抗磺胺二甲基嘧啶單克隆抗體的制備與鑒定
發(fā)布時間:2020-12-31 00:25
磺胺二甲基嘧啶(Sulfamethazine,SM2),屬于磺胺類藥物中應(yīng)用相對廣泛的一種,具有氨基苯磺酰胺的特殊結(jié)構(gòu),它是一種廣譜抗菌藥物,由于其見效快,成本低,易獲得,被廣泛應(yīng)用于預(yù)防和治療動物原蟲病和細菌性疾病。SM2能夠促進動物生長,故常被當作飼料添加劑在動物飼養(yǎng)中長期使用。若不合理使用SM2,易殘留在畜產(chǎn)品中,人食用后危害人體健康。世界各國對相關(guān)食品中磺胺類藥物的殘留均做出了相應(yīng)的規(guī)定,歐盟國家規(guī)定磺胺類藥物殘留總量不得超出100μg/kg,單個藥物不得超過25μg/kg。日本規(guī)定在食品中不得檢出磺胺類藥物。我國農(nóng)業(yè)部于2002年12月在第235號文件中規(guī)定,在所有動物的脂肪、肌肉、肝臟和腎臟中磺胺類藥物的殘留限量不得超出100μg/kg,并且將磺胺二甲基嘧啶列為獸藥殘留監(jiān)控的重點。目前,用微生物學(xué)、儀器和酶聯(lián)免疫等方法來檢測SM2。其中微生物法檢測速率高,但靈敏度低,特殊的選擇性差,儀器檢測方法準備樣品的時候浪費時間、繁瑣、儀器太貴而且需要專業(yè)人員操作才能完成。而酶聯(lián)免疫檢測法靈敏度高、速度快、可批量篩選,無需大型儀器設(shè)備,比較適用于大量樣本的初次篩選。本實驗用重氮化法合成...
【文章來源】:天津農(nóng)學(xué)院天津市
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
SM2與BSA偶聯(lián)物的紫外掃描鑒定Fig2-1UltravioletscanningforconjugatebetweenSM2andBSA注:圖中A為SM2,B為BSA,C為SM2-BSA
圖 2-2 SDS-PAGE 檢測抗原偶聯(lián)物結(jié)果g 2-2 SDS-PAGE detection of antigen conjugate 1 為偶聯(lián)物,泳道 2 為 BSA。合成抗原 SM2-BSA 的條帶與載體蛋白本實驗結(jié)果與紫外光譜掃描結(jié)果吻合,子量為 250.28,不具備誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體蛋白偶聯(lián)成人工完全抗原,才能誘導(dǎo),是制備出特異性和靈敏度高的抗 SM免疫分析檢測的重要環(huán)節(jié)。
天津農(nóng)學(xué)院專業(yè)碩士學(xué)位論文進行免疫,SM2-BSA 作為包被抗原,通過間接非競爭 ELISA 檢測四血清效價,對 4 只小鼠進行間接非競爭 ELISA 檢測,結(jié)果顯示四只價均達到了 1:20w,其中 Mice 1 的血清效價最高為 1:819200。表明 4 以用于細胞融合。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]鄰氯苯亞甲基丙二腈的工業(yè)合成新工藝[J]. 邵國斌,霍二福,劉菲,張謙華,徐樺. 河南科學(xué). 2013(09)
[2]硅膠固載離子液體-基質(zhì)固相分散/高效液相色譜法測定禽肉與肝臟中8種磺胺類藥物殘留[J]. 王志兵,王月,孟慶娟,陸瓊梅,唐民才. 分析測試學(xué)報. 2013(09)
[3]動物源性食品中磺胺類藥物殘留的危害及監(jiān)控對策[J]. 李國柱,陳灝,張廣源. 廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2013(04)
[4]斯康杜尼局部浸潤麻醉在下頜磨牙急性牙髓炎治療中的臨床應(yīng)用[J]. 陳丹宇,符起亞,龐紅霞. 海南醫(yī)學(xué). 2013(07)
[5]獸藥殘留檢測技術(shù)研究進展[J]. 高潔,苗虹. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2013(01)
[6]磺胺類藥物廣譜性多克隆抗體的制備[J]. 魏鐳,王戰(zhàn)輝,江海洋,楊光,徐飛,李娜. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(12)
[7]動物性食品中磺胺類藥物殘留檢測研究進展[J]. 趙旭壯,李明元. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2012(03)
[8]動物性食品中磺胺藥物的殘留分析方法進展[J]. 鄧櫻花,黃元喬,吳田,張洪權(quán). 湖北第二師范學(xué)院學(xué)報. 2012(02)
[9]豬場如何正確使用磺胺類藥物及抗菌增效劑[J]. 呂惠序. 獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2012(02)
[10]動物性食品中磺胺類藥物殘留檢測方法的研究進展[J]. 趙書景,賀紹君,羅國琦,袁逢新,張衛(wèi)憲. 中國畜牧獸醫(yī). 2009(08)
博士論文
[1]動物源性食品中獸藥多殘留快速檢測技術(shù)及精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫的建立[D]. 康健.燕山大學(xué) 2014
[2]食品中獸藥殘留高通量篩查與檢測平臺的建立及膳食暴露評估研究[D]. 劉暢.第二軍醫(yī)大學(xué) 2013
[3]非動物源性新型載體的研制及其對磺胺類藥殘檢測特性的影響[D]. 陳蕾.華南理工大學(xué) 2011
[4]多西環(huán)素在斑點叉尾鮰中安全使用及快速檢測技術(shù)研究[D]. 艾曉輝.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]萊克多巴胺及磺胺二甲基嘧啶免疫學(xué)快速檢測技術(shù)研究[D]. 李學(xué)伍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[6]單克隆抗體檢測炭疽芽孢[D]. 王殿冰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[7]中美兩國獸藥管理比較研究[D]. 董義春.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[8]液相色譜—電化學(xué)法測定氨基糖苷類抗生素藥物分析方法的研究[D]. 習(xí)玲玲.浙江大學(xué) 2008
[9]劍尾魚在水產(chǎn)藥物臨床試驗中應(yīng)用研究[D]. 黃志斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[10]超高效液相色譜—電噴霧串聯(lián)四極桿質(zhì)譜法測定動物源性食品和尿液中糖皮質(zhì)激素殘留[D]. 崔曉亮.天津大學(xué) 2006
碩士論文
[1]地下水中磺胺類抗生素降解菌及附載材料研究[D]. 王佳麗.吉林大學(xué) 2017
[2]金剛烷胺單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[D]. 蔡云虹.揚州大學(xué) 2017
[3]酸性橙Ⅱ單克隆抗體的制備及其ELISA檢測方法的建立[D]. 劉若璇.揚州大學(xué) 2017
[4]中間產(chǎn)物在磺胺嘧啶生物降解中的作用[D]. 張伊寧.上海師范大學(xué) 2017
[5]中草藥和益生菌的篩選及其在凡納濱對蝦(Penaeus vannamei)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[D]. 馮玲倩.青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]強力霉素單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[D]. 劉金萍.揚州大學(xué) 2016
[7]胭脂紅單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[D]. 王興.揚州大學(xué) 2016
[8]廣州市畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全事件鏈分析及政府應(yīng)急管理體系構(gòu)建研究[D]. 譚諾.華南理工大學(xué) 2015
[9]牛結(jié)合珠蛋白單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D]. 王彩宏.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2015
[10]復(fù)方磺胺嘧啶混懸液在肉雞體內(nèi)的生物等效性及殘留檢測方法研究[D]. 張曉曉.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
本文編號:2948582
【文章來源】:天津農(nóng)學(xué)院天津市
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
SM2與BSA偶聯(lián)物的紫外掃描鑒定Fig2-1UltravioletscanningforconjugatebetweenSM2andBSA注:圖中A為SM2,B為BSA,C為SM2-BSA
圖 2-2 SDS-PAGE 檢測抗原偶聯(lián)物結(jié)果g 2-2 SDS-PAGE detection of antigen conjugate 1 為偶聯(lián)物,泳道 2 為 BSA。合成抗原 SM2-BSA 的條帶與載體蛋白本實驗結(jié)果與紫外光譜掃描結(jié)果吻合,子量為 250.28,不具備誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體蛋白偶聯(lián)成人工完全抗原,才能誘導(dǎo),是制備出特異性和靈敏度高的抗 SM免疫分析檢測的重要環(huán)節(jié)。
天津農(nóng)學(xué)院專業(yè)碩士學(xué)位論文進行免疫,SM2-BSA 作為包被抗原,通過間接非競爭 ELISA 檢測四血清效價,對 4 只小鼠進行間接非競爭 ELISA 檢測,結(jié)果顯示四只價均達到了 1:20w,其中 Mice 1 的血清效價最高為 1:819200。表明 4 以用于細胞融合。
【參考文獻】:
期刊論文
[1]鄰氯苯亞甲基丙二腈的工業(yè)合成新工藝[J]. 邵國斌,霍二福,劉菲,張謙華,徐樺. 河南科學(xué). 2013(09)
[2]硅膠固載離子液體-基質(zhì)固相分散/高效液相色譜法測定禽肉與肝臟中8種磺胺類藥物殘留[J]. 王志兵,王月,孟慶娟,陸瓊梅,唐民才. 分析測試學(xué)報. 2013(09)
[3]動物源性食品中磺胺類藥物殘留的危害及監(jiān)控對策[J]. 李國柱,陳灝,張廣源. 廣東畜牧獸醫(yī)科技. 2013(04)
[4]斯康杜尼局部浸潤麻醉在下頜磨牙急性牙髓炎治療中的臨床應(yīng)用[J]. 陳丹宇,符起亞,龐紅霞. 海南醫(yī)學(xué). 2013(07)
[5]獸藥殘留檢測技術(shù)研究進展[J]. 高潔,苗虹. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報. 2013(01)
[6]磺胺類藥物廣譜性多克隆抗體的制備[J]. 魏鐳,王戰(zhàn)輝,江海洋,楊光,徐飛,李娜. 中國獸醫(yī)雜志. 2012(12)
[7]動物性食品中磺胺類藥物殘留檢測研究進展[J]. 趙旭壯,李明元. 中國食品衛(wèi)生雜志. 2012(03)
[8]動物性食品中磺胺藥物的殘留分析方法進展[J]. 鄧櫻花,黃元喬,吳田,張洪權(quán). 湖北第二師范學(xué)院學(xué)報. 2012(02)
[9]豬場如何正確使用磺胺類藥物及抗菌增效劑[J]. 呂惠序. 獸醫(yī)導(dǎo)刊. 2012(02)
[10]動物性食品中磺胺類藥物殘留檢測方法的研究進展[J]. 趙書景,賀紹君,羅國琦,袁逢新,張衛(wèi)憲. 中國畜牧獸醫(yī). 2009(08)
博士論文
[1]動物源性食品中獸藥多殘留快速檢測技術(shù)及精確質(zhì)量數(shù)據(jù)庫的建立[D]. 康健.燕山大學(xué) 2014
[2]食品中獸藥殘留高通量篩查與檢測平臺的建立及膳食暴露評估研究[D]. 劉暢.第二軍醫(yī)大學(xué) 2013
[3]非動物源性新型載體的研制及其對磺胺類藥殘檢測特性的影響[D]. 陳蕾.華南理工大學(xué) 2011
[4]多西環(huán)素在斑點叉尾鮰中安全使用及快速檢測技術(shù)研究[D]. 艾曉輝.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[5]萊克多巴胺及磺胺二甲基嘧啶免疫學(xué)快速檢測技術(shù)研究[D]. 李學(xué)伍.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009
[6]單克隆抗體檢測炭疽芽孢[D]. 王殿冰.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[7]中美兩國獸藥管理比較研究[D]. 董義春.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008
[8]液相色譜—電化學(xué)法測定氨基糖苷類抗生素藥物分析方法的研究[D]. 習(xí)玲玲.浙江大學(xué) 2008
[9]劍尾魚在水產(chǎn)藥物臨床試驗中應(yīng)用研究[D]. 黃志斌.南京農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006
[10]超高效液相色譜—電噴霧串聯(lián)四極桿質(zhì)譜法測定動物源性食品和尿液中糖皮質(zhì)激素殘留[D]. 崔曉亮.天津大學(xué) 2006
碩士論文
[1]地下水中磺胺類抗生素降解菌及附載材料研究[D]. 王佳麗.吉林大學(xué) 2017
[2]金剛烷胺單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[D]. 蔡云虹.揚州大學(xué) 2017
[3]酸性橙Ⅱ單克隆抗體的制備及其ELISA檢測方法的建立[D]. 劉若璇.揚州大學(xué) 2017
[4]中間產(chǎn)物在磺胺嘧啶生物降解中的作用[D]. 張伊寧.上海師范大學(xué) 2017
[5]中草藥和益生菌的篩選及其在凡納濱對蝦(Penaeus vannamei)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[D]. 馮玲倩.青島農(nóng)業(yè)大學(xué) 2016
[6]強力霉素單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[D]. 劉金萍.揚州大學(xué) 2016
[7]胭脂紅單克隆抗體的制備及ELISA檢測方法的建立[D]. 王興.揚州大學(xué) 2016
[8]廣州市畜禽產(chǎn)品質(zhì)量安全事件鏈分析及政府應(yīng)急管理體系構(gòu)建研究[D]. 譚諾.華南理工大學(xué) 2015
[9]牛結(jié)合珠蛋白單克隆抗體的制備及初步應(yīng)用[D]. 王彩宏.黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué) 2015
[10]復(fù)方磺胺嘧啶混懸液在肉雞體內(nèi)的生物等效性及殘留檢測方法研究[D]. 張曉曉.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2015
本文編號:2948582
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