【摘要】：紫花地丁(Viola yedoensis)系堇菜科(Violaceae)堇菜屬(Viola L.)多年生草本植物,是中國傳統(tǒng)中藥之一,入藥部分為干燥全草,發(fā)揮抗菌消炎、清熱解毒、涼血消腫之功效�，F(xiàn)代藥理學研究發(fā)現(xiàn)紫花地丁具有較好的抗病毒、抗炎、抑菌及抗腫瘤等活性。因目前紫花地丁提取物的抗炎活性研究較少,因此本試驗從紫花地丁的成分分離檢識、體內(nèi)抗炎活性研究及其對脂多糖(LPS)誘導的宿主細胞體外抗炎活性的影響三部分展開實驗研究紫花地丁化學成分及其抗炎活性。目的:研究紫花地丁不同溶劑提取物的化學成分組成;篩選出紫花地丁的最佳有抗炎作用的溶劑提取物;探究紫花地丁最佳體內(nèi)抗炎溶劑提取物的體外抗炎作用。方法:1.采用不同極性溶劑分別以浸提法和乙醇回旋冷凝法對紫花地丁全草的化學成分進行提取,試管法和圓形濾紙法檢識不同溶劑提取物中的化學成分,減壓濃縮制得各溶劑提取物的浸膏并稱重、計算得膏率;2.給小鼠灌服回旋冷凝法提取的紫花地丁的不同提取物后,用二甲苯誘導小鼠耳廓腫脹、1%冰乙酸改變小鼠腹腔毛細血管通透性、角叉菜膠誘導大鼠足跖腫脹進行急性炎癥造模、ELISA法檢測炎性組織中PGE_2含量、硝酸還原酶法檢測炎性組織中NO含量等試驗,研究不同溶劑提取物的抗炎效果;3.以乙醇回旋冷凝法提取的乙酸乙酯提取物溶液干預脂多糖(LPS)誘導的RAW264.7細胞體外炎癥模型,ELISA法檢測其對RAW264.7細胞釋放NO、腫瘤壞死因子(TNF-α)、IL-1β、IL-6的影響,熒光定量聚合酶鏈式反應檢測其對炎性巨噬細胞中TNF-α、iNOS和C0X-2相對表達水平的影響,研究分析紫花地丁乙酸乙酯提取物的體外抗炎活性。結果:1.通過檢識得知紫花地丁中含有酚類和鞣質(zhì)、生物堿、有機酸、油脂類、香豆素和內(nèi)酯類、黃酮類、皂苷類等成分;檢識出回旋冷凝法制得的乙酸乙酯提取物主要含有黃酮類、有機酸等化合物成分;回旋冷凝提取法得各溶劑提取物的得膏率高于浸提法;2.給小鼠灌服適當濃度的回旋冷凝法提取的乙酸乙酯提取物溶液抑制二甲苯致耳廓炎效果與生理鹽水組有顯著性差異(P0.05);在整個監(jiān)測小鼠足跖腫脹抑制率過程中乙酸乙酯提取物組與生理鹽水組比較均差異極顯著(P0.01),石油醚提取物組及水相提取物組也有抑制小鼠足跖腫脹的趨勢,但差異不明顯,乙酸乙酯提取物能減少炎癥組織中PGE_2含量,與生理鹽水組比較差異顯著(P0.05);紫花地丁各溶劑提取物干預小鼠腹腔注射1%冰乙酸引起毛細血管通透性增加試驗中,乙酸乙酯提取物組的光密度值(OD值)與生理鹽水組比較差異顯著(P0.05);紫花地丁的乙酸乙酯提取物組與生理鹽水組比較顯著減少了釋放到炎性組織中的NO(P0.05);3.回旋冷凝法制得的紫花地丁的乙酸乙酯提取物能顯著抑制炎性細胞NO(P0.05)的釋放和顯著降低了炎性細胞IL-1β、IL-6、TNF-α等細胞因子含量及iNOS、TNF-α、COX-2 mRNA的表達量。結論:摸清了紫花地丁的化學成分由酚類和鞣質(zhì)、生物堿、有機酸、油脂類、香豆素和內(nèi)酯類、黃酮類、皂苷類等組成,回旋冷凝法的得膏率優(yōu)于浸提法;篩選出乙酸乙酯提取物是紫花地丁具有抗炎活性的提取物;回旋冷凝法提取的乙酸乙酯提取物能下調(diào)LPS誘導的RAW264.7細胞IL-1β、IL-6、TNF-α等細胞因子的釋放量和下調(diào)TNF-α、COX-2、iNOS mRNA的表達量。
【圖文】：

紫花地丁各溶劑提取物對二甲苯致耳廓腫脹影響

紫花地丁不同提取物對炎性足跖腫脹度的影響
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S853.7

【參考文獻】

相關期刊論文 前10條

1 黨曉芬;張琪;余倩;李翠芹;;王不留行抗炎鎮(zhèn)痛活性部位的篩選及其機制[J];華西藥學雜志;2015年06期

2 金蘭梅;伍清林;張越;林璐璐;;紫花地丁對奶牛乳房炎主要病原菌體外抑菌試驗[J];金陵科技學院學報;2015年02期

3 柳航;胡巍;方蕓;;紫花地丁乙酸乙酯部位的化學成分研究[J];安徽醫(yī)藥;2015年06期

4 王春娟;;仙人掌、紫花地丁外敷治療流行性腮腺炎143例[J];中國中醫(yī)藥科技;2015年03期

5 張賢;郭澤;張沖;王平;王沙沙;程瑤;張雪梅;;黃芪總黃酮對脂多糖體外誘導的RAW264.7細胞的細胞因子和NO分泌水平的影響[J];中國獸醫(yī)科學;2015年03期

6 歐麗蘭;余昕;朱燁;張椿;;川黃柏抗炎活性部位的篩選研究[J];華西藥學雜志;2015年01期

7 陳蔚燕;;紫花地丁不同方式提取物抑菌效果研究[J];現(xiàn)代農(nóng)藥;2014年05期

8 方瑤;毛旭虎;;小鼠巨噬細胞RAW264.7的培養(yǎng)技巧及經(jīng)驗總結[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2012年22期

9 康懷興;;紫花地丁的抗菌活性分析[J];中國民族民間醫(yī)藥;2012年14期

10 陳凱;竇月;孟凡剛;田源;陳智;田景振;;板藍根抗炎作用有效部位初步篩選[J];中國實驗方劑學雜志;2012年06期

相關碩士學位論文 前10條

1 王特日格樂;沙蔥總黃酮對LPS誘導的小鼠腹腔巨噬細胞抗炎作用的研究[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學;2018年

2 楊彩霞;苘麻葉總黃酮體外抗炎活性的研究[D];沈陽農(nóng)業(yè)大學;2016年

3 張智偉;紫花地丁含藥血清對巨噬細胞炎癥因子分泌的影響[D];貴陽中醫(yī)學院;2014年

4 曹捷;紫花地丁黃酮苷類成分的定性定量研究[D];復旦大學;2013年

5 徐藝榮;九種黃酮類化合物對LPS誘導的RAW264.7細胞PGE_2、COX-2表達的影響[D];天津科技大學;2012年

6 武劍;柴胡多糖對巨噬細胞免疫功能的調(diào)節(jié)及對TLR4信號通路的影響[D];復旦大學;2012年

7 趙戰(zhàn)峰;紫花地丁注射液的研制[D];西北農(nóng)林科技大學;2010年

8 湯沛然;紫花地丁質(zhì)量控制研究[D];成都中醫(yī)藥大學;2009年

9 劉旬;紫花地丁中水溶性化學成分的研究[D];吉林大學;2009年

10 鄭蕾;紫花地丁有效成分的提取及質(zhì)量標準的研究[D];吉林大學;2009年

，

本文編號：2709846