【摘要】：禽腺病毒(Fowl Adenovirus,FAdV)屬于腺病毒科禽腺病毒屬,是雞、鴨等禽體內(nèi)常見的傳染性病毒。根據(jù)不同的特異性抗原將FAdV分為3個群,目前雞群中主要流行Ⅰ亞群FAdV。2013年以來,在我國山東、河南等省的部分地區(qū)雞群中發(fā)生了以心包積液和包涵體肝炎為特征的雞心包積液-肝炎綜合征,大量流行病學調(diào)查證實該病病原為Ⅰ亞群血清4型的FAdV(FAdV-4)。究竟是什么原因造成了FAdV-4的在我國的流行和爆發(fā)目前還沒有確切的定論,本實驗前期研究在雞新城疫弱毒中鑒定到FAdV-4的污染,推測疫苗污染可能是該病傳播的重要原因之一。那么弱毒疫苗中污染的FAdV-4與流行毒株是否一致?其基因組特點是怎樣的?FAdV廣泛存在于多種禽類的消化道和呼吸道中,可保持潛伏感染,一般情況下不表現(xiàn)發(fā)病,但是當受到應激或者有其他病原存在時便很容易出現(xiàn)癥狀,在生產(chǎn)中我們發(fā)現(xiàn)某些疑似感染FAdV的雞群在免疫雞新城疫弱毒疫苗等疫苗后反而出現(xiàn)發(fā)病,弱毒疫苗免疫對FAdV在體內(nèi)的發(fā)病存在何種影響?針對上述問題,本研究在解析FAdV-4疫苗污染株基因組基礎(chǔ)上通過系統(tǒng)的動物實驗觀察了新城疫弱毒疫苗LaSota株與FAdV在雞體內(nèi)的協(xié)同致病作用。為了研究弱毒疫苗中污染的FAdV-4分離株的全基因組特點,本研究通過擴增測序得到了全基因組序列后,應用MEGA、Editseq等生物信息學軟件對FAdV-N22分離株的遺傳進化關(guān)系以及編碼區(qū)部分序列進行分析。結(jié)果顯示,該毒株共有43段蛋白質(zhì)編碼區(qū)(CDS),全基因組遺傳進化樹顯示與血清4型屬于同一分支,并且分析Hexon、Fiber 1、Fiber 2和Penton這些基因和其他毒株之間的差異。其中,Hexon的基因同源性為98.5%-99.9%,Fiber 1的基因同源性為95.9%-99.8%,Fiber 2的基因同源性為96.8%-99.7%,Penton的基因同源性達到了99.2%-99.6%,并且系統(tǒng)進化樹分析顯示,該毒株與國內(nèi)流行的SD1601、NIVD2、GX-1等毒株具有極高的同源性,同時處于同一進化分支。為觀察垂直傳播感染的FAdV-4和新城疫弱毒疫苗在體內(nèi)存的協(xié)同致病作用,本研究隨機選擇50枚SPF雞胚通過卵黃囊接種模擬FAdV-4垂直傳播感染,同時選取等量SPF雞胚通過相同方式接種PBS用作對照。待孵化出雛后,于接毒組和對照組各取20只SPF雞于7日齡免疫新城疫IV系弱毒疫苗(LaSota株),同時各組其余雞以相同方式接種等量PBS作為對照。結(jié)果顯示FAdV-4感染的雛雞在免疫LaSota株后更容易發(fā)生嚴重的生長抑制和免疫器官損傷,造成了更高的死亡率,說明免疫LaSota株能顯著提升垂直傳播感染的FAdV-4致病性。本研究證明免疫LaSota弱毒疫苗后疫苗株與垂直傳播感染的FAdV-4在雞體內(nèi)的協(xié)同作用不僅增強了FAdV-4對SPF雞的致病力,對LaSota疫苗的免疫保護力也產(chǎn)生了一定的不良影響,提示我們對于疾病的控制不能僅僅依賴疫苗免疫,還要加強對種源的疾病凈化。
【圖文】：

生物學特點形態(tài)學特點為 20 面體對稱結(jié)構(gòu)，無囊膜，其直徑約為 70-90nm。腺病 個六鄰體構(gòu)成，中間包著直徑 60-65nm 的髓芯，252 個殼粒列在三角形的面上。稱為纖絲的纖突附在頂點殼粒上（毒有兩根纖絲，一般情況下，兩根纖絲的長度相近，并且抗的血清型纖絲長度相近而存在關(guān)聯(lián)。電鏡下觀察病毒粒子呈因為 DNA 含量和病毒蛋白存在差異，一共發(fā)現(xiàn)了 4 種類型均不相同。一般通過免疫組化或者細胞化學的方法可以在細的組織上觀察到可以用于禽腺病毒診斷的大核內(nèi)包涵體。病個病毒粒子的 11.3%-13.5%。

蛋白則與病毒免疫逃避機制存在關(guān)聯(lián)；位于早四區(qū)的 E4 產(chǎn)物則與核酸復制、宿主細生物拼接與合成、基因表達和轉(zhuǎn)錄子拼接終止等活動與有關(guān)。但是，禽腺病毒因為其乏 E3 結(jié)構(gòu)，不會編碼相關(guān)蛋白，主要原因是因為 pⅧ蛋白基因的結(jié)束號信號與 L5 開信號之間只有大約 200 個脫氧核糖核苷酸，兩者等同于直接相連，不過仍然能發(fā)現(xiàn) 退化留下的保守 PolyA 和 TATABox 序列痕跡（Chiocca et al., 1996），CELO 也同樣沒有發(fā)現(xiàn) E3 區(qū)域（Chiocca et al., 1996）腺病毒 8 型經(jīng)過測序后發(fā)現(xiàn)沒有 E1,E2 和 區(qū)域（Corredor et al., 2008）通過相互比較 FAdV-1、FAdV-2、FAdV-4、FAdV-8、FAdV和 FAdV-10 發(fā)現(xiàn)他們的基因組處于左端點位置的具有較高的氨基酸同源性，說明 OR之間功能性狀十分相似。同時對右端的序列進行比較的時候發(fā)現(xiàn)它們之間有高達 85%右的核苷酸和氨基酸同源性（Corredor et al., 2008）。FAdV 還有兩個 fiber 基因，fibe對腺病毒在機體內(nèi)復制起著至關(guān)重要的作用，fiberⅡ缺失會造成病毒自身的復制能力減弱，使得感染的宿主變少。同時，，fiberⅡ基因?qū)ο俨《驹鲋称鸬搅吮夭豢缮俚淖饔茫ㄋ妓嫉龋?012）。
【學位授予單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S852.65

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

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本文編號：2661539