已有的研究表明,microRNA-7a(miR-7a)和LIM-homeodomain轉(zhuǎn)錄因子Isl-1均是調(diào)節(jié)胰島素合成和分泌的重要因子,但這兩種因子在胰島細胞中的功能關(guān)系尚不清楚。本研究旨在確定Isl-1和miR-7a在調(diào)節(jié)胰島素合成和分泌方面的相互作用。1.通過免疫熒光雙染方法確定了mi R-7a和Isl-1在小鼠胰島細胞的表達關(guān)系,結(jié)果證明miR-7a和Isl-1在所有的胰島細胞中共表達。2.利用miR-7a2全身敲除小鼠證明miR-7a2缺失上調(diào)了Isl-1和胰島素基因的表達,增強了葡萄糖對胰島素分泌的調(diào)節(jié)功能,并通過miR-7a抑制劑和模擬的NIT細胞體外得到了進一步的證實。3.采用雙熒光素酶報告系統(tǒng)檢測miR-7a的靶基因,結(jié)果表明,Raf1是miR-7a的直接靶基因,通過MEK/ERK信號通路調(diào)控Isl-1表達,進而影響胰島素的表達和分泌。
【學(xué)位單位】：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S852.2
【部分圖文】：

有一個或者多個 LIM 結(jié)構(gòu)域的蛋白）:根據(jù)以及胞質(zhì) LIM 蛋白。主要成員包括 LMO1、個 LIM 結(jié)構(gòu)域，一個間隔區(qū)和一個激酶結(jié)通常有兩個 N 末端的結(jié)構(gòu)域構(gòu)成，由一個域組成。 結(jié)構(gòu)域并且含有其他結(jié)構(gòu)域的蛋白質(zhì)。結(jié)構(gòu)由 LIM 結(jié)構(gòu)域和 HD 同源域兩部分組成的這兩種結(jié)構(gòu)對于 LIM 蛋白作為轉(zhuǎn)錄因子起LIM-HD 的轉(zhuǎn)錄和調(diào)節(jié)的功能。

碩士學(xué)位論文 Isl-1 的研究進展、結(jié)構(gòu)和表達胰島素增強子結(jié)合蛋白1（insulin gene enhance blsson等人在大鼠胰島素瘤細胞系RIN中發(fā)現(xiàn)[17]。，主要包含6個外顯子和5個內(nèi)含子，外顯子2和外4編碼同源結(jié)構(gòu)域[1]。它屬于LIM-HD蛋白，與其有半胱氨酸和組氨酸區(qū)域，與其他蛋白質(zhì)相互的器官中都是有表達的，大多集中在胚胎發(fā)育和島β細胞中高表達，在不同的時間和不同的組織圖1-2）

調(diào)控相關(guān)基因的表達[29]。Lin-4是最早發(fā)現(xiàn)的小分子，在線蟲、水稻、擬南芥種以上種類似lin-4的小分子RNA，給它命名和作用機制在細胞中經(jīng)過RNA聚合酶Ⅱ的作用轉(zhuǎn)錄成輸出受體Exportin-5的共同作用下, 通過細進一步剪切, 形成長度約22個堿基左右的轉(zhuǎn)錄后的調(diào)控經(jīng)過翻譯促進、翻譯抑制以鏈中成熟的miRNA單鏈結(jié)合到 RISC 復(fù)點結(jié)合,從而抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄翻譯或降解熟miRNA單鏈結(jié)合到RISC復(fù)合體上，經(jīng)過對節(jié)基因的表達。miRNA生物合成及作用機制
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