【摘要】：葡萄球菌是引發(fā)奶牛乳房炎主要的病原菌之一。隨著奶牛養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和國內對奶牛疾病防控的重視,奶牛乳房炎防控水平提高,致病菌種類和優(yōu)勢菌群發(fā)生了一定變化。凝固酶陰性葡萄球菌(coagulase negative staphylococcus,CNS)引起的隱性乳房炎正處于上升趨勢,在國內外均有大量的報道,而且一些研究發(fā)現(xiàn)由該菌造成的乳房炎常發(fā)生于飼養(yǎng)管理好的牛場。近年來,該菌也逐漸引起國內獸醫(yī)領域的重視。為了調查甘肅省2個奶牛場隱性乳房炎病例中CNS的感染情況,以及這些分離菌的耐藥性特征,我們主要做了以下研究:1.采用蘭州隱性乳房炎診斷液(LMT)對甘肅省周邊2個規(guī)模奶牛場的奶牛進行篩查,選擇LMT篩查結果為強陽性(+++)的奶牛乳區(qū),共采集乳樣58份。采用細菌分離、革蘭染色、接觸酶試驗、血漿凝固酶試驗等方法,分離獲得36株凝固酶陰性葡萄球菌。然后通過16 S rDNA測序和在線Blast軟件分析,確定分離的36株CNS為8個種別,分別為施氏葡萄球菌、溶血葡萄球菌、松鼠葡萄球菌、表皮葡萄球菌、路鄧葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、木糖葡萄球菌、模仿葡萄球菌,分離率分別為47.22%、25.00%、13.88%、2.77%、2.77%、2.77%、2.77%、2.77%。結果表明,引起甘肅省這2個奶牛場奶牛隱性乳房炎的CNS主要為施氏葡萄球菌、溶血葡萄球和松鼠葡萄球菌。2.選擇20種抗菌藥物,采用K-B法對36株CNS進行藥物敏感性試驗,結果表明,36株分離菌表現(xiàn)出一定的耐藥表型,對青霉素、夫西地酸、克林霉素、慶大霉素、四環(huán)素、紅霉素、阿莫西林的耐藥率分別為30.56%、19.44%、13.88%、13.88%、11.11%、11.11%、8.3%,對頭孢西丁、苯唑西林、頭孢吡肟、利福平、萬古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因等藥物敏感。其中17株施氏葡萄球菌對青霉素、四環(huán)素、阿莫西林、克林霉素的耐藥率分別為23.52%、23.52%、11.76%、11.76%;9株溶血葡萄球菌對環(huán)丙沙星、青霉素、慶大霉素、阿莫西林的耐藥率分別為44.44%、33.33%、33.33%、11.11%;松鼠葡萄球菌對夫西地酸、克林霉素、慶大霉素的耐藥率分別為100.00%、40.00%、20.00%。進一步檢測36株CNS攜帶的耐藥基因,結果顯示,36株凝固酶陰性葡萄球菌對blaZ的耐藥基因檢出率為63.88%、rpoB的耐藥檢出率為55.55%、aacA-aphD的耐藥基因檢出率為19.44%、ermA ermB ermC的耐藥基因檢出率分別為0.00%、5.55%、16.66%,vanA的耐藥檢出率為5.55%,fusB和tetK、tetM、耐藥基因的檢出率均為0.00%。其中在17株施氏葡萄球菌中fusB、bla Z、ermB和ermC、vanA的陽性檢出率分別為88.23%、58.82%、11.76%和29.41%、5.28%,在9株溶血葡萄球菌中blaZ、vanA、ermC和的陽性檢出率分別為66.66%、66.66%、11.11%,松鼠葡萄球菌中rpoB、blaZ、aacA-aphD的陽性檢出率分別為80.00%、40.00%、40.00%。結果表明,具有耐藥表型特征的CNS不一定攜帶相關耐藥基因,攜帶相關耐藥基因的菌株不一定表現(xiàn)相關的耐藥表型。
【圖文】：

似凝固酶陰性葡萄球菌(coagulaseh 后觀察，菌落較大，呈圓形、濕潤落進行染色、鏡檢（圖 2-1）。鏡檢為陽性（圖 2-2），同時挑選單個菌圖 2-1 疑似凝固酶陰性葡萄球菌菌落uspected colony of coagulase negative sta

圖 2-1 疑似凝固酶陰性葡萄球菌菌落uspected colony of coagulase negative sta圖 2-2 疑似凝固酶陰性葡萄球菌的形態(tài)Suspected form of coagulase negative stap酶陰性葡萄球菌在與過氧化氫接觸同時將分離的 36 株凝固酶陰性葡萄分離株為陽性。同時標準株金黃色西林瓶液體流速變慢，到 5h 液體完
【學位授予單位】：西北農林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2017
【分類號】：S858.23

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本文編號：2548867