【摘要】：本研究的目的是采集犬新鮮羊膜制備羊膜上清液并確定最佳保存條件;建立犬角膜深層潰瘍模型,明確結(jié)膜覆蓋聯(lián)合犬羊膜上清液點(diǎn)眼治療犬深層角膜潰瘍的療效。實(shí)驗(yàn)方法:(1)采集新鮮犬羊膜制備犬羊膜上清液。為確定保存條件,將犬羊膜上清液分為PBS保存組和DMEM保存組,置于4℃、-20℃、-80℃,于第1、20、40、80 d檢測(cè)犬羊膜上清液中bFGF含量。(2)將15只堿燒傷聯(lián)合機(jī)械損傷建立犬深層角膜潰瘍模型成功的實(shí)驗(yàn)犬隨機(jī)分成深層角膜潰瘍組(C組)、結(jié)膜覆蓋組(T1組)、結(jié)膜覆蓋聯(lián)合羊膜上清液點(diǎn)眼組(T2組)。于實(shí)驗(yàn)前第3、實(shí)驗(yàn)第1、7、14、21、45 d,檢查犬眼房水中IL-1、IL-8、VEGF、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量;于實(shí)驗(yàn)前第3、實(shí)驗(yàn)第1、4、7、10、13、16、19、21d,檢測(cè)血液白細(xì)胞總數(shù);于實(shí)驗(yàn)前第3-實(shí)驗(yàn)第21 d,檢測(cè)雙眼眼壓、淚液分泌量。于實(shí)驗(yàn)第21、45 d每組隨機(jī)抽取一只,采集角膜組織,進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:(1)DMEM組犬羊膜上清液中bFGF含量在第20 d極顯著高于PBS組(p0.01);DMEM組第20 d在-80℃條件下保存顯著高于4℃條件下保存(p0.05),第40、80 d,-80℃組極顯著的高于-20℃組和4℃組(p0.01),第80 d,-20℃組與4℃組也出現(xiàn)顯著差異(p0.05)。(2)與T1組相比,T2組犬眼房水中IL-1、IL-8、VEGF、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量顯著的降低(p0.05);血液中白細(xì)胞總數(shù)在中期(6-12d)顯著降低(p0.05);淚液在中期(6、11-13 d)顯著升高(p0.05);眼壓在后期(12-21 d)極顯著升高(p0.01)。與C組相比,T2組犬眼房水中IL-1、IL-8、VEGF、MMP-1、MMP-2、MMP-9含量極顯著的降低(p0.01);(3)病理組織學(xué)結(jié)果顯示第21 d,與T1組相比,T2組角膜上皮下血管更少,但結(jié)膜與角膜上皮之間血管更加豐富。與C組相比,角膜更加完整,角膜上皮下血管更少、更細(xì)。第45 d,與T1組相比,C組角膜炎癥細(xì)胞浸潤嚴(yán)重,血管較多,睫狀體斷裂。T2組角膜厚度更加適中,角膜下血管更少,炎癥細(xì)胞浸潤更低。實(shí)驗(yàn)結(jié)論:(1)犬羊膜上清液的長時(shí)間保存會(huì)造成bFGF含量的下降,但是DMEM保存液-80℃保存可以有效減緩bFGF含量的下降,為中短期保存提供保證。(2)結(jié)膜覆蓋聯(lián)合羊膜上清液點(diǎn)眼可以有效降低犬深層角膜潰瘍角膜上皮下的炎性細(xì)胞浸潤、減少角膜損傷、提高角膜透明度、加快眼壓恢復(fù),有效維持淚液分泌量,從而加快角膜修復(fù)。
【圖文】：

3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1 犬深層角膜潰瘍模型完成犬深層角膜潰瘍模型后，眼觀角膜表面出現(xiàn)圓形缺損，缺損面光滑。采用熒光素鈉點(diǎn)眼顯示角膜中部出現(xiàn)熒光綠色淡染區(qū)，形狀規(guī)則，邊緣整齊，潰瘍表面平整，無穿孔現(xiàn)象。犬深層角膜潰瘍模型造模成功。如圖 1、2 所示。結(jié)膜覆蓋聯(lián)合羊膜上清液點(diǎn)眼對(duì)犬深層角膜潰瘍治療效果的研究

3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.3.1 犬深層角膜潰瘍模型完成犬深層角膜潰瘍模型后，眼觀角膜表面出現(xiàn)圓形缺損，缺損面光滑。采用熒光素鈉點(diǎn)眼顯示角膜中部出現(xiàn)熒光綠色淡染區(qū)，形狀規(guī)則，邊緣整齊，，潰瘍表面平整，無穿孔現(xiàn)象。犬深層角膜潰瘍模型造模成功。如圖 1、2 所示。結(jié)膜覆蓋聯(lián)合羊膜上清液點(diǎn)眼對(duì)犬深層角膜潰瘍治療效果的研究
【學(xué)位授予單位】：黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S858.292

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2709786