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黃牛IGF1R基因遺傳變異及其對(duì)成肌細(xì)胞增殖、分化的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-06-13 17:07
【摘要】:影響肉牛產(chǎn)業(yè)化發(fā)展的重要因素之一是肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育,它一直都是遺傳改良研究的關(guān)鍵。然而肌肉發(fā)育的分子基礎(chǔ)薄弱束縛了黃牛的分子育種。胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF1R)基因在免疫調(diào)節(jié),肌肉和骨骼生長(zhǎng)中起著至關(guān)重要的作用。具有廣泛的生物學(xué)功能,是研究肌肉發(fā)育的重要候選因子。因此,本研究以基于PCR分型的方法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),研究了中國(guó)黃牛IGF1R基因InDel和CNV的多態(tài)性及其對(duì)生長(zhǎng)發(fā)育的影響。利用干擾技術(shù)、CCK-8、EdU、流式細(xì)胞術(shù)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western Blot等技術(shù)研究了IGF1R基因?qū)ε<∪饧?xì)胞增殖和分化的分子機(jī)制。獲得以下主要結(jié)果:1.黃牛IGF1R基因InDel位點(diǎn)多態(tài)性及其與生長(zhǎng)性狀的相關(guān)性研究本研究以秦川牛、晉南牛、夏南牛和南陽(yáng)牛共計(jì)537頭母牛為研究對(duì)象篩選到InDel位點(diǎn),利用PCR的方法對(duì)其分型后結(jié)合黃牛生長(zhǎng)性狀分析發(fā)現(xiàn),四種黃牛品種均表現(xiàn)II、ID和DD三種基因型;在晉南牛和南陽(yáng)牛中,InDel多態(tài)性與部分生長(zhǎng)性狀顯著相關(guān)(P0.05)。2.IGF1R基因CNV在四個(gè)黃牛群體中的分布及與表型的關(guān)聯(lián)性本研究以秦川牛、晉南牛、夏南牛和南陽(yáng)牛共計(jì)422頭母牛為研究對(duì)象檢測(cè)了IGF1R基因相對(duì)拷貝數(shù)的分布,在晉南牛、秦川牛和南陽(yáng)牛中分布較離散。在晉南牛、秦川牛和南陽(yáng)牛中,CNV多態(tài)性與部分生長(zhǎng)性狀顯著相關(guān)(P0.05);通過生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)牛CNV區(qū)域與人類基因組CNV高度相似,并且存在大量轉(zhuǎn)錄因子、DNA酶I超敏感位點(diǎn)和高水平的組蛋白乙;。3.IGF1R基因促進(jìn)牛肌細(xì)胞增殖和分化利用RT-qPCR試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)IGF1R基因在胎牛、成年牛時(shí)期肌肉表達(dá)量存在顯著差異。利用CCK-8、EdU和流式細(xì)胞技術(shù)試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)干擾IGF1R基因可使細(xì)胞增殖活性減弱。利用RT-qPCR和Western Blot試驗(yàn),發(fā)現(xiàn)干擾IGF1R基因可使PCNA和CyclinE1的表達(dá)量顯著下降,說明干擾IGF1R基因能夠抑制肌細(xì)胞增殖;干擾IGF1R基因,能使MYOD基因的表達(dá)量顯著下降,證明干擾IGF1R基因能夠抑制肌細(xì)胞分化。綜上可知,IGF1R基因能夠促進(jìn)肌細(xì)胞增殖和分化。本研究揭示了IGF1R基因?qū)S牛生長(zhǎng)發(fā)育的影響,為中國(guó)黃牛良種保存和肉牛遺傳改良提供新的分子標(biāo)記。
【圖文】:

骨骼肌,生成過程,羊毛產(chǎn)量


圖 1-1 骨骼肌生成過程(Chal JPourquié O 2017)Fig.1-1 Stages of skeletal myogenesis子育種的研究進(jìn)展子育種的概念與意義0 世紀(jì) 80 年代以來(lái),將統(tǒng)計(jì)方法廣泛應(yīng)用于家畜動(dòng)物遺傳研究中。傳學(xué)已顯示出許多重要特征,如生長(zhǎng)速度,羊毛產(chǎn)量和產(chǎn)仔數(shù)都是多境都會(huì)影響它們。數(shù)量遺傳學(xué)也提供了一些解釋自然選擇的方法(B

序列,拷貝數(shù),復(fù)制叉


圖 1-2 拷貝數(shù)變異的結(jié)構(gòu)Figure 1-2 Structure of copy number variation數(shù)變異的形成機(jī)制貝數(shù)變異的機(jī)制大致分為四種(圖 1-3):(1)非同源末端連 雙聯(lián)斷裂而進(jìn)化出的途徑,不依賴 DNA 同源性而將兩個(gè) DNA從而達(dá)到快速修復(fù) DSB 的目的,是效率高最活躍的修復(fù)機(jī)02 年研究發(fā)現(xiàn) CNV 常常在非同源末端的連接處出現(xiàn)(Nobile C依靠其他基序元件,通過自身的結(jié)構(gòu)來(lái)產(chǎn)生拷貝數(shù)變異(Sha2)非等位基因同源重組,一般指在特定情況下(例如減數(shù)分裂發(fā)生配對(duì)重組,造成序列交換的過程(Stankiewicz PLupski J R在同一條染色體上會(huì)產(chǎn)生 CNV,在不同染色體上會(huì)形成易位3)復(fù)制叉停滯和模板轉(zhuǎn)換,,允許復(fù)制叉的滯后鏈脫離并切換到區(qū)域且這兩個(gè)復(fù)制叉在三維結(jié)構(gòu)上非常接近。在初生的 DNA 鏈復(fù)制叉之前,DNA 合成將在第二個(gè)位點(diǎn)暫時(shí)啟動(dòng)。這個(gè)過程可在原始模板上的 DNA 合成完成之前模板轉(zhuǎn)換從而產(chǎn)生 CN
【學(xué)位授予單位】:西北農(nóng)林科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2019
【分類號(hào)】:S823.81

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2 金崇富;王金玉;張跟喜;楊智青;時(shí)凱;陳長(zhǎng)寬;陳應(yīng)江;;雞IGF1、IGF2基因的遺傳互作效應(yīng)[J];江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué);2015年11期

3 金崇富;時(shí)凱;陳應(yīng)江;陳長(zhǎng)寬;;雞胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體基因G26336A、C111014A多態(tài)位點(diǎn)的檢測(cè)及其與生產(chǎn)性狀的相關(guān)性[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2012年05期

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本文編號(hào):2711479

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