【實驗目的】牦牛/犏牛是長期生活在青藏高原地區(qū)的一類哺乳動物,對嚴寒及缺氧具有極好的適應性。犏牛又是牦牛和黃牛的雜交一代,其公犏牛的不育是困擾廣大牧民牧畜業(yè)發(fā)展的難題。HSPs作為分子伴侶廣泛參與動物機體的生長發(fā)育、代謝、繁殖及疾病的調(diào)控,而P53對疾病和細胞凋亡起著重要的調(diào)節(jié)作用。本文采用不同的實驗技術探究了HSPs在牦牛和犏牛不同器官組織中的表達差異性,及HSPs和P53對牦牛和犏牛不同年齡段睪丸發(fā)育和精子發(fā)生的影響。為進一步研究HSPs和P53對雄性睪丸發(fā)育及精子凋亡的調(diào)控,提供了可靠的實驗數(shù)據(jù)和重要的理論依據(jù)。【實驗方法】1.根據(jù)已有黃牛和牦牛HSPs基因序列,設計引物克隆出牦牛和犏牛HSPs和P53氨基酸序列,利用生物信息學網(wǎng)絡資源及相關軟件,對所克隆目的基因進行生物信息學比對及蛋白空間結構差異性分析。2.采用熒光定量（RT-qPCR）和蛋白免疫印跡（WB）方法,對牦牛和犏牛不同器官組織及不同年齡段睪丸組織中HSPs基因和蛋白進行定性和定量檢測,采用SPSS21.0軟件分析表達量的差異性。3.免疫組織化學（IHC）和免疫熒光（IF）技術,分別對HSPs在牦牛和犏牛不同器官組織... 

【文章來源】：甘肅農(nóng)業(yè)大學甘肅省

【文章頁數(shù)】：128 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

圖1.分子伴侶蛋白HSP90不同的構象狀態(tài)

圖 2. 泌乳動物睪丸原理圖。睪丸組織結構包括兩部分：睪丸曲精小管和睪丸間質(zhì)。曲精小管被肌樣周細胞(MPCs)包裹，肌樣周細胞與具有分泌功能(SS)的支持細胞相互連接，從曲精小管基底部伸向生精上皮，支持細胞具有支撐發(fā)育不同階段精子細胞的作用，包括精原細胞(Sg)、初級精母細胞(PSc)、次級精母細胞(SSc)、精子細胞(RS)和成熟的精子(ES)。血睪屏障(BTB)包括相鄰的兩個支持細胞相互連接，細胞間隙主要包括了睪丸間質(zhì)細胞和未成熟的免疫細胞，例如巨噬細胞(Mφ)，T 淋巴細胞，樹突狀細胞(DCs)，肥大細胞(MC)。血管大量(BV)分布于睪丸間質(zhì)中。

圖 3. 通過載體的形式調(diào)整模型。重要的是要強調(diào)，醛固酮單獨不能通過而是需要載體的作用[56]。能夠通過高鹽負荷、活性氮和活性氧等自動激活。Fig. 3. Model of rapid MR trafficking and its modulation.It is important to stress that aldosterone alone dt elicitpathological actions but requires the coincidence of a pathologicalmilieu for its detrimental effects[56]ponents triggeringinadequate MR activation, high salt load, RNS and ROS have beensuggested我們感興趣的是，研究發(fā)現(xiàn)氯貝丁酯、氟化鈉、硫芥子氣體、壬基苯酚這

【參考文獻】：
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本文編號：2934508