【摘要】：牛病毒性腹瀉-黏膜病(Bovine viral diarrhea-mucosaldisease,BVD/MD)是一種由RNA病毒—牛病毒性腹瀉病病毒(bovine viral diarrhea virus,BVDV)所引起的以腹瀉、發(fā)熱、白細胞減少、口腔黏膜潰爛、懷孕母畜流產(chǎn)等一系列臨床癥狀為特征的牛病毒性、接觸性的傳染病,當前農(nóng)業(yè)部公告已經(jīng)將BVDV定為三類疫病,世界動物衛(wèi)生組織(OIE)也將其設為B類傳染病。目的:由于國際合作交流貿(mào)易的日益頻繁以及RNA病毒的高頻突變型,使得BVDV出現(xiàn)了許多新的基因型和基因亞型,給BVDV的防控造成一定的難度。本研究通過對新疆某牛場發(fā)生的疑似牛病毒性腹瀉病診斷分析、對新疆不同地區(qū)不同養(yǎng)殖類型牛進行現(xiàn)場流行病學的調(diào)查、血清學檢測以及分子流行病學檢測,了解新疆不同地區(qū)BVDV的血清學和分子流行病學的感染情況,鑒定流行株的基因型和基因亞型。方法:1.使用詢問、臨床觀察、以及查閱免疫記錄的方法對新疆12個不同地區(qū)的16個牛場關于在BVD/MD發(fā)病、牛群的健康水平以及疫苗的免疫和流行情況進行調(diào)查;2.應用現(xiàn)場解剖、采樣送檢等方法對新疆某牛場發(fā)生的牛群腹瀉進行診斷分析;3.應用間接ELISA檢測試劑盒對從新疆不同地區(qū)采集的5833份血清樣品進行BVDV抗體、抗原的檢測;4.對臨床檢測疑似BVDV感染的牛和血清抗原檢測陽性率高的北疆地區(qū)牛采集樣品,分別進行病毒的分離培養(yǎng)以及鑒定,同時把培養(yǎng)的病毒接種MDBK細胞,觀察細胞病變,然后把培養(yǎng)的病毒和屠宰場采集的脾臟組織分別進行RNA的提取、RT-PCR的擴增、瓊脂糖凝膠電泳分析、陽性樣本回收測序,分析測序結(jié)果的正確序列,構(gòu)建進化樹等方法進行分析新疆地區(qū)BVDV主要的流行基因型和基因亞型。結(jié)果:1.新疆不同地區(qū)由于飼養(yǎng)管理、養(yǎng)殖環(huán)境以及疫苗免疫存在差別而使BVDV的感染也不同,以北部地區(qū)最高,西部地區(qū)和南疆地區(qū)次之,東部地區(qū)最低;2.發(fā)生腹瀉的牛場經(jīng)臨床和實驗室診斷,確診為BVDV的感染;3.血清學檢測抗體陽性率為52.03%(3035/5833),抗原陽性率為3.35%(13/388),并且是犢牛以及青年牛陽性率高于成年牛;4.從采集的病料樣品中成功分離出了新疆地區(qū)主要流行的毒株命名為JD001株,病毒接種MDBK細胞未見細胞病變;20份臨床疑似組織樣品的RT-PCR結(jié)果14份是陽性。結(jié)論:1.BVDV的感染因地域和飼養(yǎng)管理不同存在差別,疫苗接種地區(qū)明顯的抗體陽性率高;2.抗體、抗原陽性率水平不因養(yǎng)殖模式不同而存在差別,則說明養(yǎng)殖方式并不影響該病的流行,犢牛以及懷孕母牛的抗原陽性率最高,說明犢牛以及懷孕母牛容易感染BVDV;3.成功分離得到了新疆地區(qū)主要流行的毒株JD001株且為不致細胞病變型毒株,進化分析得到新疆地區(qū)流行株的基因型是BVDV-1型,基因亞型是1q。BVDV在新疆的感染率高、危害大,并且造成巨大經(jīng)濟負擔,應加強對BVDV的防控。
【圖文】：

現(xiàn)場流調(diào)和血清學樣品來源分布圖

病死牛剖解圖片
【學位授予單位】：石河子大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S858.23

【參考文獻】

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1 王龍;梁霄勇;季新成;史茜;冉多良;;新疆部分地區(qū)牛病毒性腹瀉病毒的分離、鑒定及分子流行病學調(diào)查[J];新疆農(nóng)業(yè)科學;2015年02期

2 王淑娟;王華;宋曉暉;孫成友;徐天剛;劉春菊;張永強;趙永剛;劉海生;王志亮;;牛病毒性腹瀉/黏膜病的診斷流行病學調(diào)查及防控[J];中國獸醫(yī)雜志;2014年03期

3 李健明;馮海峰;時坤;楊宇航;張云;杜銳;;牛病毒性腹瀉-黏膜病的流行現(xiàn)狀和診斷技術(shù)研究進展[J];經(jīng)濟動物學報;2014年02期

4 蔣穎;林燕清;陶潔;孟祥升;段小麗;王娟;王銀;張信軍;王建業(yè);朱國強;;抗牛病毒性腹瀉病毒單克隆抗體的制備及雙抗夾心ELISA檢測方法的建立[J];中國預防獸醫(yī)學報;2012年12期

5 傅彩霞;靳興軍;鄭瑞峰;郭峰;韓磊;李佳;吳惠明;王玉田;張躍;杜鵑;;北京地區(qū)規(guī)模化奶牛場三種病毒性腹瀉病的血清學調(diào)查[J];動物醫(yī)學進展;2012年05期

6 何延華;韓猛立;黃新;鐘發(fā)剛;薄新文;;牛病毒性腹瀉病毒反向遺傳學研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2012年03期

7 王文;張娟;員麗娟;季新成;;牛病毒性腹瀉病毒血清抗體檢測[J];動物醫(yī)學進展;2011年09期

8 徐守振;尹燕博;王新;;動物疫苗中常用抗原滅活劑的研究進展[J];中國畜牧獸醫(yī);2010年09期

9 李娜;韓猛立;黃新;薄新文;王新華;趙玉龍;鐘發(fā)剛;;新疆石河子地區(qū)牛病毒性腹瀉病毒的分子流行病學調(diào)查[J];石河子大學學報(自然科學版);2009年06期

10 馬秋明;王學艷;王晶鈺;何維明;;牛病毒性腹瀉病毒陜西株的分離與NS_(5b)基因序列測定[J];西北農(nóng)林科技大學學報(自然科學版);2008年12期

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1 沈敏;王新華;鐘發(fā)剛;楊華;連宏軍;陳曉軍;;應用反轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)快速檢測牛病毒性腹瀉病毒的研究[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會成立20周年慶典暨第十次學術(shù)研討會論文集（下）[C];2003年

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1 付強;牛病毒性腹瀉病毒持續(xù)性感染的分子機制研究及其定點突變株的構(gòu)建[D];石河子大學;2015年

2 王煒;牛主要呼吸道病毒病血清學調(diào)查、牛病毒性腹瀉病毒分離株鑒定及疫苗研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2014年

3 任艷;牛病毒性腹瀉病毒囊膜蛋白E2與牛胚胎滋養(yǎng)層細胞相互作用的分子機制研究[D];石河子大學;2010年

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1 邢思毅;BVDV重組E2蛋白間接ELISA檢測方法的建立及初步應用[D];黑龍江八一農(nóng)墾大學;2015年

2 王騰;BVDV RT-LAMP檢測方法的建立及BRV和BVDV二聯(lián)滅活疫苗的初步研制[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2013年

3 孟雨;牛病毒性腹瀉病毒RT-PCR檢測方法的建立及5’-UTR基因遺傳變異分析[D];西北農(nóng)林科技大學;2010年

4 林燕清;BVDV-2分離株XJ-04全基因組測序和抗BVDV單克隆抗體制備及初步應用[D];揚州大學;2010年

5 魏偉;牛病毒性腹瀉病毒抗體間接ELISA檢測方法的建立及臨床血清學調(diào)查[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2009年

6 郭燕;新疆北疆部分集約化奶牛場牛病毒性腹瀉病毒分子流行病學調(diào)查[D];石河子大學;2007年

7 高存福;牛病毒性腹瀉病毒雙抗體夾心ELISA、PCR診斷方法的建立及E2基因變異分析[D];河北農(nóng)業(yè)大學;2005年

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本文編號：2700263