【摘要】：新城疫(Newcastle disease)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)引起的一種急性病毒性的傳染病,其特征是高熱、呼吸困難、下痢和神經(jīng)紊亂。NDV的宿主范圍廣泛,可感染250多種鳥類,在家禽中主要侵害雞、火雞、鵪鶉等,對養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的威脅。NDV屬于副黏病毒科、禽副黏病毒屬成員。它是單股負鏈不分節(jié)段的RNA病毒,基因組全長15K核苷酸,其基因結(jié)構(gòu)為3’-NP-P-M-F-HN-L-5’,分別編碼6種病毒蛋白及2種非結(jié)構(gòu)蛋白V和W。新城疫病毒強毒株的感染能夠引起家禽非化膿性腦炎及因此導致顯著的中樞神經(jīng)紊亂,如扭頸、頭頸震顫、轉(zhuǎn)圈、腿或翅膀麻痹和癱瘓等癥狀,其死亡率可達90%以上。目前,對新城疫病毒神經(jīng)致病機理知之甚少。本研究通過運用基因芯片技術探究新城疫病毒感染造成的家禽中樞神經(jīng)系統(tǒng)基因差異性表達譜,力求為新城疫病毒的神經(jīng)致病機理研究提供有價值的線索。本論文的主要研究結(jié)果如下:1.強弱毒力NDV感染雞中樞神經(jīng)系統(tǒng)的基因表達譜將4周齡的SPF雞分別感染NDV強毒株F48E9、強毒株Yulin及弱毒疫苗株LaSota,并設立正常(未感染)對照組。感染第五天,兩個強毒株組出現(xiàn)顯著的神經(jīng)癥狀而頻臨死亡,LaSota組和正常對照組沒有表現(xiàn)任何臨床癥狀。分別取各組雞的腦部并進行44K雞全基因組芯片(43,803 probes)表達譜分析。強毒株F48E9、Yulin組與對照組比較而共有的上調(diào)基因429個、下調(diào)基因267個。經(jīng)過GO和KEGG pathway分析,篩選出56個重要差異表達的基因,其與神經(jīng)細胞生長發(fā)育、天然免疫和細胞凋亡相關,為進一步研究提供了候選的靶基因。2.主要差異表達基因的分類篩選從差異表達顯著的基因中,篩選出9個與神經(jīng)細胞的生長發(fā)育有關的基因,ALDH1A2、TGIF1和YWHAG都涉及神經(jīng)元的分化;ALDH1A2、MDK和CNTN4涉及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育;HRAS與NBN涉及神經(jīng)元細胞的凋亡,CALB1與維持神經(jīng)元細胞體的穩(wěn)定有關。31個與天然免疫相關的基因,TLR4、TLR7、IRF7和IL18等與Toll樣受體和干擾素調(diào)節(jié)因子有關。24個(其中8個也與天然免疫相關重疊)與細胞凋亡相關的候選基因,APAF1、BAK1和BIRC2等與誘導細胞凋亡或抑制細胞凋亡有關。這些基因可以為進一步研究NDV引起的禽病毒性腦炎提供有價值的線索。3.強弱毒力NDV的感染引起雞腦組織的病理變化HE染色和免疫組化分析顯示,強毒株F48E9和Yulin引起雞大腦組織充血、神經(jīng)元細胞軟化,呈現(xiàn)非化膿性腦炎病理變化。此表明雞感染NDV強毒株而導致的神經(jīng)癥狀跟大腦組織病理變化的直接關聯(lián)性。
[Abstract]:Newcastle disease (Newcastle disease) is an acute viral infectious disease caused by Newcastle disease virus (Newcastle disease virus,NDV). It is characterized by high fever, dyspnea, dysentery and neurologic disorder. Turkey, quail and so on, pose a great threat to poultry industry. NDV belongs to paramyxovirus family, avian paramyxovirus member. It is a single-strand negative strand non-segmented RNA virus with a 15K nucleotide length. Its gene structure is 3N-NP-M-F-HN-L-5, which encodes six viral proteins and two non-structural proteins V and Wrespectively. Newcastle disease virus (NDV) infection can cause non-suppurative encephalitis in poultry and thus lead to significant central nervous disorder, such as neck twisting, head and neck tremor, rotation, leg or wing paralysis and paralysis. The mortality rate is over 90%. At present, little is known about the neuropathogenetic mechanism of Newcastle disease virus (NDV). In order to provide valuable clues for the study of the neuropathogenetic mechanism of Newcastle disease virus (NDV), the differential gene expression profiles of the central nervous system caused by Newcastle disease virus (NDV) were investigated by using gene chip technique in this study. The main results of this thesis are as follows: 1. The gene expression profiles of central nervous system (CNS) infected with strong and attenuated NDV infected SPF chickens aged 4 weeks were infected with NDV virulent strain F48E9, virulent Yulin and attenuated vaccine LaSota, respectively, and were set up as normal (uninfected) control group. On the fifth day of infection, the two virulent strains showed significant neurological symptoms, while the LaSota group and the normal control group showed no clinical symptoms. The whole genome microarray (43803 probes) expression profile of 44 K chicken was analyzed. There were 429 up-regulated genes and 267 down-regulated genes in the virulent strain F48E9 Yulin group compared with the control group. By GO and KEGG pathway analysis, 56 differentially expressed genes were screened, which were related to the growth and development of nerve cells, innate immunity and apoptosis. Classification and screening of major differentially expressed genes from differentially expressed genes, Nine genes related to the growth and development of nerve cells were screened. Both ALDH1 A2TGIF1 and YWHAG were involved in the differentiation of neurons. Both ALDH1 A2MDK and CNTN4 were involved in the development of nervous system. HRAs and NBN were involved in the apoptosis of neuronal cells, CALB1 and maintaining the stability of neuronal cell bodies. 31 genes associated with innate immunity, such as TLR4, TLR7, IRF7 and IL18, are associated with Toll like receptors and interferon regulatory factors. 24 (8 of them also overlap with innate immunity) and apoptosis related candidate genes APAF1, BAK1, BIRC2, etc. Apoptosis or inhibition of apoptosis. These genes may provide valuable clues for further study of avian viral encephalitis caused by NDV. The pathological changes of chicken brain tissue caused by the infection of strong virulence NDV and immunohistochemical analysis showed that F48E9 and Yulin caused congestion and neuronal cell softening in chicken brain tissue and presented pathological changes of non-suppurative encephalitis. This suggests a direct correlation between neurologic symptoms and pathological changes in brain tissue in chickens infected with NDV virulent strains.
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：S855.3

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 張劭俁;劉云海;倪和民;王灝;顧美超;閻們;楊菲;郭勇;;經(jīng)程序化冷凍的小鼠休眠胚胎的基因表達譜差異分析[J];中國實驗動物學報;2012年05期

2 焦明慧;周梅;陳宏權(quán);陳公偉;謝亞男;潘中婷;王學故;馬幫軍;;不同產(chǎn)脂能力豬脂肪合成相關基因表達譜分析[J];安徽農(nóng)業(yè)大學學報;2014年03期

3 駱蒙,孔秀英,霍納新,周榮華,賈繼增;基于抑制消減雜交方法的小麥抗白粉病相關基因表達譜[J];科學通報;2002年16期

4 許沈華;牟瀚舟;顧琳慧;蘇丹;朱赤紅;劉祥麟;;用基因芯片篩選高轉(zhuǎn)移卵巢癌細胞系轉(zhuǎn)移相關基因(英文)[J];遺傳學報;2007年07期

5 韋朝領;高香鳳;江昌俊;葉愛華;;基因表達譜差異顯示技術及其在植物對害蟲取食誘導反應研究中的應用(綜述)[J];安徽農(nóng)業(yè)大學學報;2006年01期

6 張鳳嬌;王玉成;高彩球;;7個檉柳ThMYB基因的鑒定及表達[J];東北林業(yè)大學學報;2014年08期

7 劉長虹;蔡路昀;韓曉旭;應鐵進;;UV-C照射后番茄差異表達基因的基因芯片檢測[J];農(nóng)業(yè)機械學報;2012年01期

8 余傳定;許沈華;牟瀚舟;姜志明;朱赤紅;劉祥麟;;胃癌差異表達基因在染色體上的定位及其功能分析(英文)[J];遺傳學報;2006年05期

9 周博;黃健華;賈世海;張勇;黃勇平;;家蠶TCTP基因的克隆、分析及其表達[J];中國農(nóng)業(yè)科學;2007年08期

10 訾乃濤;孫建義;胥傳飛;王建楓;井明艷;錢利純;;缺鋅對SD大鼠垂體基因表達譜的影響[J];農(nóng)業(yè)生物技術學報;2006年06期

相關會議論文 前10條

1 劉艷;李康;傅松濱;;基于小波分析理論的基因表達譜數(shù)據(jù)分析方法的研究[A];中國的遺傳學研究——中國遺傳學會第七次代表大會暨學術討論會論文摘要匯編[C];2003年

2 張巖;張亮;周一鳴;安爽;果德安;周玉祥;曾令文;程京;;抗真菌物質(zhì)與酵母細胞作用后全基因表達譜的聚類法分析[A];第九次全國生物物理大會學術會議論文摘要集[C];2002年

3 朱明珠;高磊;李霞;;酵母基因表達相關性與蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡距離分析[A];中國生物醫(yī)學工程進展——2007中國生物醫(yī)學工程聯(lián)合學術年會論文集（下冊）[C];2007年

4 高瑞蘭;陳小紅;林筱潔;錢煦岱;徐衛(wèi)紅;吳超群;;三七皂苷誘導造血細胞基因表達譜的研究[A];中國細胞生物學學會2005年學術大會、青年學術研討會論文摘要集[C];2005年

5 許沈華;牟瀚舟;顧琳慧;朱赤紅;劉祥麟;;用基因芯片篩選高轉(zhuǎn)移卵巢癌轉(zhuǎn)移相關的基因[A];中國細胞生物學學會醫(yī)學細胞生物學學術大會論文集[C];2006年

6 包雷;過濤;孫之榮;;挖掘基因與抗癌藥物間可能的生物學關聯(lián)[A];第九次全國生物物理大會學術會議論文摘要集[C];2002年

7 邱廣斌;郝冬梅;宮立國;李云慧;;腫瘤相關新基因MTLC的克隆及在腫瘤中的表達研究[A];第十屆全軍檢驗醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2005年

8 高瑞蘭;陳小紅;林筱潔;錢煦岱;徐衛(wèi)紅;吳超群;;三七皂苷誘導造血細胞基因表達譜的研究[A];第八屆全國中西醫(yī)結(jié)合血液病學術會議論文集[C];2007年

9 張幸國;虞朝暉;文思遠;;復方丹參注射液對血管內(nèi)皮細胞基因表達譜的影響研究[A];2006年浙江省藥品法規(guī)與臨床藥理學術研討會論文匯編[C];2006年

10 高瑞蘭;林筱潔;陳小紅;徐衛(wèi)紅;錢煦岱;吳超群;;三七皂苷誘導造血細胞基因表達譜的研究[A];2007年浙江省血液病學術年會論文匯編[C];2007年

相關重要報紙文章 前10條

1 記者 衣曉峰　通訊員 李小蓮;探尋“證”的基因表達譜[N];中國中醫(yī)藥報;2009年

2 曉明;抑制一基因 “老”鼠換新膚[N];中國醫(yī)藥報;2007年

3 記者 張曄 通訊員 周偉;我學者發(fā)現(xiàn)多基因表達譜[N];科技日報;2014年

4 ;聚類分析在自身免疫病基因表達譜研究中的初步應用[N];中國醫(yī)藥報;2003年

5 吳煜 楊宇飛 楊煥明;抗腫瘤藥研究新思路[N];中藥報;2000年

6 周艷萍;尋求腫瘤個體化治療方案[N];健康報;2006年

7 趙紹華;給孩子減肥必須“餓一餓”[N];健康時報;2007年

8 解放軍總醫(yī)院全軍腎臟病研究所教授 吳鏑邋王繼榮 劉泉 整理;推進腎病科研的四大利器[N];健康報;2008年

9 江蘇省中醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學中心 賴仁勝;腫瘤基因組 突破在云端[N];健康報;2011年

10 記者 張學全 張建松;我人類功能基因研究獲重要進展[N];新華每日電訊;2000年

相關博士學位論文 前10條

1 王翔;小麥溫光反應的分子生物學研究[D];中國農(nóng)業(yè)科學院;2014年

2 李伍舉;基于基因表達譜的樣本分型與分類研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2003年

3 梁欣偉;人臍靜脈內(nèi)皮細胞基因表達譜分析[D];第一軍醫(yī)大學;2006年

4 藺會云;一條新的轉(zhuǎn)移相關基因mag-1的研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院;2006年

5 楊志林;惡性膠質(zhì)瘤相關新基因的篩選、克隆及其特性研究[D];第一軍醫(yī)大學;2001年

6 張晶;白細胞介素2受體α基因結(jié)構(gòu)和功能的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;1998年

7 胡冉;十三種化合物誘導的小鼠原代培養(yǎng)肝細胞基因表達譜的聚類分析[D];第三軍醫(yī)大學;2005年

8 馬全紅;小鼠精子發(fā)生相關基因的克隆及分析[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學;2006年

9 唐欣;軟骨發(fā)生過程中基因表達譜的測定及生物信息學分析[D];華中科技大學;2007年

10 秦國華;二氧化硫?qū)虮磉_譜、細胞色素P450及癌變相關基因表達影響的體內(nèi)外研究[D];山西大學;2006年

相關碩士學位論文 前10條

1 趙月敏;CMFT體外抑瘤活性及對腫瘤細胞基因表達譜的影響[D];河北大學;2015年

2 江月;家蠶TGF-β家族成員dpp和daw基因的功能研究[D];蘇州大學;2015年

3 弓春玲;Hela細胞與人子宮內(nèi)膜基質(zhì)細胞中miRNA Let-7及其靶基因的關系研究[D];內(nèi)蒙古大學;2015年

4 羅影濤;腺苷酸環(huán)化酶3基因敲除小鼠主要嗅覺表皮基因表達譜分析[D];河北大學;2015年

5 甘斌;基于稀疏性理論的腫瘤基因表達譜分類[D];曲阜師范大學;2015年

6 喬玲波;StOSM基因及其耐旱功能研究[D];寧夏大學;2015年

7 趙學軍;家蠅CCTζ基因的cDNA克隆、表達及表達模式研究[D];貴陽醫(yī)學院;2015年

8 文正勇;鱖魚生長性狀數(shù)字基因表達譜分析[D];華中農(nóng)業(yè)大學;2015年

9 李曉賓;Fancd2os基因在小鼠不同組織中的表達譜分析及其真核表達載體的構(gòu)建與鑒定[D];山西醫(yī)科大學;2015年

10 陳輝;CIK誘導過程中TCR的表達變化及靶向TCR的基因編輯研究[D];廣東藥學院;2015年

，

本文編號：2251873