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利用重組腺病毒過表達PPARγ對牛肌肉細胞脂質沉積的影響

發(fā)布時間:2021-01-07 02:16
  動物肌內脂肪沉積是一個復雜的生物學過程,涉及肌肉細胞分化、脂肪細胞分化及甘油三酯代謝等多個方面。過氧化物酶體增殖物活化受體γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ, PPARγ)基因在動物的脂肪細胞分化過程中具有核心調控作用,但是PPARγ基因的表達水平與肌內脂肪含量之間的關系尚不明確。本研究旨在包裝牛(Bos taurus) PPARγ基因腺病毒(Adenovirus),并分析過表達PPARγ對肌肉細胞脂質沉積的影響。將PPARγ亞克隆至腺病毒穿梭載體pAdTrack-CMV后,構建載體pAdTrackCMV-PPARγ。將線性化的pAdTrack-CMV-PPARγ載體和腺病毒骨架載體pAdEasy-1共轉化至重組細菌大腸桿菌(Escherichia coli) BJ5183細胞中,在細菌中同源重組后,成功構建腺病毒骨架載體pAdEasy-1-PPARγ。將線性化的pAdEasy-1-PPARγ轉入人(Homo sapiens) 293A細胞中包裝并擴增PPARγ腺病毒。用PPARγ腺病毒感染牛肌肉細胞后,用實時熒光定量PCR (q... 

【文章來源】:農業(yè)生物技術學報. 2020,28(03)北大核心

【文章頁數】:8 頁

【文章目錄】:
1 材料與方法
    1.1 實驗材料
    1.2 主要試劑藥品
    1.3 主要儀器設備
    1.4 重組腺病毒載體的構建
    1.5 重組腺病毒的包裝
    1.6 腺病毒滴度的測定
    1.7 腺病毒感染牛肌肉細胞
    1.8 使用qRT-PCR檢測過表達PPARγ對肌肉細胞的影響
2 結果與分析
    2.1 構建了PPARγ重組腺病毒載體
    2.2 包裝并擴增了PPARγ腺病毒
    2.3 過表達PPARγ對牛肌肉細胞的影響
3 討論
4 結論



本文編號:2961699

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