O型FMDV衣殼抗原的耐酸改造及其在昆蟲細胞中的表達
發(fā)布時間:2020-12-08 11:04
為篩選與O型FMDV衣殼酸敏感性相關(guān)的位點,通過突變相關(guān)酸敏感性位點以提高衣殼蛋白在Bac-toBac桿狀病毒表達系統(tǒng)中的表達量。本研究以牛源O型FMDV ON株為研究對象開展耐酸性毒株的篩選工作,篩選得到存在于Pl上的5個錯義突變位點。然后經(jīng)過耐酸改造,利用桿狀病毒表達系統(tǒng)獲得表達O型FMDV衣殼蛋白的重組桿狀病毒rBac-P12A3C。外源蛋白的表達檢測結(jié)果表明,表達產(chǎn)物能夠被O型FMDV多克隆抗體識別。免疫電鏡觀察到了直徑約27nm的正六邊形顆粒。用蛋白樣品rBac-P12A3C對BALB/c小鼠肌肉注射免疫,通過液相阻斷ELISA的方法檢測O型口蹄疫病毒的抗體效價,最后取小鼠脾臟利用ELISPOT的方法檢測細胞因子IL-4和IFN-γ的水平。結(jié)果表明蛋白樣品rBac-P12A3C可以激發(fā)小鼠的體液免疫反應(yīng),同時還可以很好的激發(fā)小鼠的細胞免疫反應(yīng)。本研究為后期研制出FMD的基因工程亞單位疫苗奠定了基礎(chǔ)。
【文章來源】:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會生物技術(shù)學(xué)分會暨中國免疫學(xué)會獸醫(yī)免疫分會第十二次學(xué)術(shù)研討會論文集中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會會議論文集
【文章頁數(shù)】:5 頁
本文編號:2904982
【文章來源】:中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會生物技術(shù)學(xué)分會暨中國免疫學(xué)會獸醫(yī)免疫分會第十二次學(xué)術(shù)研討會論文集中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會會議論文集
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