【摘要】：為了探討蛋雞脂肪肝出血綜合征(FLHS)的脂肪代謝變化和尋找血液中生物標志物,本試驗選用120日齡海蘭褐蛋雞100羽,隨機分成對照組和試驗組,每組5個重復(fù),每個重復(fù)10羽,其中對照組飼喂基礎(chǔ)日糧(2678.99 kcal/kg,粗蛋白15.86%),試驗組飼喂高能低蛋白日糧(代謝能3100.00 kcal/kg,粗蛋白12.00%),試驗期為100d,分別于第40d和80d采集肝臟樣本制作病理組織切片和測定AMPK信號通路中關(guān)鍵蛋白的表達量,采集血液樣本進行GC-TOF-MS代謝組學分析。結(jié)果如下:1、與對照組相比,解剖發(fā)現(xiàn)試驗組蛋雞皮下腹部脂肪增多,肝臟邊緣鈍圓、質(zhì)脆且有黃色脂肪沉積;病理組織切片觀察試驗組肝細胞內(nèi)存在大小不一的脂肪空泡,細胞核被擠在一側(cè)。2、與對照組相比,試驗組肝臟P-AMPKα蛋白表達量顯著下降(P0.05或P0.01)。與對照組相比,在40d時ACC和P-ACC蛋白表達量顯著上升(P0.05或P0.01),而在80d時P-ACC和P-ACC/ACC蛋白表達量顯著下降(P0.05)。3、與對照組相比,血清代謝組學分析表明,試驗組40d時差異代謝物中3-羥基丁酸、油酸、異亮氨酸、亞油酸、酮基異己酸、甘露糖、苯乙酸、3-氨基異丁酸、月桂酸、胡椒堿、琥珀酸半醛、十八碳醇和苯鄰二酚含量顯著下降(P0.05或P0.01),而鄰苯二甲酸二辛酯含量顯著上升(P0.05);80d時差異代謝物中蘇氨酸、檸檬酸、磷酸鹽、棕櫚油酸、蘇糖酸、肉豆蔻酸、尿酸、蔗糖、草酸、馬來酰亞胺、衣康酸、丙醇二酸、肌氨酸、雄烯二醇、間苯二酚、丙二酸、二氫香芹醇、2-丁炔-1,4-二醇和茚滿醇含量顯著下降(P0.05或P0.01),而絲氨酸、谷氨酸和苯基β-D-吡喃葡萄糖苷含量顯著上升(P0.05)。結(jié)果表明在FLHS的影響下,蛋雞肝臟中AMPK調(diào)控脂肪酸合成的信號通路傳導(dǎo)紊亂,造成脂肪酸合成增多,加劇了脂肪的沉積。此外,代謝組學分析發(fā)現(xiàn)機體整體脂肪酸代謝和氨基酸代謝紊亂,能量代謝合成增加分解減少,3-羥基丁酸與作為監(jiān)測脂肪酸代謝重要生物標志物的3-羥基丁酸酯有著密切聯(lián)系,該物質(zhì)在FLHS的影響下變化顯著,或許也是FLHS潛在的生物標志物。
【圖文】：

圖1 AMP調(diào)節(jié)AMPK的作用模式Fig. 1 Regulation mode of AMP and AMPK可知，AMP結(jié)合去磷酸化的AMPK，使其成為AMPKK更佳活，形成R構(gòu)象的磷酸化AMPK，所以一定程度上R構(gòu)象的號通路中AMPK被激活后的產(chǎn)物。AMP的作用同時受到高濃P共同調(diào)節(jié)AMPK的活性。酶（如AMPKK等）激活A(yù)MPK主要是以磷酸化的方式進行，均有磷酸化位點，磷酸化位點的不同表明AMPK被激活的途α亞基中Thr-172是上游激酶磷酸化AMPK的主要激活位點[30]制因子LKB1作為AMPK的上游激酶，在AMPK激活循環(huán)中，對α亞基進行磷酸化后直接激活A(yù)MPK，從而影響腫瘤細胞的助蛋白STRAD和MO25形成異源三聚體，也通過磷酸化的方r172位點激活[32, 33]，與AMPK結(jié)合的AMP還通過蛋白質(zhì)磷酸，Thr172的磷酸化是調(diào)節(jié)AMPKα激酶活性的主要位點[34, 3信號通路在蛋雞脂肪肝出血綜合征中的作用，選定AMPKα為P-AMPKα（thr172）蛋白表達水平能有效地說明信號通路中

圖2 AMPK調(diào)節(jié)ACC的作用模式Fig. 2 Regulation mode of AMPK and ACC謝組學的概述統(tǒng)的基因組學和蛋白質(zhì)組學在基因和蛋白方面闡述了生命活動，但隨著有研究表明兩者并不全面[48, 49]，很多生理活動發(fā)生于代謝物層面，而代來調(diào)控生命活動[50][51]，因此研究代謝物差異是具有重大意義的。代謝、組織、器官和有機體的集合，是細胞過程的終產(chǎn)物。代謝組學的定生命系統(tǒng)對病理生理刺激或基因修飾的動態(tài)多參數(shù)代謝反應(yīng)”[52]。代謝代謝物、小分子中間體和代謝物化學過程進行分析，具體來說，是對特留下來的小分子代謝產(chǎn)物特征的系統(tǒng)研究[53]。代謝組學在疾病診斷、營毒理學等多種領(lǐng)域有著重要的作用。謝組學是一個集組群指標分析、高通量檢測和數(shù)據(jù)處理為一體的系統(tǒng)生旨在實現(xiàn)信息建模與系統(tǒng)整合的目標[54]。其主要的研究對象是小分子<1000），它們在各種代謝路徑中起著尤為重要的作用[55]。在食品安全有著新的用處，被用作在動植物的細胞和組織的提取液中檢測有毒物質(zhì)
【學位授予單位】：江西農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S831.5

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本文編號：2661523