黃曲霉毒素(Aflatoxins,AFT)是一類來自霉菌的劇毒性化學(xué)物質(zhì),以黃曲霉毒素B1(AFB1)的含量最高且毒性最強(qiáng),由AFB1引起的畜禽中毒對當(dāng)前畜牧業(yè)發(fā)展的造成嚴(yán)重威脅。姜黃素(Curcumin)近年來作為一種天然食品添加色素廣泛被使用,研究發(fā)現(xiàn)姜黃素是一種多效藥,具有抗炎、抗氧化、抗病毒感染以及增強(qiáng)機(jī)體免疫功能等方面均有良好的藥理作用,應(yīng)用于臨床多種疾病的治療。本研究選取72只1日齡艾拔益加健康肉雛雞,隨機(jī)分為6組,分別飼喂空白對照組日糧、姜黃素對照組日糧(450mg/kg姜黃素)、AFB1組日糧(5mg/kg AFB1)及姜黃素添加日糧(分別在AFB1組日糧中添加150mg/kg、300mg/kg和450mg/kg姜黃素構(gòu)成姜黃素I組、Ⅱ組和Ⅲ組日糧)28d,再以空白對照組日糧繼續(xù)飼喂7d。第28d和35d時(shí)各組取6只雞剖殺進(jìn)行取材,通過各組肉雞的臨床眼觀變化和剖檢觀察、三種免疫器官(胸腺、脾臟、法氏囊)臟器指數(shù)變化和組織病理學(xué)觀察及對免疫器官組織中漿細(xì)胞數(shù)量計(jì)數(shù)及其核漿面積比的檢測。采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),檢測各組肉雞三種免疫器官組織中細(xì)胞因子IL-2和IFN-γ的表達(dá)水平,分析姜黃素對AFB1亞慢性中毒損傷的免疫器官的保護(hù)作用,以及解釋姜黃素對AFB1引起的免疫功能下降的緩解作用[29]。豐富對家禽霉菌毒素中毒解毒方法的研究資料,為姜黃素在畜牧業(yè)生產(chǎn)實(shí)踐中的應(yīng)用提供科學(xué)實(shí)驗(yàn)依據(jù)。結(jié)果如下:胸腺:試驗(yàn)第28d和第35d,與空白對照組相比,AFB1組肉雞胸腺臟器指數(shù)均極顯著降低(p0.01),皮質(zhì)區(qū)的細(xì)胞核碎片和髓質(zhì)區(qū)的淤血明顯增多,漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比極顯著降低(p0.01),胸腺組織中IL-2和IFN-γ表達(dá)水平極顯著降低(p0.01);與AFB1組相比,姜黃素I組、Ⅱ組和Ⅲ組肉雞胸腺臟器指數(shù)均增加、胸腺組織學(xué)損傷均有不同程度緩解、胸腺組織中漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比均有增加,胸腺組織中IL-2和IFN-γ表達(dá)水平均不同程度提高。與28d相比,第35d三個(gè)姜黃素干預(yù)組肉雞胸腺上述各項(xiàng)指標(biāo)均有不同程度增加。脾臟:試驗(yàn)第28d和第35d,與空白對照組相比,AFB1組肉雞脾臟臟器指數(shù)均極顯著降低(p0.01),脾臟紅髓區(qū)淤血嚴(yán)重,動(dòng)脈周圍淋巴鞘淋巴細(xì)胞數(shù)減少,脾臟組織中漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比極顯著降低(p0.01),脾臟組織中IL-2和IFN-γ表達(dá)水平極顯著降低(p0.01);與AFB1組相比,姜黃素I組、Ⅱ組和Ⅲ組肉雞脾臟臟器指數(shù)均增加、脾臟組織學(xué)損傷均不同程度緩解、脾臟組織中漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比均有增加,脾臟組織中IL-2和IFN-γ表達(dá)水平均不同程度提高。與28d相比,第35d的姜黃素干預(yù)組肉雞脾臟各項(xiàng)指標(biāo)均有不同程度增加。法氏囊:試驗(yàn)第28d和第35d,與空白對照組相比,AFB1組肉雞法氏囊臟器指數(shù)均極顯著減小(p0.01),法氏囊淋巴濾泡髓質(zhì)區(qū)淋巴細(xì)胞數(shù)量減少,細(xì)胞核碎片增多,法氏囊組織中漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比極顯著降低(p0.01),法氏囊組織中IL-2和IFN-γ表達(dá)水平極顯著降低(p0.01),與AFB1組相比,姜黃素I組、Ⅱ組和Ⅲ組法氏囊臟器指數(shù)均增加、胸腺組織學(xué)損傷均不同程度改善、法氏囊組織中漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比均有增加,法氏囊組織中IL-2和IFN-γ表達(dá)水平均不同程度提高。與28d相比,第35d的姜黃素干預(yù)組肉雞法氏囊各項(xiàng)指標(biāo)均有不同程度提高。研究結(jié)果表明:在含5mg/kg AFB1日糧中添加姜黃素后,可明顯緩解胸腺、脾臟和法氏囊由AFB1引起的組織病理損傷、提高免疫器官的臟器指數(shù)和漿細(xì)胞數(shù)量及其核漿面積比,并通過提高IL-2和IFN-γ表達(dá)水平緩解AFB1引起的免疫抑制作用。本試驗(yàn)中日糧添加450mg/kg姜黃素對5mg/kg AFB1的拮抗保護(hù)作用最優(yōu)。
【學(xué)位單位】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2017
【中圖分類】：S858.31
【部分圖文】：

黃曲霉毒素B1Tab.1-1AflatoxinB1

用 10μL 槍頭吸干剩余的液體， 20~100μLDEPC 水，充分溶解提取的 RN成DNA 文庫，確定 IL-2、INF-γ 和內(nèi)參基因 以及參考已有文獻(xiàn)中使用的引物，選擇適合，詳見表 2-1，圖 2-1。表 2-1 引物序列及擴(kuò)增片段長度he primers sequences and amplification fragm列（5，-3，）equences:GCACGCCATCACTATCTT:GGACTCCACAACATACTCAG:GGATCCATGATGTGCAAAGTACTG:CGGTCGACTTATTTTTGCAGATATCT:TCCTTCTGAAAGCTCTCGCC:CTGGTGTCCAGGATGGTGTC
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2875537