發(fā)布時間：2020-09-11 12:33

　　 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)是飼料中檢出率最高的霉菌毒素。DON可通過氧化損傷促進淋巴細胞凋亡,降低動物機體免疫力。硒具有抗氧化,提高動物機體免疫力等生物學特性。本研究以體外培養(yǎng)的原代豬脾臟淋巴細胞為模型,探究亞硒酸鈉(Na_2SeO_3)對DON染毒豬脾臟淋巴細胞部分細胞因子和免疫球蛋白的影響。試驗分為空白對照組(C組),硒單獨作用組(S組,Na_2SeO_3的濃度為2μmol/L),DON單獨作用組(分為D1、D2、D3、D4組,DON濃度分別為100 ng/mL、200 ng/mL、400ng/mL、800 ng/mL),硒和DON共同作用組(分為SD1、SD2、SD3、SD4組,Na_2SeO_3和DON的濃度分別為2μmol/L和100 ng/mL、2μmol/L和200 ng/mL、2μmol/L和400ng/mL、2μmol/L和800 ng/mL)。培養(yǎng)12 h、24 h和48 h后,采用ELISA和qRT-PCR分別檢測體外培養(yǎng)豬脾臟淋巴培養(yǎng)上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量及細胞內(nèi)mRNA表達水平的變化。研究結(jié)果如下:(1)在12 h、24 h和48 h時,與空白對照組相比,除D1組個別指標外,DON單獨作用組中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量和mRNA表達水平顯著降低(P0.05)。表明DON可降低部分豬脾臟淋巴細胞細胞因子和免疫球蛋白蛋白含量和基因的表達水平。(2)在12 h、24 h和48 h時,與空白對照組相比,硒單獨作用組IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量和mRNA表達水平顯著升高(P0.05)。表明硒可提高豬脾臟淋巴細胞中部分細胞因子和免疫球蛋白含量和基因的表達水平。(3)在12 h、24 h和48 h時,硒和DON共同作用組中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ、IgG和IgM蛋白含量和基因表達量高于其相對應(yīng)DON單獨作用組,但低于空白對照組。表明硒能緩解DON所致的豬脾臟淋巴細胞細胞因子和免疫球蛋白的降低。結(jié)論:硒在一定程度上可拮抗DON致脾臟淋巴細胞的細胞免疫和體液免疫的損傷作用。
【學位單位】：四川農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2018
【中圖分類】：S816;S859.8
【部分圖文】：

織和世界衛(wèi)生組織等列入了國際研究的首要問題，呼吁全球要對其高具有耐酸耐堿耐高溫等特性，很難降解，動物食入 DON 后，會引起不良癥狀，還可影響動物的免疫功能[35]。下文主要圍繞 DON 的理化DON 對免疫器官的毒性、DON 誘導(dǎo)淋巴細胞的凋亡、對細胞因子和以及 DON 的脫毒方法展開論述。ON 的理化性質(zhì)

采用 SPSS 20.0 統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析，并用 Duncan果采用x ± SD表示，采用 P < 0.05 分析其顯著性差異，試驗m 5 作圖。淋巴細胞的分離結(jié)果 可見，圖 A 為離心前脾臟組織細胞懸液和分離液，由于脾臟淋巴液小，所以脾臟組織細胞懸液在離心管的上層，分離液在離心管液包括脾臟淋巴細胞、巨噬細胞、紅細胞、血小板、粒細胞等，平離心后分層，從而得到我們所需的脾臟淋巴細胞。圖 B 表示脾后，從上到下依次是稀釋液層、環(huán)狀乳白色淋巴細胞層、透明的分

13圖 2-3 倒置顯微鏡下豬脾臟淋巴細胞的形態(tài)(400×)Figure 2-3 The morphology of porcine splenic lymphocytes under inverted microscope圖 2-2 為瑞氏姬姆薩復(fù)合染液染色的細胞涂片，放大倍數(shù)為 400×，視野中幾有細胞的細胞核呈紫紅色，漿呈淡藍色，可斷定分離細胞為豬脾臟淋巴細胞，且分純度較高，無其他雜細胞。圖 2-3 左圖為 6 孔板培養(yǎng) 0 h 的豬脾臟淋巴細胞，放大倍數(shù)為 400×，細胞均散，輪廓清晰，折光性好。圖 2-3 右圖為 6 孔板培養(yǎng) 48h 后的豬脾臟淋巴細胞，放數(shù)為 400×，細胞輪廓清晰，折光度良好，說明細胞培養(yǎng)良好。由于豬脾臟淋巴細懸浮細胞，所以在培養(yǎng)液中增殖后為葡萄狀，如箭頭所示。

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 黃凱;朱風華;宋明明;徐丹;王赫;張瑞星;朱連勤;;嘔吐毒素體外對雞脾臟淋巴細胞的毒性作用[J];中國畜牧雜志;2015年13期

2 劉永錄;馬霞;王長林;王秀君;;黃芪多糖活性組分對雞脾臟淋巴細胞功能的影響[J];中國獸醫(yī)雜志;2015年09期

3 黃其春;楊小燕;林淑慧;何玉琴;李焰;;銀杏葉提取物對肉仔雞脾臟淋巴細胞增殖及IL-2分泌影響的血清藥理學研究[J];中國畜牧雜志;2012年15期

4 劉慶平;舍英;;L615白血病鼠胸腺和脾臟淋巴細胞脫氫酶同工酶的研究[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學院學報;1988年02期

5 蔣守群;;嘔吐毒素處理對伴刀豆球蛋白A刺激雞脾臟淋巴細胞的體外影響[J];廣東飼料;2017年05期

6 李金龍;唐兆新;孫剛;徐世文;;一氧化氮自由基在鎘致雞脾臟淋巴細胞毒性中的作用[J];黑龍江畜牧獸醫(yī);2010年11期

7 林麗華;鄭雅;鐘文平;何玉琴;;玉屏風散對雞脾臟淋巴細胞體外增殖的影響[J];福建畜牧獸醫(yī);2009年04期

8 趙現(xiàn)敏;崔保安;張紅英;胡梅;王遠閣;李改英;劉煒;杜恩忠;;中藥多糖對體外培養(yǎng)豬脾臟淋巴細胞轉(zhuǎn)化功能的影響[J];河南農(nóng)業(yè)大學學報;2007年03期

9 張金龍;李艷飛;王奔;封家旺;;維生素E缺乏致雛雞脾臟淋巴細胞凋亡[J];中國獸醫(yī)學報;2009年01期

10 陳玉庫;胡元亮;王德云;邢玉娟;郭振環(huán);王軍敏;趙曉娜;蔡丙嚴;;4種中藥成分及其復(fù)方對雞脾臟淋巴細胞增殖的影響[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學;2011年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 車向榮;賀東昌;趙志杰;梁興龍;陳亞洲;潘英方;王曉莉;;四種中藥單體對豬脾臟淋巴細胞體外增殖及細胞因子分泌的影響[A];第七屆中國飼料營養(yǎng)學術(shù)研討會論文集[C];2014年

2 朱軼豪;呂昕興;吳迪;李術(shù);滕小華;;在雞脾臟淋巴細胞中,錳誘導(dǎo)的細胞毒性對熱休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)表達的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會2013年學術(shù)年會論文集[C];2013年

3 王亞超;鄧俊良;徐世文;;玉米赤霉烯酮對體外培養(yǎng)雞脾臟淋巴細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜內(nèi)科學分會第七屆代表大會暨學術(shù)研討會論文集（下冊）[C];2011年

4 尹君;張惠銘;何亞男;管曉艷;;免疫組化方法檢測抗腫瘤壞死因子α單克隆抗體對食蟹猴脾臟淋巴細胞的影響[A];2015年（第五屆）藥物毒理學年會論文集[C];2015年

5 王遠閣;崔保安;張紅英;胡梅;趙現(xiàn)敏;;黃芪板藍根等多糖成分對雞淋巴細胞體外增殖的影響[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第六屆理事會第二次會議暨教學專業(yè)委員會第六屆代表大會論文集[C];2006年

6 梅宗香;朱曉彤;束剛;王松波;高萍;江青艷;;Ghrelin對雞脾臟淋巴細胞增殖和細胞因子表達的影響[A];全國動物生理生化第十次學術(shù)交流會論文摘要匯編[C];2008年

7 馬德星;潘龍;李廣興;楊靜紅;;雞白細胞介素15真核表達質(zhì)粒構(gòu)建及其體外表達[A];中國畜牧獸醫(yī)學會獸醫(yī)病理學分會第十六次學術(shù)研討會、中國病理生理學會動物病理生理專業(yè)委員會第十五次學術(shù)研討會論文集[C];2009年

8 梁興龍;賀東昌;趙志杰;車向榮;陳亞洲;潘英方;王曉莉;李敏華;;鋅、硒對體外培養(yǎng)豬脾臟淋巴細胞增殖及分泌功能的影響[A];第七屆中國飼料營養(yǎng)學術(shù)研討會論文集[C];2014年

9 李金茹;陳雪嫻;;低碘大鼠脾臟淋巴細胞超微結(jié)構(gòu)研究[A];解剖學雜志——中國解剖學會2002年年會文摘匯編[C];2002年

10 張茜;趙巧雅;陳兵;孫雪婧;王濤只;楊平;陳秋生;;脾臟淋巴細胞歸巢的比較研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會動物解剖及組織胚胎學分會第十九次學術(shù)研討會論文集[C];2016年

相關(guān)博士學位論文 前1條

1 胡崇偉;去甲腎上腺素與鋁免疫毒性的關(guān)系[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2011年

相關(guān)碩士學位論文 前10條

1 張卓;亞硒酸鈉對脫氧雪腐鐮刀菌烯醇致GPx1敲低型豬脾臟淋巴細胞氧化損傷的保護作用[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2018年

2 王雪梅;硒對DON染毒豬脾臟淋巴細胞部分細胞因子和免疫球蛋白的影響[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2018年

3 趙志杰;中草藥單體和鋅、硒對體外培養(yǎng)豬脾臟淋巴細胞增殖及其分泌功能的影響[D];山西農(nóng)業(yè)大學;2015年

4 趙傳平;亞硒酸鈉對脫氧雪腐鐮刀菌烯醇致體外培養(yǎng)豬脾臟淋巴細胞氧化損傷的保護作用研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學;2016年

5 李金龍;鎘致雞脾臟淋巴細胞凋亡機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2004年

6 王艷鳳;氟致體外培養(yǎng)牛脾臟淋巴細胞凋亡機理的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2008年

7 朱軼豪;錳誘導(dǎo)體外雞脾淋巴細胞HSPs mRNA表達的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2014年

8 呂昕興;錳對體外雞脾淋巴細胞炎癥因子和細胞因子mRNA表達的影響[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2013年

9 李義杰;熱休克蛋白70過表達對淋巴細胞輻射損傷的保護效應(yīng)[D];蘇州大學;2009年

10 張華偉;電磁脈沖對T淋巴細胞的影響及機制[D];第四軍醫(yī)大學;2012年

本文編號：2816681