【摘要】：為建立一種敏感、快速的羊泰勒蟲(chóng)檢測(cè)方法,本研究根據(jù)GenBank中登錄的羊泰勒蟲(chóng)18S rRNA保守區(qū)設(shè)計(jì)1對(duì)特異引物,經(jīng)各反應(yīng)條件的優(yōu)化,建立了羊泰勒蟲(chóng)熒光定量PCR檢測(cè)方法。結(jié)果顯示該方法可以特異地檢測(cè)羊泰勒蟲(chóng),而對(duì)卵形巴貝斯蟲(chóng)、雙芽巴貝斯蟲(chóng)、羊巴貝斯蟲(chóng)和瑟氏泰勒蟲(chóng)檢測(cè)均為陰性;該方法的靈敏度可達(dá)2.08×10~1拷貝/μL,比普通PCR靈敏度高100倍。組內(nèi)及組間重復(fù)試驗(yàn)變異系數(shù)均小于5%。對(duì)50份臨床樣品進(jìn)行檢測(cè),熒光定量PCR和常規(guī)PCR的陽(yáng)性檢出率分別為48%和38%。本實(shí)驗(yàn)建立的熒光定量PCR檢測(cè)方法適用于羊泰勒蟲(chóng)定量分析和分子流行病學(xué)調(diào)查。
[Abstract]:In order to establish a sensitive and rapid detection method for Taylor's worm, a pair of specific primers were designed according to the 18s rRNA conservative region registered in GenBank, and a fluorescent quantitative PCR method was established for the detection of Taylor's sheep by optimizing the reaction conditions. The results showed that the method could be used to detect Taylor's worm specifically, but negative for Babes ovale, Babes double bud, Babes sheep and Taylor serovar. The sensitivity of this method can reach 2.08 脳 10 ~ (-1) copy / 渭 L, which is 100 times higher than that of ordinary PCR. The coefficient of variation of repeated tests within and between groups was less than 5. The positive rates of fluorescence quantitative PCR and routine PCR were 48% and 38% respectively. The fluorescent quantitative PCR method developed in this study is suitable for quantitative analysis and molecular epidemiological investigation of Taylor's insect in sheep.
【作者單位】： 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院動(dòng)物科技學(xué)院;預(yù)防獸醫(yī)學(xué)吉林省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院;
【基金】：吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(20150623004TC) 吉林省重點(diǎn)學(xué)科培育項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字[2015]第x030號(hào)) 吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院種子基金項(xiàng)目(吉農(nóng)院合字[2014]第Z07號(hào))
【分類(lèi)號(hào)】：S852.7

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 楊菊鳳;田慧麗;郭瑞萍;張興國(guó);徐相亭;;山東省媒介蜱類(lèi)種類(lèi)鑒定及羊泰勒蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2015年06期

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3 郭慶勇;王振寶;何曉杰;曹雯麗;巴音查汗;;牛環(huán)形泰勒蟲(chóng)病實(shí)時(shí)熒光PCR診斷方法的建立及初步應(yīng)用[J];中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年09期

4 袁延慶;李有全;劉志杰;楊吉飛;陳澤;關(guān)貴全;羅建勛;殷宏;;我國(guó)南方地區(qū)羊泰勒蟲(chóng)病的流行病學(xué)調(diào)查[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2013年06期

5 孟林明;李有全;何海寧;李志;劉志杰;陳澤;楊吉飛;關(guān)貴全;牛慶麗;羅建勛;殷宏;余四九;;甘肅河西四地市羊泰勒蟲(chóng)病的流行病學(xué)調(diào)查[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2012年11期

6 李有全;彭欲率;劉志杰;關(guān)貴全;楊吉飛;陳澤;牛慶麗;羅建勛;殷宏;;中國(guó)部分地區(qū)羊泰勒蟲(chóng)病的流行病學(xué)調(diào)查及分類(lèi)鑒定[J];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué);2012年16期

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【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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1 袁延慶;李有全;劉志杰;楊吉飛;陳澤;關(guān)貴全;羅建勛;殷宏;;我國(guó)南方地區(qū)羊泰勒蟲(chóng)病的流行病學(xué)調(diào)查[J];中國(guó)獸醫(yī)科學(xué);2013年06期

2 劉啟生;王振寶;王真;哈森;張玉婷;巴音查汗;;牛巴貝斯蟲(chóng)實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)方法的建立[J];中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào);2013年01期

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6 曹雯麗;陳亮;劉啟生;巴音查汗;;新疆牛環(huán)形泰勒蟲(chóng)病的流行現(xiàn)狀和防治[J];草食家畜;2011年03期

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9 田萬(wàn)年;賈立軍;丁德;薛書(shū)江;張守發(fā);宮江;;吉林省琿春地區(qū)羊泰勒蟲(chóng)病流行病學(xué)調(diào)查[J];畜牧與獸醫(yī);2008年03期

10 郭淑珍;馬登錄;牟永娟;楊樹(shù)猛;王文飆;格桂花;尕旦吉;方百乾;趙春生;;甘南地區(qū)羊泰勒蟲(chóng)病的預(yù)防與治療試驗(yàn)[J];中國(guó)獸醫(yī)寄生蟲(chóng)病;2006年03期

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本文編號(hào)：2354965