腸球菌(Enterococcus)是重要的環(huán)境指示菌,同時又是潛在的動物條件性致病菌。動物飲用水中的腸球菌耐藥的相關研究目前未見報道,本實驗采集豬場不同來源的飲用水、分離鑒定腸球菌,測定腸球菌的耐藥現(xiàn)狀。目的：了解不同地區(qū)、不同豬場來源的飲用水腸球菌對土霉素(OXY)、氨芐西林(AMP)、環(huán)丙沙星(CIP)、萬古霉素(VAN)、氯霉素(CHL)、紅霉素(ERY)的耐藥情況,了解豬場水源進水口、蓄水池、懷孕舍飲水、分娩舍飲水、保育舍飲水及肥育舍飲水等飲用水腸球菌屬細菌抗生素耐藥表型及耐藥譜,試圖探討豬場水源與飲水器出水在腸球菌耐藥方面的差異并分析原因,為豬場飲用水細菌耐藥提供基礎數(shù)據(jù)。方法：采集南平地區(qū)9個豬場和福州地區(qū)11個豬場不同來源的飲用水。富集培養(yǎng)水樣中的微生物,進行腸球菌的分離培養(yǎng)并通過生化、PCR方法鑒定腸球菌菌株,保存。采用微量肉湯稀釋法對分離菌進行藥物敏感性實驗,測定腸球菌對抗生素的最小抑菌濃度(MIC)。獲得豬場飲用水腸球菌各個采樣點的耐藥表型,分析耐藥譜,了解豬場飲用水腸球菌的耐藥情況及分布特點。結果：(1)南平地區(qū)9個豬場42株飲用水分離菌對抗生素的耐藥率由高到低分別為：土霉素紅霉素氯霉素環(huán)丙沙星氨芐西林萬古霉素。其中對土霉素、紅霉素的耐藥率最高,分別為：80.95%、66.67%；對氯霉素、環(huán)丙沙星、氨芐西林的耐藥率稍低,分別為35.71%、19.05%、16.67%；分離出6株VRE,耐藥率為14.29%。(2)福州地區(qū)11個豬場46株飲用水分離菌對抗生素的耐藥率由高到低分別為：紅霉素土霉素氯霉素環(huán)丙沙星氨芐西林萬古霉素。對前四種藥的耐藥率都超過50%,分別為：84.78%、76.09%、67.39%、50%,對氨芐西林的耐藥率較低,為19.57%,分離出2株VRE,耐藥率為4.35%。(3)南平地區(qū)9個豬場源頭飲用水與飲水器飲用水腸球菌耐藥比較：水池進水口及蓄水池分離菌總體表現(xiàn)為對土霉素和紅霉素耐藥,耐藥率較飲水器飲用水分離菌略低,對土霉素的耐藥率分別為77.78%、87.5%,對紅霉素的耐藥率分別為55.56%、50%；對氯霉素、環(huán)丙沙星、氨芐西林的耐藥顯著低于飲水器分離菌,水池進水口的耐藥率分別為22.22%、11.11%、11.11%,蓄水池的耐藥率分別為25%、0%、12.5%；保育舍飲水器分離菌對所有藥物都有更高的耐藥率,其次為母豬舍飲水器、育肥舍飲水器。共分離出6株VRE,其中4株來自豬場源頭飲用水,2株來自飲水器飲用水。(4)福州地區(qū)11個豬場源頭飲用水與飲水器飲用水腸球菌耐藥比較：蓄水池分離菌總體表現(xiàn)為對土霉素、紅霉素、氯霉素耐藥,耐藥率較飲水器飲用水分離菌略低,為72.73%、72.73%、63.64%,對環(huán)丙沙星、氨芐西林的耐藥顯著低于飲水器分離菌,分別為27.27%、9.09%。保育舍飲水器分離菌對所有藥物都有更高的耐藥率,其次為育肥舍、哺乳舍、懷孕舍飲水器。共分離出2株VRE,分別來自蓄水池和育肥舍飲水器。(5)豬場飲用水耐藥譜分析南平地區(qū)9個豬場飲用水腸球菌一共有11種耐藥譜,福州地區(qū)11個豬場一共有13種耐藥譜,南平地區(qū)豬場發(fā)現(xiàn)有11株分離菌對4-5種抗生素耐藥,其中有5株來自保育舍飲水器。福州地區(qū)豬場有19株分離菌對4～～-5種的抗生素耐藥,有5株來自保育舍飲水器,且其中有4株表現(xiàn)對5種抗生素耐藥。水池進水口及蓄水池分離菌的多重耐藥率均低于飲水器分離菌,保育舍飲水器多重耐藥率最高結論：(1)豬場源頭飲用水與飲水器飲用水分離菌對土霉素和紅霉素普遍耐藥。源頭飲用水分離菌對氯霉素、環(huán)丙沙星、氨芐西林的耐藥率普遍低于飲水器飲用水,保育舍飲水器分離菌的抗生素耐藥率普遍高于其它采水點。(2)兩個地區(qū)的豬場飲用水分離菌的抗生素耐藥譜較多,多重耐藥現(xiàn)象也較嚴重。南平地區(qū)9個豬場的保育舍飲水器分離菌的多重耐藥率最高,福州地區(qū)11個豬場的保育舍、育肥舍飲水器分離菌的多重耐藥率最高。
【學位單位】：福建農(nóng)林大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2015
【中圖分類】：S852.61
【文章目錄】：
摘要
Abstract
符號說明
第一章 引言
    1 腸球菌研究進展
        1.1 腸球菌概述
            1.1.1 腸球菌的分類
            1.1.2 腸球菌生物學特性
            1.1.3 腸球菌耐藥特點
        1.2 腸球菌對動物的致病性
        1.3 腸球菌屬細菌耐藥的研究現(xiàn)狀
    2 細菌耐藥性的傳播
    3 獸用抗生素種類
    4 養(yǎng)殖場抗生素使用現(xiàn)狀
    5 控制細菌耐藥的措施
        5.1 合理使用抗菌藥
        5.2 開展細菌耐藥性監(jiān)測工作
        5.3 對獸用抗菌藥物實施嚴格管理
    6 研究的目的和意義
第二章 豬場飲用水腸球菌的分離鑒定及藥敏試驗
    1 材料與方法
        1.1 材料
            1.1.1 培養(yǎng)基
            1.1.2 質控標準菌
            1.1.3 PCR試劑
            1.1.4 抗生素標準品
            1.1.5 主要儀器
        1.2 方法
            1.2.1 樣本采集
            1.2.2 水樣的處理
            1.2.3 腸球菌的分離純化
            1.2.4 腸球菌的鑒定
                1.2.4.1 腸球菌生化鑒定
                1.2.4.2 腸球菌PCR鑒定
            1.2.5 腸球菌的保存
            1.2.6 腸球菌藥敏試驗
                1.2.6.1 微量肉湯稀釋法
                1.2.6.2 接種菌液的配制
                1.2.6.3 抗生素儲備液的配置
                1.2.6.4 藥敏試驗操作過程
                1.2.6.5 藥敏試驗結果判定
                1.2.6.6 統(tǒng)計學處理
                1.2.6.7 抗生素耐藥譜分析
                1.2.6.8 腸球菌多重耐藥情況分析
    2 結果與分析
        2.1 腸球菌分離與鑒定結果
        2.2 豬場飲用水腸球菌的藥敏試驗結果
            2.2.1 南平地區(qū)豬場飲用水腸球菌的藥敏試驗結果
            2.2.2 福州地區(qū)豬場飲用水腸球菌的藥敏試驗結果
        2.3 豬場腸球菌對6種抗生素的耐藥譜分析
            2.3.1 南平地區(qū)豬場飲用水腸球菌的耐藥譜分析
            2.3.2 福州地區(qū)豬場飲用水腸球菌的耐藥譜分析
        2.4 豬場飲用水腸球菌多重耐藥情況分析
            2.4.1 南平地區(qū)豬場飲用水腸球菌多重耐藥情況分析
            2.4.2 福州地區(qū)豬場飲用水腸球菌多重耐藥情況分析
    3 討論
結論
參考文獻
致謝

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本文編號：2884639