【摘要】：肝臟是硒缺乏的靶器官之一,日糧中硒缺乏會導致肝臟損傷和氧化應激的發(fā)生。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激和氧化應激在多種應激引起的損傷中都發(fā)揮作用,且內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激在氧化應激引起的凋亡中扮演重要角色。肝臟疾病和肝臟損傷最根本的中心環(huán)節(jié)是肝細胞凋亡。既往研究認為肝細胞凋亡主要通過兩條信號通路介導:一條是死亡受體通路;另一條是線粒體通路。但最近的研究發(fā)現(xiàn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激信號通路亦介導細胞凋亡,但是對缺硒引起鳥類肝臟凋亡的作用機制知之甚少。本試驗研究的目的是闡明氧化—內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激通路在缺硒引起雞肝臟凋亡中的作用。本試驗中180只一日齡的海藍白蛋雞被隨機分成低硒組和正常組兩組,其中低硒組日糧硒含量為0.033 mg/kg,正常組日糧硒含量為0.2 mg/kg。在15d、25d、35d、45d、55d和65d時剖殺采取肝臟組織。用試劑盒檢測CAT活性、H2O2產(chǎn)量和抑制?OH的能力,實時定量PCR法檢測內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關基因(GRP78、GRP94、ATF4、ATF6、Caspase12)和凋亡相關基因(Caspase3和Bcl-2),免疫印跡法檢測GRP78、GRP94、Caspase3、Bcl-2和CHOP的蛋白含量,HE染色觀察雞肝臟的病理結(jié)構,電子顯微鏡觀察肝細胞凋亡的超顯微結(jié)構,TUNEL法檢測肝細胞的凋亡率。研究結(jié)果表明:(1)低硒組中CAT活性和抑制?OH的能力下降,H2O2的產(chǎn)量升高,表明雞肝臟中發(fā)生了氧化應激。(2)低硒組中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關基因(GRP78、GRP94、ATF4、ATF6、Caspase12)的m RNA水平升高,其中GRP78、GRP94和CHOP的蛋白水平也升高,此外,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)發(fā)生損傷,證明缺硒導致雞肝組織發(fā)生了內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激。(3)低硒組肝組織中Caspase3的m RNA和蛋白表達升高,Bcl-2的表達下降,超微結(jié)構觀察到肝細胞典型的凋亡特征,TUNEL檢測發(fā)現(xiàn)肝臟中凋亡細胞的數(shù)量隨著試驗進行逐漸升高,表明缺硒誘發(fā)了雞肝細胞凋亡。綜上所述,氧化—內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激信號通路參與了缺硒引起的雞肝臟凋亡這一過程。
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【學位授予單位】：東北農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S858.31

【引證文獻】

相關博士學位論文 前1條

1 劉慈;microRNA-155在缺硒性肉雞淋巴細胞凋亡中作用機制的研究[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2017年

相關碩士學位論文 前1條

1 丁月華;黑龍江省玉米ZEA污染調(diào)查與對雞體外淋巴細胞凋亡影響及硒頡頏效應[D];東北農(nóng)業(yè)大學;2017年

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本文編號：2488835