和Zhangfei的研究進(jìn)展
        2.1 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激
        2.2 細(xì)胞凋亡
        2.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激參誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究進(jìn)展
            2.3.1 PERK通路在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡過程中的作用
            2.3.2 IRE1通路在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)凋亡過程中的作用
            2.3.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和BCL-2 家族蛋白
            2.3.4 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激和MAPK信號通路
        2.4 Zhangfei的生物學(xué)特性及其在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用
            2.4.1 Zhangfei的發(fā)現(xiàn)
            2.4.2 CREBZF/Zhangfei在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激中的作用
第二部分 試驗研究
    第三章 CREBZF/Zhangfei在小鼠卵巢組織中的表達(dá)規(guī)律及定位
        3.1 實驗材料
            3.1.1 主要試劑
            3.1.2 主要儀器
            3.1.3 實驗動物
        3.2 試驗方法
            3.2.1 雌鼠卵巢石蠟切片的制備
            3.2.2 免疫組化染色
            3.2.3Western Bolt檢測
        3.3 試驗結(jié)果
            3.3.1 CREBZF/Zhangfei在不同發(fā)情時期小鼠卵巢中的表達(dá)分布
            3.3.2 Western Blot檢測不同發(fā)情時期小鼠卵巢CREBZF/Zhangfei的表達(dá)
            3.3.3 Western Blot檢測人工誘導(dǎo)卵泡發(fā)育過程中不同時間小鼠卵巢CREBZF/Zhangfei的表達(dá)變化
        3.4 討論
        3.5 小結(jié)
    第四章 CREBZF/Zhangfei基因慢病毒干擾及過表達(dá)載體的擴(kuò)增和病毒顆粒包裝
        4.1 實驗材料
            4.1.1 感受態(tài)細(xì)菌、質(zhì)粒、細(xì)胞
            4.1.2 主要試劑
            4.1.3 主要儀器
        4.2 試驗方法
            4.2.1 CREBZF/Zhangfei基因慢病毒干擾和過表達(dá)載體的擴(kuò)增和鑒定
            4.2.2 用于病毒顆粒包裝的HEK 293T細(xì)胞的準(zhǔn)備
            4.2.3 慢病毒顆粒的包裝和濃縮
            4.2.3 病毒滴度的測定
        4.3 試驗結(jié)果
            4.3.1 CREBZF/Zhangfei基因慢病毒干擾和過表達(dá)載體鑒定
            4.3.2 檢測重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染
            4.3.3 慢病毒滴度測定
        4.4 討論
        4.5 小結(jié)
    第五章 CREBZF/Zhangfei對小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的調(diào)控作用
        5.1 實驗材料
            5.1.1 實驗動物
            5.1.2 實驗試劑
            5.1.3 實驗儀器
        5.2 試驗方法
            5.2.1 實驗小鼠的處理
            5.2.2 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞的采集和培養(yǎng)
            5.2.3 慢病毒顆粒感染小鼠卵巢顆粒細(xì)胞
            5.2.4 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡率檢測
            5.2.5 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞蛋白提取及凋亡相關(guān)因子的檢測
        5.3 試驗結(jié)果
            5.3.1 小鼠卵巢顆粒細(xì)胞體外培養(yǎng)
            5.3.2 慢病毒感染小鼠卵巢顆粒細(xì)胞
            5.3.3 慢病毒顆粒的過表達(dá)和干擾效率測定
            5.3.4 干擾和過表達(dá)CREBZF/Zhangfei對小鼠卵巢顆粒細(xì)胞凋亡的影響
        5.4 討論
        5.5 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
附錄
縮略詞
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Zhangfei在小鼠動情周期卵巢和子宮中的分布[J]. 喬海嬌,林鵬飛,王愛華.  動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2011(12)

博士論文
[1]Zhangfei基因在細(xì)胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)中的生物功能研究[D]. 張亞妮.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2010

碩士論文
[1]小鼠Zhangfei基因過表達(dá)和shRNA干擾慢病毒載體的構(gòu)建和鑒定[D]. 陳風(fēng)雷.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013
[2]Zhangfei蛋白在小鼠發(fā)情周期卵巢及子宮中的表達(dá)[D]. 喬海嬌.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2011



本文編號：2968679