褪黑素（melatonin, MLT）是主要由松果體合成分泌的一種神經(jīng)內(nèi)分泌激素,其分泌規(guī)律呈典型的晝夜節(jié)律以及季節(jié)性變化,褪黑素的濃度在夜間升高,白天降低；在長日照季節(jié),褪黑素濃度較低,短日照季節(jié)濃度較高。褪黑素通過作用于下丘腦-垂體-性腺軸中的多個位點,調(diào)節(jié)光照信息和生殖系統(tǒng)的關系,在季節(jié)性繁殖動物對于光照敏感性的調(diào)控上,褪黑素就表現(xiàn)為刺激短日照繁殖動物的繁殖活動,抑制長日照繁殖動物的繁殖活動,褪黑素還參與動物的生殖、內(nèi)分泌、免疫和神經(jīng)系統(tǒng)的生物調(diào)節(jié)。褪黑素通過與受體結合來發(fā)揮其生理功能,鵝體內(nèi)存在三種褪黑素受體Mel-la、Mel-lb、Mel-lc,其中Mel-lc受體只存在于禽類、兩棲類和魚類中,未在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)。本試驗旨在克隆出鵝的褪黑素受體Mel-lc基因的全長編碼序列,尋找鵝Mel-1c基因編碼區(qū)SNP位點的分布情況。并測定鵝血清中褪黑素的含量,分析其與品種和季節(jié)間的關系,以期為通過調(diào)控褪黑素來提高動物繁殖性能提供理論依據(jù)。本研究選用鵝為研究對象,提取腦組織的總RNA,采用SMARTerRACE技術,擴增得到1158bp的鵝Mel-lc的DNA序列,通過NCBI中已經(jīng)... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1 褪黑素簡介
    2 褪黑素的生物合成、代謝與分布
        2.1 褪黑素的生物合成
        2.2 褪黑素的代謝
        2.3 褪黑激素分布和調(diào)節(jié)
        2.4 褪黑素的節(jié)律變化和調(diào)節(jié)機制
    3 褪黑素的生理作用
        3.1 褪黑素對繁殖系統(tǒng)的作用
    4 褪黑素受體
        4.1 命名與分類
        4.2 結構和生物學特性
        4.3 體內(nèi)分布
    5 SMARTer RACE技術原理
        5.1 SMARTer RACE技術簡介
        5.2 RACE引物的設計
        5.3 5'RACE反應試驗原理
        5.4 SMARTer RACE技術的優(yōu)點和缺點
        5.5 RACE技術中的常見問題及對策
    6 SNP分子標記
    7 試驗研究內(nèi)容與意義
第二章 試驗內(nèi)容
    試驗一 鵝褪黑素受體Mel-1c基因的克隆與多態(tài)性分析
        1 引言
        2 試驗材料
            2.1 試驗動物
            2.2 主要試劑
            2.3 主要儀器
        3 試驗方法
            3.1 SMARTer RACE擴增Mel-1c基因
            3.2 序列分析及進化樹構建
            3.3 Mel-1c基因多態(tài)性分析
        4 結果分析
            4.1 保守區(qū)域擴增PCR產(chǎn)物擴增結果
            4.2 總RNA的提取
            4.3 Mel-1c基因序列的克隆、測序
            4.4 序列分析
            4.5 Mel-1c基因序列同源性比較和進化樹分析
            4.6 DNA提取及PCR擴增
            4.7 PCR產(chǎn)物測序分析SNP位點
        5 討論
    試驗二 鵝血清褪黑素含量的研究
        1 引言
        2 試驗材料
            2.1 試驗動物
            2.2 樣本的采集與保存
            2.3 主要試劑
            2.4 主要儀器
        3 試驗方法
            3.1 樣品的稀釋
            3.2 樣品、標準品和質(zhì)控品中褪黑素的提取
            3.3 ELISA試驗測定樣品、標準品和質(zhì)控品的褪黑素含量
            3.4 褪黑激素含量的計算方法
            3.5 統(tǒng)計分析
        4 結果分析
        5 討論
第三章 結論
    1 主要研究成果
    2 值得進一步研究的相關問題
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]皖西白鵝產(chǎn)蛋特性研究[J]. 岳理,姜潤深,耿照玉,楊秀娟,袁紹友,劉春喜.  河北農(nóng)業(yè)科學. 2008(05)
[2]褪黑激素-牛血清蛋白主動免疫對皖西白鵝性腺表征的影響[J]. 凌明亮,黃仁術.  中國獸醫(yī)學報. 2007(01)
[3]褪黑激素及其生理功能研究進展[J]. 焦傳珍.  生物學教學. 2005(02)
[4]褪黑激素對動物生殖的作用及其調(diào)控[J]. 茆達干,楊利國,吳結革.  草食家畜. 2001(03)
[5]人胚胎腎上腺皮質(zhì)褪黑素受體亞型蛋白的分布[J]. 陸祖謙,劉志民,何金,劉會敏,趙瑛,彭樹勛.  第二軍醫(yī)大學學報. 2001(01)
[6]人胚胎中樞神經(jīng)系統(tǒng)褪黑素受體的鑒定及生物學特性[J]. 趙瑛,邵福源,何淑芬,彭樹勛.  第二軍醫(yī)大學學報. 2001(01)
[7]人胚胎甲狀腺褪黑素受體mRNA的檢測[J]. 孫中安,劉志民,黃超.  第二軍醫(yī)大學學報. 2000(11)
[8]松果體研究進展[J]. 葉百寬,郭霞珍.  解剖科學進展. 2000(01)
[9]SNP-為人類基因組描繪新的藍圖[J]. 劉萬清,賀林.  遺傳. 1998(06)
[10]鳥類及鼠類的胸腺、腔上囊及脾臟褪黑素受體的鑒定及意義[J]. 趙瑛,劉志民,彭樹勛.  上海免疫學雜志. 1998(02)



本文編號：2959001