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基于蛋白組學(xué)研究烏珠穆沁羊骨骼肌肌內(nèi)脂肪差異

發(fā)布時(shí)間:2020-06-17 05:56
【摘要】:烏珠穆沁羊是優(yōu)秀的肉用地方品種,它肉質(zhì)鮮嫩多汁,膻味小,富含多種礦物質(zhì),脂肪肥而不膩,并且肌內(nèi)脂肪是影響肉品分級的重要因素。本研究通過對8月齡烏珠穆沁羊不同部位骨骼肌肌內(nèi)脂肪差異的研究,探索不同部位的肌內(nèi)脂肪差異及其調(diào)控機(jī)制,為烏珠穆沁羊肉品分級奠定基礎(chǔ)。首先對烏珠穆沁羊背最長肌、股二頭肌、臂三頭肌肌肉的粗脂肪與脂肪酸酸進(jìn)行測定;之后利用IDA技術(shù)和SWATH技術(shù)鑒定股二頭肌和背最長肌肌肉總蛋白與差異蛋白,分別對總蛋白和差異蛋白進(jìn)行GO富集分析與KEGG通路分析,發(fā)現(xiàn)可能參與肌內(nèi)脂肪代謝的通路與蛋白;最后挑選差異蛋白進(jìn)行Western blot定量驗(yàn)證,主要研究結(jié)果如下:(1)通過對8月齡烏珠穆沁羊3個(gè)部位肌肉內(nèi)的粗脂肪與脂肪酸檢測發(fā)現(xiàn),粗脂肪含量股二頭肌極顯著高于其他部位(P0.01);共鑒定出36種脂肪酸脂肪酸,其總含量股二頭肌極顯著高于其他部位(P0.01);C15:1、C16:0、C18:0、C18:2c6的含量在股二頭肌中極顯著高于其他部位(P0.01);股二頭肌中對人體有益的不飽和脂肪酸,中鏈脂肪酸,n-3,n-6系列脂肪酸含量均高于其他兩個(gè)部位,所以8月齡烏珠穆沁羊股二頭肌肉品質(zhì)最好,臂三頭肌次之,背最長肌不及其他兩個(gè)部位。(2)鑒定出烏珠穆沁羊背最長肌肌肉蛋白852個(gè),股二頭肌肌肉蛋白777個(gè),兩個(gè)部位肌肉總蛋白為998個(gè),對總蛋白進(jìn)行GO富集分析與KEGG通路分析發(fā)現(xiàn),富集了 828個(gè)生物學(xué)過程(BP),161個(gè)細(xì)胞組分(CC),214個(gè)分子功能(MF)及64個(gè)通路。(3)篩選背最長肌與股二頭肌肌肉差異蛋白87個(gè),其中股二頭肌上調(diào)蛋白質(zhì)56個(gè),股二頭肌下調(diào)蛋白31個(gè);在對差異蛋白進(jìn)行GO富集分析與KEGG通路分析發(fā)現(xiàn),富集了 126個(gè)生物學(xué)過程(BP),65個(gè)細(xì)胞組分(CC),52個(gè)分子功能(MF)以及25個(gè)通路,其中1/3通路與脂肪和脂肪酸代謝相關(guān)。(4)通過對差異蛋白ACADM在兩個(gè)部位的表達(dá)量驗(yàn)證發(fā)現(xiàn),在股二頭肌的表達(dá)量極顯著高于背最長肌(P0.01),與蛋白質(zhì)組結(jié)果一致。(5)通過差異蛋白KEGG通路分析發(fā)現(xiàn)與脂肪代謝相關(guān)的重要通路—PPAR信號通路,并對通路中FABP3、CPT1B、ACADM蛋白構(gòu)建蛋白互作網(wǎng)絡(luò)發(fā)現(xiàn),FABP3、CPT1B、ACADM蛋白可能通過與PPAR通路中PPARα、PPARγ相互作用來調(diào)節(jié)烏珠穆沁羊肌內(nèi)脂肪代謝,更多的研究還需在細(xì)胞水平進(jìn)行的驗(yàn)證。
【學(xué)位授予單位】:內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號】:S826
【圖文】:

基于蛋白組學(xué)研究烏珠穆沁羊骨骼肌肌內(nèi)脂肪差異


圖1邋PSE肉、正常肉、DFD肉逡逑Fig.邋1邋PSE邋meat,邋normal邋meat,邋DFD邋meat逡逑

脂肪細(xì)胞,粒體,肉堿,脂肪酸


酸在很多細(xì)胞中都可以被氧化分解,尤其是在肝臟與脂肪的細(xì)胞中。在脂肪酸的氧化是在線粒體中進(jìn)行,細(xì)胞質(zhì)中的脂肪酸要先進(jìn)行活化,活體基質(zhì)中,經(jīng)過一系列酶的催化下被分解為乙酰CoA,最后進(jìn)入檸檬H20和C02。氧化分解過程主要有以下三個(gè)部分,如圖3所示:逡逑肪活化逡逑脂肪酸在細(xì)胞質(zhì)中,為了可以進(jìn)入線粒體基質(zhì)內(nèi),脂肪酸被線粒體外膜成酶(Acyl-CoASynthetase)的催化轉(zhuǎn)化為脂酰CoA,此反應(yīng)不可逆。逡逑酰CoA向線粒體轉(zhuǎn)運(yùn)逡逑中合成的脂酰CoA要進(jìn)入線粒體基質(zhì)中才能被氧化,而長鏈的脂酰Co過線粒體膜進(jìn)入線粒體基質(zhì),需借助肉堿穿梭系統(tǒng)的轉(zhuǎn)運(yùn)才可以進(jìn)入。在肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(Carnitine邋Acyltransferase)的催化下與肉堿相連,體膜。脂酰CoA從細(xì)胞質(zhì)進(jìn)入線粒體使脂肪氧化分解至關(guān)重要的一步。逡逑脂肪酸P-氧化作用逡逑酸通過脂酰CoA合成酶與肉堿穿梭系統(tǒng)的活化進(jìn)入線粒體及之內(nèi),進(jìn)-

【參考文獻(xiàn)】

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2 趙s

本文編號:2717175


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