產(chǎn)仔數(shù)是衡量母豬繁殖力的重要指標(biāo),中國高產(chǎn)豬種比外來豬種平均每頭的產(chǎn)仔數(shù)要高3-5頭,早期附植階段的胚胎丟失是影響產(chǎn)仔數(shù)的關(guān)鍵因素,因此明確早期胚胎附植的機(jī)理、篩選影響胚胎附植的關(guān)鍵基因?qū)μ岣弋a(chǎn)仔數(shù)有重要的作用。本研究以高繁殖力純種梅山豬和大白豬的初產(chǎn)母豬為研究對(duì)象,選取妊娠9天、12天、15天和空懷12天外周血液和子宮組織為實(shí)驗(yàn)材料,通過生理生化指標(biāo)、組織形態(tài)學(xué)觀察和組學(xué)測(cè)序方法,分析早期胚胎附植階段的組織形態(tài)和分子水平的變化,篩選可能影響胚胎附植的關(guān)鍵信號(hào)通路和調(diào)控基因,并進(jìn)行基因的功能驗(yàn)證。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:1)我們用電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)了附植早期外周血液中雌激素和孕激素的變化情況,發(fā)現(xiàn)雌激素在妊娠12天水平最高,之后呈降低趨勢(shì)。另外,HE染色法觀察了豬早期附植階段的子宮組織的形態(tài)學(xué)變化,發(fā)現(xiàn)隨著妊娠時(shí)間的延長(zhǎng),子宮內(nèi)膜褶皺變少,內(nèi)膜壁變平滑。2)轉(zhuǎn)錄組測(cè)序的方法獲得了大白豬子宮內(nèi)膜編碼和非編碼基因的表達(dá)譜,得到了2805個(gè)lncRNA和28055個(gè)circRNA,進(jìn)行了lncRNA和mRNA的結(jié)構(gòu)和表達(dá)量的對(duì)比分析,發(fā)現(xiàn)lncRNA要比mRNA短,外顯子數(shù)目少,序列保守性和表達(dá)量也... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：136 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

胚胎附植過程的信號(hào)通路(Wang&Dey2006)

豬早期胚胎附植階段子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析及關(guān)鍵基因作用研究深度測(cè)序分析揭示了豬懷孕和發(fā)情周期過程中子宮內(nèi)膜的 miRNA 和序列somiRs）的所有組成成分。差異表達(dá)的 miRNA 可以聚類到以下功能和途徑發(fā)育、細(xì)胞周期、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞形態(tài)、胚胎發(fā)育等，表明它們參與組織宮的植入和胎盤準(zhǔn)備等生物學(xué)過程。體外實(shí)驗(yàn)表明，isomiRs（即 miR-14EL U）與 miRNA 協(xié)同作用以影響子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中靶基因表達(dá)(Krawczl 2015)。因此，由孕體或子宮內(nèi)膜起源的 miRNA 可能有助于在植入開始和階段孕體和子宮內(nèi)膜之間的交流，調(diào)節(jié)對(duì)于妊娠建立至關(guān)重要的基因的表包括子宮內(nèi)膜容受性、免疫系統(tǒng)功能和孕體的發(fā)育和植入（圖 1-2）。

豬早期胚胎附植階段子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)錄組測(cè)序分析及關(guān)鍵基因作用研究在真核細(xì)胞中廣泛表達(dá)(Memczak et al 2013; Fan et al 2015)。大多數(shù) 是 GT / AG 剪接位點(diǎn)，反映了 circRNA 的反向剪接。雖然已經(jīng)在小鼠了許多 circRNA，但對(duì)其他哺乳動(dòng)物中的 circRNA 知之甚少。雖A 的功能尚未達(dá)成共識(shí)，但許多研究表明，circRNA 在多種真核生物出跨哺乳動(dòng)物的保守性，并且其表達(dá)不受其同源線性 RNA 的調(diào)節(jié)。


本文編號(hào)：2936445