【摘要】：本研究以湘東黑山羊?yàn)檠芯繉?duì)象,通過(guò)對(duì)山羊的日糧中添加不同水平的苧麻替代苜蓿(A、B、C、D替代比例依次為0%,35%,75%,100%),對(duì)山羊的生長(zhǎng)性能、消化代謝以及瘤胃發(fā)酵代謝指標(biāo)進(jìn)行測(cè)量,以得到日糧中苧麻替代苜蓿比例的適宜范圍。在此基礎(chǔ)上,獲取山羊胃腸道組織,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和蛋白印記等技術(shù)手段分別對(duì)內(nèi)源性通路凋亡基因:Bcl-2,Bcl-xl,Bax,p53的mRNA表達(dá)水平和相應(yīng)蛋白表達(dá)水平進(jìn)行分析,以得到不同水平苧麻對(duì)胃腸道組織細(xì)胞中凋亡相關(guān)基因的mRNA表達(dá)及相應(yīng)蛋白表達(dá)的影響,為反芻動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)調(diào)控與應(yīng)用提供技術(shù)支撐。在表觀水平上,不同苧麻水平條件下,山羊的初始體重與試驗(yàn)結(jié)束時(shí)的體重沒(méi)有顯著的差異(P0.05)。A、B與C三組間的增重、日增重沒(méi)有顯著差異(P0.05),但D組的增重與日增重顯著低于其他三組(P0.0001)。D組NDF攝入量顯著低于A、B組(P0.05);D組P指標(biāo)的攝入量顯著高于A組(P0.05);C、D組Ash指標(biāo)的糞便排泄量顯著高于A組(P0.05);B、C、D組的Ca指標(biāo)的糞便排泄量顯著高于A組(P0.05);C、D組的CP消化率顯著低于A組(P0.05);D組的NDF消化率顯著低于A組(P0.05);B、C、D組的ADF、Ash、Ca消化率顯著低于A組(P0.05);D組P消化率顯著高于A組(P0.05)。不同苧麻處理對(duì)DM、Energy、CP、ADF、Ash、Ca的攝入量均無(wú)顯著影響(P0.05);不同苧麻處理對(duì)DM、Energy、CP、NDF以及P指標(biāo)的糞便排泄量均無(wú)顯著影響(P0.05);不同苧麻處理對(duì)DM以及Energy消化率均無(wú)顯著影響(P0.05)。在基因表達(dá)的mRNA水平上,在瘤胃中,與A組相比較,D組中Bcl-xl的mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(P=0.004);D組相較于其它三組,Bax的mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(P=0.0007);與C組相比較,D組Bcl-2/Bax的比值顯著下調(diào)(P=0.02);Bcl-2和p53在不同水平苧麻處理下mRNA表達(dá)差異均不顯著(P0.05)。在空腸中,相較于A,B兩組,D組中p53的mRNA表達(dá)顯著上調(diào)(P=0.01);與C組相比較,D組中Bcl-2的mRNA表達(dá)有下調(diào)趨勢(shì)(P=0.07);與B組相比較,C,D兩組中的Bcl-2/Bax的比值有下調(diào)趨勢(shì)(P=0.06);Bcl-xl和Bax在不同水平苧麻處理下mRNA表達(dá)差異均不顯著(P0.05)。在回腸中,Bcl-2基因、p53基因、Bcl-xl基因、Bax基因以及Bcl-2/Bax的值在不同苧麻處理組中的mRNA表達(dá)差異均不顯著(P0.05)。不同水平苧麻處理下Caspase-3酶活在瘤胃、空腸以及回腸中均無(wú)顯著影響(P0.05)。在基因表達(dá)的蛋白水平上,在瘤胃中,與B,C組相比較,D組Bcl-xl的蛋白表達(dá)顯著下調(diào)(P=0.03);D組Bax的蛋白表達(dá)較其它三組顯著下調(diào)(P=0.002)。在空腸中,與A,C組相比較,B組p53的蛋白表達(dá)顯著上調(diào)(P=0.001);Bcl-2蛋白各苧麻處理組間的表達(dá)差異不顯著(P0.05)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,得出以下結(jié)論:(1)苧麻替代苜蓿比例不宜超過(guò)35%;(2)在基因表達(dá)的mRNA水平上,100%苧麻水平可能誘導(dǎo)瘤胃和空腸組織凋亡,造成組織損傷;(3)不同苧麻水平下的胃腸道凋亡通路可能不依賴于Caspase途徑而由AIF(凋亡誘導(dǎo)因子)來(lái)實(shí)現(xiàn);(4)在基因表達(dá)的蛋白水平上,100%苧麻水平可能影響瘤胃組織的凋亡水平,35%苧麻水平可能影響空腸組織的凋亡水平。
【圖文】：

及 D 分別代指苧麻替代苜蓿比例為 0%，，35%，75%，100%；準(zhǔn)誤差。苧麻替代苜蓿比例在瘤胃中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá) 是不同苧麻處理下山羊瘤胃組織凋亡相關(guān)蛋白印記圖，表山羊瘤胃凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)影響，結(jié)果表明，與 B，Cl 的蛋白表達(dá)顯著下調(diào)（P=0.03）；D 組 Bax 的蛋白表達(dá)較=0.002）。表 5-2 不同苧麻處理對(duì)山羊瘤胃組織凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響ffects of different ramie treatments on the expression of apoptosis relatrumen of goats (n=8)tems）處理SA B C Dxlx0.33ab0.52a0.53a0.21b00.33a0.39a0.43a0.15b0

贛南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文同苧麻替代苜蓿比例在空腸中凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)-2 是不同苧麻處理下山羊空腸組織凋亡相關(guān)蛋白印記圖，表 對(duì)山羊空腸凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)影響，結(jié)果表明，在空腸中，B 組 p53 蛋白顯著上調(diào)（P=0.001）；Bcl-2 蛋白各苧麻處理顯著（P>0.05）。表 5-3 不同苧麻處理對(duì)山羊空腸組織凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)的影響 Effects of different ramie treatments on the expression of apoptosis relatedjejunum of goats (n=8)Items）處理SEA B C Dcl-2530.35 0.33 0.17 0.39 0.00.31b0.75a0.40b0.57ab0.0
【學(xué)位授予單位】：贛南師范大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：S827.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2690358