本試驗(yàn)應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù),建立了一種快速檢測(cè)豬糞便中流行性腹瀉病毒（PEDV）的方法,并應(yīng)用于臨床檢測(cè)。用膠體金標(biāo)記抗PEDV單克隆抗體B1,摸索與優(yōu)化標(biāo)記條件并制備成金墊;將抗PEDV的單克隆抗體B2和羊抗鼠IgG多克隆抗體噴在硝酸纖維素膜上,優(yōu)化確定最佳包被濃度,組裝成試紙條并做成帶有樣本采集部件的檢測(cè)卡。結(jié)果表明,PEDV快速檢測(cè)卡可檢測(cè)最低病毒含量為100 TCID₅₀/mL;臨床檢測(cè)腹瀉豬糞便樣本,與PCR試劑盒結(jié)果對(duì)比,本檢測(cè)卡靈敏度為94.7%,特異性為100%。表明該方法簡(jiǎn)單快速,結(jié)果準(zhǔn)確,適合豬場(chǎng)現(xiàn)場(chǎng)采集發(fā)生腹瀉的豬只糞便,及時(shí)檢測(cè)豬發(fā)病感染情況。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)雜志. 2020年07期 北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

PEDV檢測(cè)卡組成

用1頭份/mL PEDV 疫苗(該批次的疫苗生產(chǎn)檢驗(yàn)報(bào)告顯示PEDV實(shí)際病毒含量檢測(cè)結(jié)果為1.0×105.7TCID50/頭份)進(jìn)行靈敏度檢測(cè),用0.2 mol/L的PB緩沖液倍比稀釋,確定檢測(cè)卡的靈敏度。結(jié)果最低能檢測(cè)到稀釋104倍的病毒液,約100 TCID50的病毒量,如圖2所示。2.8 檢測(cè)卡重復(fù)性結(jié)果及加速穩(wěn)定性檢測(cè)

將檢測(cè)卡放置于50 ℃溫箱中,每周與常溫條件下存放的檢測(cè)卡對(duì)比檢測(cè),結(jié)果檢測(cè)卡在50 ℃下保存10周其檢測(cè)結(jié)果無明顯差異,可依此確定檢測(cè)卡室溫保質(zhì)期最少為12個(gè)月。2.9 臨床樣本檢測(cè)

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬流行性腹瀉病毒檢測(cè)方法的研究進(jìn)展[J]. 李亞蘭,袁曉民,湛洋,楊凌宸,胡意,譚磊,劉譚彬,郭時(shí)印,王愛兵.  中國獸醫(yī)科學(xué). 2019(03)
[2]豬傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒和豬輪狀病毒A多重?zé)晒舛縍T-PCR檢測(cè)方法的建立[J]. 李軍,蔡良語,陳兵,劉建利,孫潔,陳書琨,林慶燕,陶虹,吳紹強(qiáng),盧體康,陳金頂,秦智鋒.  中國預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2018(09)



本文編號(hào)：2958803