【摘要】：雞傳染性支氣管炎(Avian infectious bronchitis,IB)是由雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)引起的一種急性、接觸性傳染病,雛雞感染可造成高達30%死亡,還可造成生殖器官的損傷,母雞到產蛋期沒有產蛋高峰,產蛋雞感染,造成產蛋率下降,蛋殼品質下降；給養(yǎng)殖業(yè)造成臣大的經濟損失。疫苗免疫是預防IB最有效的方法之一。然而,因為IBV容易變異導致不斷出現(xiàn)新的血清型,且不同血清型之間交叉保護能力較差,因此研究更適合的疫苗迫在眉睫。為了解我國當前IB的流行現(xiàn)狀,掌握IB優(yōu)勢流行毒株的基因型和血清型,制備匹配當前優(yōu)勢血清型的疫苗,成為當前IB防治工作的重點。本研究從2010年-2013年全國18個省份臨床發(fā)病的雞群采集了4855份組織樣品,通過病毒的分離、鑒定后,分析統(tǒng)計結果顯示IBV感染普遍存在,4年間 IBV檢出陽性率分別為8.1%、18.1%、15.5%、10.9%。對其中30株IBV分離株的Sl基因序列系統(tǒng)分析后發(fā)現(xiàn)我國當前優(yōu)勢流行毒株基因型為LX4型,占比90%(27/30),27株之間同源性在93.5%-100%,與疫苗毒株H120株的同源性僅為77.6%-78.5%,且裂解位點氨基酸序列也存在明顯差異；表明目前我國IB流行優(yōu)勢毒株和常用疫苗毒株基因型不同,且同源性較低。根據(jù)S1基因系統(tǒng)分析結果結合病料采集背景,篩選其中5株(JS101024株、SD100426株、JS121019株、BJ100306株和HuN100427株)與3株疫苗毒株(H120株、LDT3株、4/91株)制備單因子血清,通過氣管環(huán)血清交叉中和試驗鑒定血清型,計算相關性發(fā)現(xiàn)其中3株LX4基因型IBV分離株(JS101024株、SD100426株和HuN100427株)屬于同一血清型(暫命名為JS101024血清型),與目前常用疫苗毒株不屬于同一血清型。致病性研究結果表明：5株1BV分離株以相同劑量回歸28日齡的SPF雞后,都出現(xiàn)相似的臨床發(fā)病癥狀、病理剖檢和組織病變：但是致死率不同,其中SD100426株(JS101024血清型/LX4基因型)毒力較強,致死率40%,可作為攻毒候選株;而同血清型的JS101024株(JS101024血清型/LX4基因型)毒力較弱,致死率為0,抗體產生時間較其它毒株早3-7天,其F6代種毒在雞胚上的效價高達107.16EID50/0.1ml,繁殖性能最好,為最佳疫苗候選株。3株疫苗候選株(JS101024株、SD100426株和BJi00306株)與M41株制備成火活疫苗,免疫SPF雞后,用SD100426株進行攻毒保護試驗,結果表明：JS101024株制備的火活疫苗攻毒后100%臨床保護,抗體上升速度快,抗體轉陽時間比其它毒株早7日,且抗體滴度高；較其它毒株疫苗雞只帶毒、排毒時間短3～7天,該毒株制備的疫苗具有與當前IBV優(yōu)勢流行毒株匹配性好、保護率高、能顯著降低IBV水平傳播風險的優(yōu)點,是優(yōu)秀的疫苗候選株。本研究為篩選匹配IBV流行毒株的疫苗候選株提供了依據(jù),為制定IBV綜合防治措施奠定了叢礎。
【學位授予單位】：中國農業(yè)大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.31

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本文編號：2805041