【摘要】：牛精子冷凍保存技術已經(jīng)得到廣泛應用,但是綿羊與山羊精子解凍后活力和受精率與牛凍精相比明顯低下。為了探索綿羊與山羊精子解凍后活力以及受精率下降的原因,為提高綿羊與山羊精子解凍后活力以及受精率提供理論依據(jù)。本實驗進行了以下三個方面的研究:1.檢測比較了牛、綿羊、山羊精子冷凍處理前后精子頂體完整率及精子頭部超微結構;2.檢測比較了牛、綿羊、山羊精子冷凍處理前后精子活力、透明質酸酶活性、頂體蛋白酶活性;3.對比分析了牛、綿羊、山羊精子體外受精能力。本研究三部分實驗結果如下:第一部分實驗結果表明,(1)經(jīng)吉姆薩染色后精子頂體共分為5種類型,(1)頂體完整、(2)頂體輕微膨脹、(3)頂體膨脹、(4)頂體部分脫落、(5)頂體全部脫落;其中牛、綿羊、山羊精子冷凍處理前后、以及牛、綿羊、山羊不同物種之間頂體完整率均顯著下降。(2)冷凍處理前后精子頭部超微結構共分為4種類型,(1)頂體與質膜完整、(2)頂體完整、質膜膨脹、(3)頂體膨脹、(4)頂體與質膜囊泡化;牛冷凍精子的前3種類型占的比例山羊綿羊;牛、綿羊、山羊精子冷凍保存處理后精子頂體完整率與超微結構顯示了物種差異。第二部分實驗結果表明,(1)牛、綿羊、山羊精子在冷凍處理后活力均顯著下降;冷凍處理導致各物種活力均有下降,牛冷凍精子活力綿羊山羊,物種之間存在顯著差異;(2)牛、綿羊、山羊精子在冷凍處理后透明質酸酶活性、頂體蛋白酶活性均顯著下降,并且牛冷凍精子透明質酸酶活性、頂體蛋白酶活性綿羊山羊,物種之間存在顯著差異。第三部分實驗結果表明,(1)牛、綿羊、山羊精子在冷凍處理前后受精卵裂率均是牛綿羊山羊,但各組之間沒有顯著差異;(2)冷凍處理導致各物種受精卵裂率均有下降且存在顯著差異。本實驗結果表明冷凍保存處理對牛、綿羊、山羊精子的頂體、細胞膜具有損傷作用,并且在冷凍耐受性方面存在比較明顯的物種差異;另一方面,冷凍保存處理也造成牛、綿羊、山羊與受精相關的活力下降、透明質酸酶與頂體蛋白酶的部分流失,從而導致受精能力下降。根據(jù)以上實驗結果推測,冷凍處理影響了牛、綿羊、山羊與受精相關的結構、功能變化,但是不同物種之間存在的差異,其原理或機制需要從生殖生物學與生物化學角度進一步研究。
【圖文】：

（12）修塊：用刀片將包埋聚合好的樣品修成四邊光滑的梯形體；（13）超薄切片：用 Hitachi H-7650 型超薄切片機制備獲得 70-90 nm 的超薄片。（14）觀察與取照。1.3 統(tǒng)計分析運用統(tǒng)計學 SPSS 17.0 軟件對所得實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析。統(tǒng)計程序為：單因素方差析（one-way ANOVA）。數(shù)據(jù)表示分別以：平均值±標準差，即：x±SD。每組數(shù)據(jù)影響重3 次。檢驗結果表示：p＜0.05 時為差異顯著，，p＞0.05 時為差異不顯著。1.4 實驗結果1.4.1 冷凍保存處理對精子頂體完整率的影響

圖 2.2 牛、綿羊以及山羊精子冷凍前后精子頂體完整率的比較mparison of sperm acrosome integrity rate before and after cryopreservation among cattle, shgoat字、相同字母表示同一物種的新鮮精子與冷凍精子之間有差異，相同數(shù)字、不同字母表精子或者冷凍精子之間有差異。圖 2.2 所示，分析牛、綿羊以及山羊冷凍前后精子的頂體完整率，結果表明牛冷凍精子頂體完整率（36.45±5.33）與牛新鮮精子頂體完整率（64.10 ±4.理后牛精子頂體完整率下降，且有顯著差異（P＜0.05）。綿羊冷凍精子頂體完整率（23.27±4.15）與綿羊新鮮精子頂體完整率 （51.7處理后綿羊精子頂體完整率下降，且有顯著差異（P＜0.05）。山羊冷凍精子頂體完整率（41.01±2.37）與山羊新鮮精子頂體完整率 （59.3處理后山羊精子頂體完整率下降，且有顯著差異（P＜0.05）。牛冷凍精子頂體完整率（36.45±5.33）與綿羊冷凍精子頂體完整率（23.27±4
【學位授予單位】：內(nèi)蒙古大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：S823;S826;S827

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本文編號：2619386