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蘭州大尾羊不同部位脂肪組織差異表達(dá)基因的篩選

發(fā)布時間:2020-06-18 13:18
【摘要】:蘭州大尾羊具有耐粗飼、飼料利用率高、適應(yīng)性強(qiáng)、肉質(zhì)鮮美等特點(diǎn),尤以尾大而著稱。本研究對3只蘭州大尾羊皮下脂肪組織、內(nèi)臟脂肪組織以及肌肉組織進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序和基因差異表達(dá)分析,利用生物信息學(xué)技術(shù)篩選出不同部位脂肪組織間的差異表達(dá)基因,并對其進(jìn)行功能注釋及通路分析,從轉(zhuǎn)錄組層面揭示蘭州大尾羊不同部位脂肪組織間的差異,進(jìn)一步挖掘出與肉品質(zhì)相關(guān)的基因,為綿羊育種提供參考。本研究主要結(jié)論如下:(1)構(gòu)建了三種不同部位脂肪組織9個cDNA文庫,并完成轉(zhuǎn)錄組測序。樣品的Clean ratio均在77.9%以上,GC含量均在49%左右,Mapping ratio均在74.43%以上。(2)蘭州大尾羊皮下脂肪組織與肌肉組織中共得到4620個差異表達(dá)基因,其中上調(diào)基因有3642個,下調(diào)基因有978個;內(nèi)臟脂肪組織與肌肉組織中共得到6214個差異表達(dá)基因,上調(diào)基因有5156個,下調(diào)基因有1058個;內(nèi)臟脂肪組織與皮下脂肪組織共得到2504個差異表達(dá)基因,其中有1398個上調(diào)基因,1106個下調(diào)基因。(3)差異表達(dá)基因的功能注釋與統(tǒng)計(jì):蘭州大尾羊皮下脂肪組織與肌肉組織差異表達(dá)基因共分類到63個條目中,其中生物過程27個、細(xì)胞成分21個、分子功能15個;內(nèi)臟脂肪組織與肌肉組織差異表達(dá)基因共分類到63個條目中,其中生物過程27個、細(xì)胞成分21個、分子功能15個;內(nèi)臟脂肪組織與皮下脂肪組織差異表達(dá)基因共分類到62個條目中,其中生物過程26個、細(xì)胞成分21個、分子功能15個。皮下脂肪組織、內(nèi)臟脂肪組織、肌肉組織的差異表達(dá)基因在生物過程、細(xì)胞成分和分子功能三個GO本體中所占比例最高的條目相同。在生物過程GO條目中,差異表達(dá)基因所占比例較高的條目為細(xì)胞過程、單一生物過程以及代謝過程等;在細(xì)胞成分GO條目中,細(xì)胞、細(xì)胞組分和細(xì)胞器等條目中差異表達(dá)基因的數(shù)目較高;在分子功能方面,結(jié)合以及催化活性等條目中差異表達(dá)基因的比例則較高。皮下脂肪組織與肌肉組織差異表達(dá)基因中共有3968個被注釋到3434個GO條目中,內(nèi)臟脂肪組織與肌肉組織差異表達(dá)基因中則有5395個被注釋到4258個GO條目中,而內(nèi)臟脂肪組織與皮下脂肪組織差異表達(dá)基因中的2143個被注釋到2541個GO條目中。(4)通過KEGG富集分析,蘭州大尾羊皮下脂肪組織、肌肉組織和內(nèi)臟脂肪組織的差異表達(dá)基因主要富集到內(nèi)分泌系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、碳水化合物代謝、脂質(zhì)代謝、氨基酸代謝、折疊分類和降解、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)以及運(yùn)輸分解等KEGG通路中。通過KEGG功能注釋,蘭州大尾羊皮下脂肪組織與肌肉組織差異表達(dá)基因中有1156個富集到290個KEGG通路;內(nèi)臟脂肪組織與肌肉組織差異表達(dá)基因中有1739個富集到298個KEGG通路;內(nèi)臟脂肪組織與皮下脂肪組織差異表達(dá)基因中有729個富集到281個KEGG通路。(5)通過對差異表達(dá)基因進(jìn)GO功能分析和KEGG通路分析,篩選出了SCD、FASN、ACACA、AGPAT2、PCK、FABP5、CPT1B等與脂肪代謝相關(guān)的基因和與肉品質(zhì)性狀相關(guān)的脂類代謝、糖酵解途徑等通路,初步揭示了蘭州大尾羊不同部位脂肪組織間與肉質(zhì)性狀相關(guān)基因表達(dá)差異,為肉羊育種提供參考。
【學(xué)位授予單位】:西北民族大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2018
【分類號】:S826
【圖文】:

電泳圖,電泳圖,蘭州大尾羊,肌肉脂肪


西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院 2018 屆碩士研究生畢業(yè)論文第 3 章 結(jié)果與分析 提取與質(zhì)量檢測Aiso Plus 法對蘭州大尾羊的肌肉脂肪組織、內(nèi)臟脂 RNA 的提取,并通過 Agilent 2100 檢測樣品總 RN-2 可知,28S/18S 的值在 1.4 以上,RIN 值在 7.2 以上較好,可以用于測序。

脂肪組織,上機(jī)測試,皮下脂肪組織,檢測濃度


圖 3-2 不同脂肪組織總 RNA 的 Agilent 2100 Bioanalyzer 檢測Figure 3-2 Ttotal RNA based on Agilent 2100 Bioanalyzer for different adipose tissues注:MVsle 為肌肉組織,S.C.fat 為皮下脂肪組織,V.C.fat 為內(nèi)臟脂肪組織。Notes: MVsle is muscle tissue, S.C.fat is subcutaneous fat tissue, V.C.fat is visceral fat tissue.對所建文庫使用 Qubit 2.0 Fluorometer 檢測濃度(表 3-1),Agilent 210檢測文庫的大。▓D 3-3)。通過檢測,說明各樣品所建文庫符合上機(jī)測試要求

【參考文獻(xiàn)】

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