發(fā)布時(shí)間：2019-08-05 17:41

【摘要】：豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是嚴(yán)重危害養(yǎng)豬業(yè)的傳染病之一,也是重點(diǎn)防控的疾病之一。人參多糖(ginseng polysaccharides complex,GPS)具有抗病毒及增強(qiáng)免疫的作用。為了尋找有效預(yù)防和治療PPRS的藥物,本試驗(yàn)以Marc-145細(xì)胞為模型,采用細(xì)胞病變抑制試驗(yàn)和MTT法測定細(xì)胞活力,觀察GPS在體外抗豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)的作用,并通過改變藥物作用方式初步探討GPS的抗病毒機(jī)制。試驗(yàn)分為6組,分別為50,100,200和400 mg/L GPS組、病毒對照組及正常細(xì)胞對照組。在GPS對PRRSV感染Marc-145細(xì)胞的阻斷和抑制作用中,各質(zhì)量濃度GPS均顯著提高感染PRRSV后Marc-145細(xì)胞的存活率(P0.05),GPS處理組Marc-145細(xì)胞中的PRRSV量均顯著低于病毒對照組(P0.05)。而且,GPS可以促進(jìn)Marc-145細(xì)胞中IL-6和IFN-γ的mRNA表達(dá),也能增強(qiáng)細(xì)胞上清中IL-6和IFN-γ的活性。本試驗(yàn)研究表明GPS在體外可有效阻斷或抑制PRRSV對Marc-145細(xì)胞的感染,提示GPS可作為預(yù)防和治療PRRS的候選藥物。
【圖文】：

圖４ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ阻斷作用中Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞上清液ＩＬ－６和ＩＦＮ－γ抗體檢測２．３ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ的抑制作用ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ抑制作用中，表３結(jié)果表明各質(zhì)量濃度ＧＰＳ均能顯著提高感染ＰＲＲＳＶ后的Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞存活率（Ｐ＜０．０５）。與病毒對照中大量細(xì)胞發(fā)生病變相比，多糖處理組中病變的細(xì)胞數(shù)量少，尤其是在高濃度多糖處理組中Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞生長狀況與正常細(xì)胞對照組差異不明顯（圖５）。ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ感染Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞的抑制作用中，ＰＲＲＳＶ的熒光定量結(jié)果見圖６。ＧＰＳ能抑制ＰＲＲＳＶ感染的Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞中病毒的增殖過程，多糖的質(zhì)量濃度越高，抑制作用越強(qiáng)。２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖處理組細(xì)胞中ＰＲＲＳＶ的數(shù)量顯著低于病毒對照組（Ｐ＜０．０５），５０和１００ｍｇ／ＬＧＰＳ組細(xì)胞中ＰＲＲＳＶ的數(shù)量與病毒對照組相比無顯著性差異（Ｐ＞０．０５）。不同處理組Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表達(dá)水平見圖７Ａ，隨著多糖質(zhì)量濃度提高，細(xì)胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表達(dá)水平逐漸提高，其中１００，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖處理組細(xì)胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表達(dá)水平顯著高于病毒對照組（Ｐ＜０．０５），５０ｍｇ／Ｌ多糖組細(xì)胞中ＩＬ－６的ｍＲＮＡ表達(dá)水平與病毒對照組相比無顯著性差異（Ｐ＞０．０５）。Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞中ＩＦＮ－γ的ｍＲＮＡ表達(dá)水平見圖７Ｂ。ＧＰＳ能提高Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞中ＩＦＮ－γ的

圖６ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ的抑制作用中被感染細(xì)胞的病毒定量圖７ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ抑制作用中Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞ＩＬ－６和ＩＦＮ－γｍＲＮＡ表達(dá)水平ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ的抑制過程中，Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞上清中ＩＬ－６的質(zhì)量濃度變化見圖８Ａ。ＧＰＳ能提高細(xì)胞上清中ＩＬ－６的質(zhì)量濃度，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖處理組的細(xì)胞上清中ＩＬ－６的質(zhì)量濃度水平顯著高于病毒對照組（Ｐ＜０．０５），５０和１００ｍｇ／Ｌ多糖組細(xì)胞上清中ＩＬ－６的水平與病毒對照組相比無顯著性差異（Ｐ＞０．０５）。ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ感染Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞的抑制作用過程中，細(xì)胞上清的ＩＦＮ－γ的質(zhì)量濃度變化水平見圖８Ｂ。隨著ＧＰＳ質(zhì)量濃度的升高，，各多糖處理組細(xì)胞上清的ＩＦＮ－γ質(zhì)量濃度水平也升高，１００，２００和４００ｍｇ／Ｌ多糖組細(xì)胞上清中ＩＦＮ－γ的質(zhì)量濃度水平顯著高于病毒對照組（Ｐ＜０．０５），５０ｍｇ／Ｌ多糖組細(xì)胞上清中ＩＦＮ－γ的質(zhì)量濃度水平與病毒對照組相比無顯著性差異（Ｐ＞０．０５）。圖８ＧＰＳ對ＰＲＲＳＶ抑制作用中Ｍａｒｃ－１４５細(xì)胞上清液ＩＬ－６和ＩＦＮ－γ抗體檢測３討論ＰＲＲＳＶ屬于動脈炎病毒科，豬感染該病毒后的臨床表現(xiàn)為母豬繁殖障礙，斷奶仔豬罹患肺炎，生長緩慢，死亡率高［１６］。時(shí)至今日，ＰＲＲＳ已在世界范圍內(nèi)蔓延，呈現(xiàn)出地方性發(fā)病特征，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。２００６年６月我國暴發(fā)的ＰＲＲＳ被鑒定為由高致病性ＰＲＲＳＶ引起的［１７］
【作者單位】： 華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科學(xué)學(xué)院國家生豬種業(yè)工程技術(shù)研究中心;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31472163) 農(nóng)業(yè)部轉(zhuǎn)基因重點(diǎn)專項(xiàng)資助項(xiàng)目(2014ZX08009-048B) 廣東省科技計(jì)劃資助項(xiàng)目(S2013020012766) 廣東省團(tuán)隊(duì)資助項(xiàng)目(2011A020102009)
【分類號】：S852.651

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1 李榮武;;新藥P—80人參多糖通過鑒定[J];東北師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1984年02期

2 唐明國;張翼伸;梁忠?guī)r;;人參多糖FeOOH微核表面絡(luò)合作用的研究[J];東北師大學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);1990年01期

3 ;[J];;年期

本文編號：2523246