【摘要】：現代生產中,給奶畜飼喂高精料日糧來滿足泌乳能量需求的飼喂模式已成為一種流行趨勢,但反芻動物攝入過多的高精料會導致瘤胃中揮發(fā)性脂肪酸的積累和脂多糖等有害物質的釋放增加。揮發(fā)性脂肪酸的累積會增加亞急性瘤胃酸中毒(subacute ruminal acidosis,SARA)的發(fā)病率;脂多糖經門靜脈入肝臟,會影響肝臟形態(tài)和代謝功能,并誘導肝細胞凋亡,使肝臟功能減弱;脂多糖經體循環(huán)進入脾臟還會對脾臟造成損傷,從而影響反芻動物的健康。本研究以關中奶羊為動物模型,模擬實際生產中的喂養(yǎng)模式,通過在日糧中添加高比例的精料誘導SARA模型,研究SARA對泌乳期關中奶山羊肝脾炎癥因子和肝脾細胞凋亡的影響,以期為奶山羊SARA與肝脾炎癥反應關系和細胞凋亡的研究積累資料,結果對奶山羊養(yǎng)殖中高精料日糧的使用和實際生產中奶牛和奶山羊等反芻動物的養(yǎng)殖有一定的指導意義。本研究的內容和結果如下:試驗選用16只體重相近、健康狀況良好,2-3胎齡的奶山羊,隨機分為對照組和高精料組,每組8只,對照組奶山羊飼喂精粗比為35∶65的日糧,高精料組奶山羊飼喂精粗比為65∶35的日糧,試驗期19周,在試驗期間所有奶山羊可自由飲水。1.在試驗的第7周、第9周、第11周、第13周、第15周、第17周和第19周,所有奶山羊頸靜脈采血進行血常規(guī)分析,19周的血同時進行血液生化分析。結果顯示,與對照組相比,高精料組奶山羊白細胞和淋巴細胞在整個試驗過程中均無顯著變化,而紅細胞在試驗第19周時顯著升高,紅細胞體積分布寬度在試驗中期有顯著升高(P0.05),其他血常規(guī)指標均無顯著變化(P0.05);所測的生化指標均無顯著變化(P0.05),提示,高精料對奶山羊的血常規(guī)和血液生化指標無顯著影響,但可提高血液中紅細胞數量。2.試驗結束時采集肝、脾組織制作HE切片進行檢測,結果顯示,與對照組相比,高精料組奶山羊肝細胞腫大、發(fā)生顆粒變性和空泡變性,中央靜脈有大量淋巴細胞浸潤;脾臟紅髓中含鐵血黃素含量降低,但結構無肉眼可見變化;提示SARA對泌乳奶山羊肝臟造成炎性損傷,泌乳奶山羊脾臟中含鐵血黃素含量下降。3.采集所有奶山羊肝脾組織樣品,采用RT-qPCR檢測肝臟和脾臟中炎性因子及其TLR4調控通路重要蛋白的基因表達。結果顯示,高精料組奶山羊肝臟組織中TLR4、NF-κB2和IL-6的表達量顯著升高(P0.05),其他基因變化不顯著(P0.05);脾臟組織中TLR4基因表達顯著升高(P0.05),NF-κB2基因表達顯著下降(P0.05),抗炎因子IL-10和促炎因子TNF-β基因表達顯著升高(P0.05),其他均無顯著性變化。4.采用Western blot技術檢測肝脾組織中TLR4信號通路重要蛋白的表達。結果顯示,在肝臟和脾臟中,MAPK通路中的JNK、ERK、P-38蛋白表達量均無顯著變化(P0.05),NF-κB通路中的NF-κB蛋白無顯著變化(P0.05)。5.通過RT-qPCR檢測肝臟和脾臟中凋亡通路上重要凋亡調控蛋白bcl-2和Bax以及凋亡執(zhí)行蛋白caspase3、caspase8和caspase9基因的表達,結果顯示,高精料組奶山羊肝臟和脾臟中的caspase9基因表達量均顯著升高(P0.05)。采用Western blot技術檢測肝臟組織caspase3蛋白的表達,結果顯示,與對照組相比,高精料組奶山羊肝脾組織caspase3蛋白表達無明顯變化。本研究結果顯示,長期給泌乳奶山羊飼喂高精料會導致奶山羊發(fā)生SARA,SARA會使血液中紅細胞數量增加;使肝細胞發(fā)生顆粒變性和空泡變性,使肝小葉中淋巴細胞浸潤,導致肝臟中IL-6基因表達升高,脾臟中TNF-β基因表達升高,脾臟中含鐵血黃素沉著降低,脾臟中NF-κB基因表達量降低,表明長期給泌乳奶山羊飼喂高精料日糧,導致奶山羊發(fā)生SARA,產生的LPS經TLR4受體通路導致肝脾臟中IL-6、TNF-β等炎性因子表達升高,從而會對奶山羊肝脾臟造成炎性損傷。
【學位授予單位】：西北農林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.27
【圖文】：

亞急性瘤胃酸中毒對泌乳期奶山羊表觀指標及肝脾形態(tài)結構診斷結果中，隨時觀察奶山羊臨床癥狀。前期高精料組奶山羊狀等與對照組相比無明顯差異，到試驗后期，高精料組佳，糞便形態(tài)呈扁狀異常。于試驗的第 0 周、1 周，4 周18 周和 19 周采集所有奶山羊的乳汁，監(jiān)測乳脂率，結果料飼喂時間的延遲，高精料組奶山羊乳汁中的乳脂率不 19 周，與對照組相比差異顯著，（P < 0.05）。試驗結束日料導致高精料組奶山羊糞便 pH 下降（圖 2-2）。表明

與對照組相比差異顯著，（P < 0.05）。試驗導致高精料組奶山羊糞便 pH 下降（圖 2-2）。表圖 2-1 高精料日糧對泌乳奶山羊乳脂率的影響ect of high-precision diet on milk fat percentage of lactatin著（P < 0.05），（n = 8）。P 值是“均值 ± SEM”（以下ant difference between groups （P < 0.05）, （n = 8）

圖 2-3 SARA 對肝臟組織結構的影響Fig. 2-3 Effect of SARA on liver tissue structureA 和 B 是對照組，C 和 D 為高精料組，其中 A 和 C 放大倍數為（100×）；B 和 D 放大倍數為（400×）A and B are the control group, C and D are the high concentrate group, wherein themagnifications of A and C are（100×）;B and D magnifications are（400×）

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本文編號：2747904