【摘要】：本研究利用重組酶聚合酶擴(kuò)增(RPA)技術(shù),根據(jù)水泡性口炎病毒印第安納型(VSV-IND)和新澤西型(VSVNJ)相對(duì)保守的L基因?yàn)榘行蛄性O(shè)計(jì)并篩選出兩套特異性的引物和探針,建立了快速鑒別檢測(cè)水泡性口炎病毒兩種血清型的雙重?zé)晒釸T-RPA方法。試驗(yàn)結(jié)果表明,該方法特異性強(qiáng),與豬水泡病病毒(SVDV)、口蹄疫病毒(FMDV)、藍(lán)舌病病毒(BTV)、豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)、牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)、豬瘟病毒(CSFV)等滅活抗原核酸無(wú)交叉反應(yīng);靈敏度高,最低可檢測(cè)核酸濃度為12.7fg/μL;簡(jiǎn)便快速,反應(yīng)時(shí)間短(15min),且重復(fù)性好。利用所建立方法對(duì)124份臨床樣品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果與雙重?zé)晒釸T-PCR一致。本文為VSV-IND和VSV-NJ的快速鑒別檢測(cè)提供一種新方法,尤其適合現(xiàn)場(chǎng)檢疫或基層實(shí)驗(yàn)室的快速檢測(cè)。
[Abstract]:In this study, (RPA) was amplified by recombinant enzyme polymerase. Two sets of specific primers and probes were designed and screened according to the relative conserved L-base of VSV-IND and (VSVNJ) of New Jersey type. A double fluorescence RT-RPA method for rapid identification and detection of two serotypes of vesicular stomatitis virus was established. The results showed that the method was specific to porcine blisters disease virus (SVDV), foot and mouth disease virus (SVDV), (FMDV), bluetongue virus (BTV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), bovine viral diarrhea virus (BVDV),). The inactivated antigen nucleic acid such as (CSFV) of CSFV had no cross reaction. The lowest detectable nucleic acid concentration is 12.7fg/ 渭 L, which is simple, rapid, short reaction time (15min) and reproducible. The established method was used to detect 124 clinical samples and the results were consistent with double fluorescence RT-PCR. This paper provides a new method for rapid identification and detection of VSV-IND and VSV-NJ, which is especially suitable for field quarantine or rapid detection in basic laboratory.
【作者單位】： 深圳出入境檢驗(yàn)檢疫局動(dòng)植物檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;中國(guó)檢驗(yàn)檢疫科學(xué)研究院;
【基金】：“十三五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃課題(項(xiàng)目號(hào):2016YFC1200905)題目:重要新發(fā)突發(fā)病原體應(yīng)急處置方案與規(guī)范研究 “十三五”國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃課題(項(xiàng)目號(hào):2016YFD0500708),題目:豬重要疫病分子檢測(cè)技術(shù)研究~~
【分類號(hào)】：S852.65

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 梁鳳霞,丁明孝,翟中和;水泡性口炎病毒釋放的方向性及其與細(xì)胞骨架的關(guān)系[J];病毒學(xué)報(bào);1993年02期

2 花群義,金寧一,徐自忠,楊云慶,董俊,楊晶焰,周曉黎;水泡性口炎病毒核蛋白基因的表達(dá)及初步應(yīng)用[J];生物工程學(xué)報(bào);2004年01期

3 盛祖勛;趙永剛;陳義平;薩仁高娃;王寶安;王志亮;;水泡性口炎病毒核蛋白基因在大腸桿菌中的表達(dá)和鑒定[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào);2005年04期

4 陳義平;盛祖勛;趙永剛;王寶安;王志亮;;印第安納型水泡性口炎病毒核衣殼蛋白基因在畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)中的表達(dá)[J];中國(guó)動(dòng)物檢疫;2006年09期

5 魏戰(zhàn)勇;王學(xué)斌;王亞賓;張紅英;陳紅英;楊明凡;崔保安;;水泡性口炎病毒對(duì)IPEC-J2細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄時(shí)相的影響[J];微生物學(xué)報(bào);2009年07期

6 張巍;王麗;孫晨;孫秀萍;蘇高莉;趙魁;陳克研;宋德光;;水泡性口炎病毒糖蛋白主要抗原決定區(qū)片段基因的原核表達(dá)和純化[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2011年04期

7 溫志遠(yuǎn);葛金英;王永;胡森;郝永清;步志高;;水泡性口炎病毒印第安納株反基因操作系統(tǒng)的建立[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2006年05期

8 褚秀玲,蘇建青,高豐;水泡性口炎病毒感染BHK-21細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)[J];河北北方學(xué)院學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2005年02期

9 周學(xué)章;李元?jiǎng)?高豐;;水泡性口炎病毒保護(hù)性抗原基因核酸疫苗質(zhì)粒的構(gòu)建及其免疫原性[J];中國(guó)生物制品學(xué)雜志;2008年06期

10 周學(xué)章;高豐;賀文琦;;水泡性口炎病毒G蛋白抗原決定區(qū)片段基因在大腸桿菌中的表達(dá)[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2006年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前4條

1 盛祖勛;陳義平;王寶安;趙永剛;王志亮;;印第安納型水泡性口炎病毒一步法RT-PCR檢測(cè)方法的建立[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

2 郭東輝;陳紅英;崔保安;李金磊;韓志濤;魏戰(zhàn)勇;;水泡性口炎病毒對(duì)IPEC-J2細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄時(shí)相的影響[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)動(dòng)物傳染病學(xué)分會(huì)第四次豬病防控學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2010年

3 李永奎;解佳佳;徐秀鵬;王君;敖芳;萬(wàn)宇順;朱應(yīng);;MicroRNA-548直接作用于IFN-γ從而削弱宿主的抗病毒反應(yīng)[A];2013年湖北省暨武漢微生物學(xué)會(huì)會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集[C];2013年

4 盛祖勛;陳義平;王志亮;趙永剛;薩仁高娃;王寶安;;印第安納型水泡性口炎病毒核蛋白基因在大腸桿菌中的表達(dá)和鑒定[A];全國(guó)人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2006年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前3條

1 齊兵;水泡性口炎病毒新型突變株的構(gòu)建及毒性的研究[D];浙江理工大學(xué);2015年

2 孫秀萍;水泡性口炎病毒G蛋白受體的篩選及初步鑒定[D];吉林大學(xué);2013年

3 王麗;水泡性口炎病毒G蛋白與LGALS1的相互作用研究[D];吉林大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：2400477