【摘要】：牛傳染性鼻氣管炎由屬于I型皰疹病毒的牛傳染性鼻氣管炎引起,除導(dǎo)致發(fā)病牛高熱、流鼻液、呼吸困難外,亦可造成病牛增重緩慢、產(chǎn)奶量下降、流產(chǎn)等,嚴(yán)重危害養(yǎng)牛業(yè)的發(fā)展。為進(jìn)一步了解山東省部分牛場(chǎng)牛傳染性鼻氣管炎感染情況,本研究對(duì)山東省部分牛場(chǎng)進(jìn)行牛傳染性鼻氣管炎的流行病學(xué)調(diào)查,在流行病學(xué)調(diào)查過(guò)程中成功分離到一株牛傳染性鼻氣管炎病毒并對(duì)其進(jìn)行了初步研究,主要內(nèi)容如下:1、山東省部分牛場(chǎng)牛傳染性鼻氣管炎流行病學(xué)調(diào)查選取濟(jì)南、泰安、德州、東營(yíng)、濰坊、臨沂等6地15個(gè)奶牛場(chǎng)開展流行病學(xué)調(diào)查,共計(jì)獲得血清樣品1981份,其中犢牛血清樣品489份,成年牛血清樣品1492份,分別采用ELISA與微量血清中和法測(cè)定血清樣品中的中和抗體,結(jié)果顯示,使用ELISA法檢測(cè),14/15的牛場(chǎng)為IBRV gB抗體陽(yáng)性,場(chǎng)陽(yáng)性率為93.3%,說(shuō)明山東省的牛場(chǎng)普遍感染IBRV。進(jìn)一步分析可知,不同地區(qū)、不同牛場(chǎng)、犢牛與成年牛的抗體陽(yáng)性率差異很大,并無(wú)明顯相關(guān)性。隨機(jī)選出部分ELISA檢測(cè)為陰性、陽(yáng)性的樣品進(jìn)行微量血清中和法檢測(cè),結(jié)果顯示,中和抗體檢測(cè)SN值小于5.66可作為IBRV抗體陰性的標(biāo)準(zhǔn),微量血清中和法的陽(yáng)性檢出率略低于ELISA法。2、一株牛傳染性鼻氣管炎病毒的分離鑒定在進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查的過(guò)程中分離到一株病毒,樣品經(jīng)PCR鑒定、序列分析、接種MDBK細(xì)胞、動(dòng)物回歸等試驗(yàn)驗(yàn)證,證明分離獲得的毒株為牛傳染性鼻氣管炎病毒,將其命名為IBRV-TA株。
【學(xué)位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：S858.23;S852.653
【圖文】：

用 5%的甲醛溶液滅活僅需 1min。1.1.3主要的功能基因病毒基因組全長(zhǎng)約 135Kb，被兩個(gè)重復(fù)序列單位（分別為 IR、TR）分割成 1 個(gè)長(zhǎng)獨(dú)特區(qū)（UL）和 1個(gè)短獨(dú)特區(qū)（US），其中 IR、TR 和夾在中間的 US可沿軸旋轉(zhuǎn)180 度，從而使病毒的 DNA 分子具有兩種異構(gòu)體（Mayfield 等，1983）。盡管 IBRV的基因組分子量大，且 G+C 含量高，但隨著測(cè)序技術(shù)的發(fā)展，于 1995 年通過(guò)國(guó)際合作完成第 1株 IBRV 的測(cè)序（Genbank 編號(hào)為 AJ004801），AJ004801 由不同毒株（Cooper、P8-2、34、Jura 株）的測(cè)序數(shù)據(jù)綜合而得，測(cè)序結(jié)果顯示病毒共有 73 個(gè)開放閱讀框（ORF），IBRV 大部分基因都由 ORF 組成。病毒基因組包含 10 個(gè)編碼糖蛋白的基因，其中 6 個(gè)基因位于 UL，分別為 gK (UL53)、gC (UL44)、gB (UL27)、gH(UL22)、gM (UL10)和 gL(UL1)，其余 4 個(gè)基因位于 US，分別為 gG (UL4)、gD (UL6)、gI (US7)和 gE (US8)，如圖 1。

DZ5 14.1%（14/99）東營(yíng)DY1 32.6%（47/144）DY2 15.3%（27/176）濰坊 WF1 13.9%（11/79）臨沂LY1 4.2%（2/47）LY2 9.9%（12/121）表 9 不同地區(qū)ELISA法檢測(cè)抗體平均陽(yáng)性率匯總（2016~2018年）Table 9 Summary of detection of antibody average positive rate by ELISA in different areas (2016~2018)地區(qū) 不同地區(qū)ELISA法檢測(cè)抗體平均陽(yáng)性率濟(jì)南 10.2%泰安 58.0%德州 12.4%東營(yíng) 20.3%濰坊 18.5%臨沂 5.0%

鑒定與蝕斑純化.45μm濾器過(guò)濾除菌后接種MD，每天觀察出現(xiàn)CPE情況。如為細(xì)胞圓縮，收獲后為F0 代；CPE。將 2 號(hào)樣品F0 與其他樣種MDBK細(xì)胞，2 號(hào)樣品F0 接葡萄串狀，收獲后為F1 代。其CPE，說(shuō)明鼻拭子樣品中不包圖 3 臨床樣品 PCR 結(jié)果Fig.3 PCR result of clinical samplesrker； 1~4：1~4號(hào)臨床樣品；5：陽(yáng)性對(duì)

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2777716