【摘要】：本試驗以1日齡海蘭褐雛雞空腸和回腸組織為研究對象,利用RT-PCR的方法檢測雛雞空腸、回腸、十二指腸和盲腸組織中p Ig R m RNA的表達量;利用分子克隆技術,在體外克隆兔抗雛雞p Ig R多克隆抗體;通過口服腸炎沙門氏菌(Salmonella Enteritidis,SE)的方法感染雛雞,于感染后的1d、3d、7d和14d,利用熒光定量PCR的方法檢測雛雞空腸和回腸組織中TLR4信號通路中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p IgR m RNA的表達量;Western Blot檢測雛雞空腸和回腸組織中p Ig R蛋白表達水平;旨在探討SE對TLR4信號通路調節(jié)雛雞p Ig R的影響,結果表明:(1)利用原核表達載體融合雛雞p IgR蛋白,免疫雄性新西蘭大白兔,成功制備了兔抗雛雞p Ig R多克隆抗體。(2)SE感染雛雞空腸組織,實驗組TLR4、TRAF6、My D88、NF-κB和p Ig R mRNA表達在1d開始上調,且NF-κB m RNA表達明顯升高(P0.05);到第3d時,將實驗組和對照組對比發(fā)現(xiàn),TLR4 m RNA表達量明顯上調(P0.05),p Ig R m RNA表達量明顯提高(P0.01);隨后基因表達開始下調,至第14d,實驗組和對照組中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p Ig R mRNA表達量差異不顯著。結果表明,雛雞感染SE后,TLR4信號通路被激活,且空腸組織中p IgR mRNA的表達量升高。(3)SE感染雛雞回腸組織,實驗組TLR4、TRAF6、My D88、NF-κB和p Ig R mRNA表達量在1d開始上調,且NF-?B m RNA表達量升高(P0.05);到第3d時,將實驗組和對照組對比發(fā)現(xiàn),TLR4、My D88和p Ig R m RNA表達量極顯著升高(P0.01),而TRAF6 mRNA表達量明顯提高(P0.05);隨后基因表達量開始下調,至14d時,實驗組和對照組中TLR4、TRAF6、My D88、NF-?B和p Ig R m RNA表達量差異不顯著。結果表明,雛雞感染SE后,TLR4信號通路被激活,且回腸組織中p Ig R m RNA的表達量升高。(4)SE感染雛雞空腸和回腸組織,實驗組和對照組相比p Ig R的蛋白水平明顯上升(P0.01),結果表明,雛雞感染SE后,上調空腸和回腸組織中p Ig R的蛋白水平。(5)SE激活空腸和回腸黏膜細胞表面的TLR4信號通路上調p Ig R的表達,進而增強雛雞的腸黏膜免疫。
【學位授予單位】：東北農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S831

【參考文獻】

相關期刊論文 前2條

1 吳一凡,張雙全,高秀玉,劉曉宇;乳糖誘導pET載體表達重組蛋白的研究[J];南京師大學報(自然科學版);2002年01期

2 許國晶;繩秀珍;戰(zhàn)文斌;;牙鲆多聚免疫球蛋白受體基因的克隆、表達及鑒定[J];海洋與湖沼;2014年04期

相關碩士學位論文 前1條

1 李鵬;雞白痢沙門氏菌致病性及MyD88-依賴途徑信號分子表達的研究[D];河南農業(yè)大學;2009年

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本文編號：2557989